蛋白質的電轉實驗
很多膜可作為蛋白質電轉移的固相支持物，如重氮化纖維素膜（DPT，DBM）、DEAE-纖維素膜、尼龍膜等，但用的最多的還是硝酸纖維素膜（NC膜），該膜與蛋白質以非共價的疏水作用形式結合，結合能力約為80 μg/cm2。實驗方法基本方案 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒 轉移緩沖液 甲醇 電極緩沖液 儀器、耗材 電轉移槽 電泳儀 實驗步驟 1. 剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。2. 將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。3. 按下列過程安裝轉移裝置，將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中，在塑料支架上放一塊海綿。4. 將3塊3MM濾紙對齊放在海綿上，然后依次將NC膜、凝膠、及另3塊慮紙和海綿放上。5. 用塑料支架夾緊上述各層，放入電轉移槽內，NC膜一側向正極，凝膠一面向負極。6. 接通電源電壓120 mA，......閱讀全文
蛋白質的電轉實驗
很多膜可作為蛋白質電轉移的固相支持物，如重氮化纖維素膜（DPT，DBM）、DEAE-纖維素膜、尼龍膜等，但用的最多的還是硝酸纖維素膜（NC膜），該膜與蛋白質以非共價的疏水作用形式結合，結合能力約為80 μg/cm2。實驗方法基本方案 實驗材料 蛋白質? 試劑、試劑盒 轉移緩沖液 甲醇 電極緩沖液?
蛋白質的電轉實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液甲醇電極緩沖液儀器、耗材電轉移槽電泳儀實驗步驟1. ?剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。2. ?將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。3. ?按下列過程安裝轉移裝置，將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中，在塑料支架上放一塊海綿。4. ?將3塊
蛋白質的電轉實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
蛋白質的電轉實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 轉移緩沖液甲醇電極緩沖液儀器、耗材 電轉移槽電泳儀實驗步驟 1. ?剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。2. ?將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。3. ?按下列過程安裝轉移裝置，將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中，在塑料支架上放一塊海綿。4.
蛋白質的電轉
實驗概要很多膜可作為蛋白質電轉移的固相支持物，如重氮化纖維素膜（DPT，DBM)、DEAE-纖維素膜、尼龍膜等，但用的最多的還是硝酸纖維素膜(NC膜)，該膜與蛋白質以非共價的疏水作用形式結合，結合能力約為80μg/cm2。與其它膜相比，NC膜具有不要預先活化，對轉移物質生物活性影響不大，能應用多種染
Southern－印跡實驗——電轉印法
實驗方法原理因為聚丙烯酰胺凝膠的扎徑太小，DNA不能在其橫截面上有效地擴散，毛細管轉移法不適用DNA從聚丙烯酰胺凝膠的轉移。因此，聚丙烯酰胺凝晈必須在低離子強度的緩沖液中用電轉移法進行印跡。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBE儀器、耗材Scotch-Brite墊Whatman濾紙實驗步驟1. ?在非變性
CRISPR－實驗利器：BTX－電轉儀
什么是 CRISPR?CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）, 是細菌中用于與病毒進行斗爭的免疫武器。 生命進化歷史上，細菌為了將病毒的外來入侵基因清除，進化出 CRISPR 系統，利用這個系統，細菌可以不動
浸入式電轉印
實驗概要采用浸入法將蛋白質從凝膠轉移至硝酸纖維素膜是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維素膜，然后再將這種夾層組合浸入盛有大量緩沖液的轉印槽內，使電流從轉印槽的一側通向另一側。通過電洗脫的方法可將蛋白質從凝膠中轉印至濾膜上，如同在凝膠中遷移，只不過移動方向與膠平面垂直。若操作仔細，這是一種可將許多蛋白質轉印至
半干電轉印法
實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜，但使用100次后必須更換)制成的，也可以是鉑金的(這種子板價格較貴，但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至
半干電轉印法
先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上（Kyhse-Andersen1984）。平板可以是石墨（這種平板較便宜，但使用100次后必須更換）制成的，也可以是鉑金的（這種子板價格較貴，但使用壽命較長）。通過電洗
等電點聚焦分離蛋白質實驗
等電點聚焦 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩性
等電點聚焦分離蛋白質實驗
蛋白質可以在包被或非包被的毛細管柱分離，分離方案的選擇取決于靶蛋白的特異屬性。最重要的屬性就是pl，這由一般的凝膠電泳或CE決定。等電點聚焦分離是CE分離的一種。實驗方法原理等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩
等電點聚焦分離蛋白質實驗
實驗方法原理 等電點聚集（IEF） 分離可以通過 CE 輕易地達到，這也是選擇隨后用于蛋白質分離的緩沖液系統的有效的第一步。蛋白質和多肽是兩性的，因此它們的電荷由周圍的載體緩沖液決定。當蛋白質或多肽處于電場中，它移動到一個區域，這里周圍的 pH 等于其等電點（pI）。在包被的毛細管柱內可
轉印到膜上的蛋白質檢測實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 PBSTween印度墨汁儀器、耗材 搖床實驗步驟 1. ?將轉印膜置于塑料容器中，在旋轉搖床中于37℃用Tween 20溶液洗滌3次，每次30 min，然后再于室溫用Tween 20溶液洗2次，每次30 min。2. ?用印度墨汁溶液染膜3 h或過夜。?3. ?在Twe
蛋白質轉印法
蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose） 上，先經尿素洗去SDS，并使蛋白質回復原態抗原性，可使用抗體進行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。儀器用具：電泳轉印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：轉印
蛋白質轉印法檢定蛋白質
蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose）?上，先經?素洗去SDS，并使蛋白質回?原態抗原性，可使用抗體進?免疫染色?（Towbin?et?al,?1979）。儀器用具：電泳轉印槽?（Hoefer?Tra
轉印到膜上的蛋白質檢測實驗_金染色
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒金染料溶液儀器、耗材搖床實驗步驟1. ?如”印度墨汁染色“之第1步操作洗滌轉印膜。?2. ?在AuroDye膠體金染料溶液中染色3 h，或連續搖動過夜。3. ?用水沖冼膜，晾干。
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ 細胞系和細胞類型 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato，Tr
借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生...
