半干電轉印法
實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜，但使用100次后必須更換)制成的，也可以是鉑金的(這種子板價格較貴，但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至濾膜上，就像在凝膠中遷移一樣，只不過此處蛋白質的移動方向與膠平面垂直。該法轉印速度快，均勻，亦不需較大的功率。在最早的文獻中，陰極和陽極使用的是不同的緩沖液，但使用稀釋的Tris／GlycineSDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳緩沖液系統較為簡便。只需在陰極和陽極兩邊放入若干層預濕的玻璃纖維濾紙即可保持電極、凝膠和濾紙之間的良好接觸。主要試劑硝酸纖維素濾膜蒸餾水或去離子水考馬斯亮藍染色液轉印緩沖液(0.04％SDS，20％甲醇溶于48mmol／LTRIS，39mol／L甘氨酸)吸水紙(Whtaman 3 MM或替代物)主要設備半干轉印裝置實驗......閱讀全文
浸入式電轉印
實驗概要采用浸入法將蛋白質從凝膠轉移至硝酸纖維素膜是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維素膜，然后再將這種夾層組合浸入盛有大量緩沖液的轉印槽內，使電流從轉印槽的一側通向另一側。通過電洗脫的方法可將蛋白質從凝膠中轉印至濾膜上，如同在凝膠中遷移，只不過移動方向與膠平面垂直。若操作仔細，這是一種可將許多蛋白質轉印至
半干電轉印法
實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜，但使用100次后必須更換)制成的，也可以是鉑金的(這種子板價格較貴，但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至
半干電轉印法
先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上（Kyhse-Andersen1984）。平板可以是石墨（這種平板較便宜，但使用100次后必須更換）制成的，也可以是鉑金的（這種子板價格較貴，但使用壽命較長）。通過電洗
Southern－印跡實驗——電轉印法
實驗方法原理因為聚丙烯酰胺凝膠的扎徑太小，DNA不能在其橫截面上有效地擴散，毛細管轉移法不適用DNA從聚丙烯酰胺凝膠的轉移。因此，聚丙烯酰胺凝晈必須在低離子強度的緩沖液中用電轉移法進行印跡。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBE儀器、耗材Scotch-Brite墊Whatman濾紙實驗步驟1. ?在非變性
Southern－轉印分析
在膠體中的DNA 可利用毛細現象的作用將DNA 牽引轉印至覆蓋在膠片上的濾膜，經烘烤或UV 照射后，可使DNA 固定在膜上，以進行探針的雜合（hybridization） 反應。儀器用具：玻璃缸；玻璃板或吸水海綿；Crosslinker （Stratalinker 1800, Stratagene）
半干轉印與濕式轉印的區別－|－WEALTEC－威泰克
剛接觸 Western Blot 不久的用戶，在選購 WB 設備時，經常會遇到儀器選型的問題：為什么常見的蛋白質電泳的轉膜有兩種方式可以選擇，干式和濕式，那么哪種方法更適合我們呢？這里我們結合美國 WEALTEC 公司的 E-Blotter 濕轉槽和 YRDIMES 快速半干轉印槽舉例說明。
蛋白質轉印法
蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose） 上，先經尿素洗去SDS，并使蛋白質回復原態抗原性，可使用抗體進行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。儀器用具：電泳轉印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：轉印
Southern－轉印分析方法步驟
在膠體中的DNA 可利用毛細現象的作用將DNA 牽引轉印至覆蓋在膠片上的濾膜，經烘烤或UV 照射后，可使DNA 固定在膜上，以進行探針的雜合（hybridization） 反應。儀器用具：玻璃缸；玻璃板或吸水海綿；Crosslinker （Stratalinker 1800, Stratagene）
Western－blot轉印的優化
從SDS凝膠中進行Western蛋白轉印的優化需要對一系列參數進行考慮。目的是轉印所有凝膠上的蛋白并將其定量地轉移到轉印膜上。進行高效轉印需要一定程度的優化，尤其是對于大分子量和小分子量蛋白。轉印后，凝膠上應不殘留或殘留很少的蛋白。可以在轉印后進行染色進行檢測。轉移出凝膠的蛋白應該僅在接觸凝膠的膜的
濕式轉印槽使用教程
濕式轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為電泳系統的一個組件，小型轉印槽能容納2個凝膠三明治轉印夾， 用于在電泳槽內電轉印兩塊小凝膠。
轉印槽使用方法步驟
伯樂bio-rad轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為Mini-PROTEAN 3 電泳系統的一個組件，伯樂bio-rad轉印槽能容納2 個凝膠支架轉印夾，用于在Mini-PROTEAN 3 電泳槽內電轉印兩種小凝膠（Mini-PROTEAN 3 凝膠和ReadyGel 預制膠）。伯樂b
電泳和Western轉印的常見問題
表1?Common problems for electrophoresis and western bloting問 題可能原因建議解決方法推薦電壓條件下電泳時間過長。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液，使用1X稀釋液。推薦電壓條件下電流過高，熱量過大。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液，使用1X稀釋液。
半干轉印系統操作使用說明
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上，其運用了電泳檢測的方法，使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上，由于硝酸纖維素膜的可支撐性，使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做
新技術助蛋白質轉印法提速
在發明蛋白質印跡法（Western Blot）出現了30多年之后，這項技術仍然是獲取特定蛋白可靠鑒定的關鍵。許多近期涌現的產品利用各種方法來提高蛋白質印跡實驗的可重復性、敏感性、定量性以及速度。 有三個人都被認為發展了蛋白質的免疫印跡方法，但其中只有一人才算得上是“Western B
蛋白質轉印法檢定蛋白質
蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose）?上，先經?素洗去SDS，并使蛋白質回?原態抗原性，可使用抗體進?免疫染色?（Towbin?et?al,?1979）。儀器用具：電泳轉印槽?（Hoefer?Tra
四步輕松解決轉印帶來的麻煩
在之前的一篇文章中，我談到了彎曲條帶，這是一個常見由于凝膠鑄造和跑膠所引起的問題。 然而，雖然轉印似乎是一個更簡單的過程，但也很容易出錯。 下面我將介紹幾個有用的建議，讓您無時無刻地檢測到您的蛋白。沒有條帶，意味著什么？不幸的是，第一次你可能會認為你的轉印沒有起作用，當你在在暗室里成像時，沒有條帶（
蛋白質的電轉
實驗概要很多膜可作為蛋白質電轉移的固相支持物，如重氮化纖維素膜（DPT，DBM)、DEAE-纖維素膜、尼龍膜等，但用的最多的還是硝酸纖維素膜(NC膜)，該膜與蛋白質以非共價的疏水作用形式結合，結合能力約為80μg/cm2。與其它膜相比，NC膜具有不要預先活化，對轉移物質生物活性影響不大，能應用多種染
通過四步輕松解決轉印帶來的麻煩
在之前的一篇文章中，我談到了彎曲條帶，這是一個常見由于凝膠鑄造和跑膠所引起的問題。 然而，雖然轉印似乎是一個更簡單的過程，但也很容易出錯。 下面我將介紹幾個有用的建議，讓您無時無刻地檢測到您的蛋白。 沒有條帶，意味著什么？ 不幸的是，第一次你可能會認為你的轉印沒有起作用，當你在在暗室
Northern－Blotting轉印實驗（毛細管轉移法）
要進行Northern雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、
蛋白質的電轉實驗
很多膜可作為蛋白質電轉移的固相支持物，如重氮化纖維素膜（DPT，DBM）、DEAE-纖維素膜、尼龍膜等，但用的最多的還是硝酸纖維素膜（NC膜），該膜與蛋白質以非共價的疏水作用形式結合，結合能力約為80 μg/cm2。實驗方法基本方案 實驗材料 蛋白質? 試劑、試劑盒 轉移緩沖液 甲醇 電極緩沖液?
蛋白質的電轉實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液甲醇電極緩沖液儀器、耗材電轉移槽電泳儀實驗步驟1. ?剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。2. ?將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。3. ?按下列過程安裝轉移裝置，將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中，在塑料支架上放一塊海綿。4. ?將3塊
蛋白質的電轉實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
蛋白質的電轉實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 轉移緩沖液甲醇電極緩沖液儀器、耗材 電轉移槽電泳儀實驗步驟 1. ?剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。2. ?將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。3. ?按下列過程安裝轉移裝置，將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中，在塑料支架上放一塊海綿。4.
CRISPR－實驗利器：BTX－電轉儀
什么是 CRISPR?CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）, 是細菌中用于與病毒進行斗爭的免疫武器。 生命進化歷史上，細菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進化出 CRISPR 系統，利用這個系統，細菌可以不動
大分子量蛋白轉印的5個技巧
做western blot印跡膜時，較大的蛋白質眾所周知是難以處理的。 特別是，您可能很難實現良好的轉印效率。 在某些方面，蛋白質難以朝著你想要的方向前進。 我們將給5點建議，幫助膠上大分子量蛋白的轉印。 01 犧牲膠的韌性來提高效率 低濃度的丙烯酰胺凝膠可能難以操作。一旦手指觸摸它就會
大分子量蛋白轉印的5個技巧
做western blot印跡膜時，較大的蛋白質眾所周知是難以處理的。 特別是，您可能很難實現良好的轉印效率。 在某些方面，蛋白質難以朝著你想要的方向前進。我們將給5點建議，幫助膠上大分子量蛋白的轉印。01犧牲膠的韌性來提高效率低濃度的丙烯酰胺凝膠可能難以操作。一旦手指觸摸它就會撕裂？ 但是，與
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽） 一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳 Mini P-4小型垂直電泳槽
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽）一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳Mini P-4小型垂直電泳槽?
以毛細管轉移方式進行Northern－Blotting轉印實驗
要進行北方雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、真空轉移法 （vac
一文讀懂蛋白質轉印原理－大分子量蛋白轉印有哪些技巧
通過凝膠電泳分離蛋白后，蛋白質被轉移到固體膜載體上進行后續步驟。有效的轉印依賴于膜的選擇、所使用的轉印設備的類型以及轉印緩沖液的組成。 轉印條件 蛋白的有效轉印依賴于蛋白質從凝膠中遷移出來，也依賴于蛋白在膜上的滯留。像凝膠電泳一樣，轉印步驟將帶負電荷的蛋白轉印到帶正電荷的電極上。轉印效率受所