借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生成非嵌合體突變體胚胎基因編輯解析：借助電轉方法將Cas9蛋白質/sgRNA導入小鼠原核受精卵生成非嵌合體突變體基因編輯技術指能夠讓人類對目標基因進行“編輯”，實現對特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技術自問世以來，就有著
轉印到膜上的蛋白質檢測實驗_印度墨汁染色
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒PBSTween印度墨汁儀器、耗材搖床實驗步驟1. ?將轉印膜置于塑料容器中，在旋轉搖床中于37℃用Tween 20溶液洗滌3次，每次30 min，然后再于室溫用Tween 20溶液洗2次，每次30 min。2. ?用印度墨汁溶液染膜3 h或過夜。?3. ?在Tween 2
蛋白質等電點的測定和沉淀實驗結果
1，在等電點附近，蛋白質溶液開始變渾濁，離心可見沉淀2，遠離等電點，蛋白質溶液開始變澄清，離心未見沉淀
蛋白質的雙向電泳實驗_等電聚焦法
蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根據蛋白質的等電點不同進行分離; 第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE ) , 按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后, 可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。本實驗目的是
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？（二）
植物細胞轉化 （系統：ECM630/830） 對植物原生質（玉米、煙草等）及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品質及產量增加的作物。Lin等人（1997）優化了多種植物上用于GUS表達
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？（二）
植物細胞轉化 ? ? ? ? （系統：ECM630/830） ? ? ?對植物原生質（玉米、煙草等）及完整植物的電穿孔可以用于產生對農業/園藝有用的轉基因作物。植物細胞轉化的一個主要目的是對植物細胞進行穩定轉化以產生具有優良品質及產量增加的作物。Lin等人（1997）優化了多種植物上用于GUS表
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？（一）
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ ? ? 細胞系和細胞類型 ? ? 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 ? ? 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, ?Rice, Tomato
免疫印跡與免疫檢測實驗——轉移槽轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟1. ?制備抗原樣品，并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白，在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后，拆卸凝膠夾層，去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 min。3
蛋白質的分離實驗——IEF（等電點聚焦電泳）法
實驗方法原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質（鹽析得到的IgG）中均含有硫酸銨等鹽類，這類將影響以后的純化，所以純化前均應除去，此過程稱為“脫鹽”（desalthing）。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法，這兩種方法各有利弊。前者的優點是透析后析品終體積較小，但所需時間較長，且鹽不易除盡；凝膠過濾法則能將鹽除盡，
德發明電轉氣法解決可再生能源儲電難問題
????新華網柏林４月２６日電（記者班瑋）眾所周知，我們可以利用天然氣等氣態化石燃料發電，但德國研究人員卻“倒行逆施”，發明了一種“電轉氣”的方法，目的是解決風能、太陽能等可再生能源發電在短時間過剩而產生的儲電難問題。 ????德國弗勞恩霍夫學會２６日發表公報說，目前全球風能和太陽能發電量日益增
蛋白質印跡實驗——從等電聚焦凝膠上轉移蛋白
試劑、試劑盒甘氨酸TrisSDS甲醇實驗步驟1. 溶液配置不連續緩沖系統陽極緩沖液Ⅰ：0.3 mol/L Tris，pH 10.4。陽極緩沖液Ⅱ：0.1 mol/L Tris，pH 10.4。陰極緩沖液：0.1 mol/L 精氨酸，0.01% ( W/V）SDS，pH 10.5。SDS 的存在有利于
核轉位篩選實驗（一）
優點·?可重復性表型檢測· 既高通量又不犧牲質量的圖像獲取· 應用交互式預覽，大大減少分析設置時間·?統一的統計方法使結果更準確??躁郁癥（BD）是一種高度遺傳性的心理疾病，它影響到全球大概1%的人口。1949 年鋰被第一次應用于躁郁癥，到目前為止鋰仍是治療BD 的主要藥物。然而在一半的病例中，鋰并