細胞組分的化學反應
細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。 一、Brachet反應一顯示細胞內的DNA和RNA (一)原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量分析。 (二)方法 l.接種Hela細胞于蓋片上并培養24~48小時,使長成單層。 ......閱讀全文
細胞組分的化學反應
細胞的組織化學方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內的生物化學成分進行定性、定位、定量研究。??? 一、Brachet反應一顯示細胞內的DNA和RNA??? (一)原理??? 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處
細胞組分的化學反應實驗
Brachet反應細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示細胞內過氧化物酶的顯示過碘酸雪夫反應(PAS)實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA
細胞組分的化學反應實驗
實驗方法原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量
細胞組分的化學反應實驗——Brachet反應
實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量分
細胞組分的化學反應實驗_過碘酸雪夫反應(PAS)
實驗方法原理組織、細胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法來顯示,其化學基礎是利用過碘酸的氧化作用,打開碳鏈形成醛,生成的醛基與Schiff試劑中的無色品紅反應形成紫紅色化合物。實驗材料小白鼠試劑、試劑盒PBS緩沖液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固綠硫酸銅聯苯胺混合液番紅過碘酸酒精液Schiff氏酒精液亞
細胞組分的化學反應_細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示
實驗方法原理由于不同的蛋白質分子所帶的堿性和酸性基團的數目不同,在pH值不同的溶液中,蛋白質分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下,整個蛋白質所帶負電荷多,則為酸性蛋白質;帶正電荷多,則為堿性蛋白質。據此,可將標本經三氯醋酸處理提出核酸后,用不同pH值的固綠染液分別染色,細胞內的酸性蛋白和堿性蛋白
細胞組分的化學反應實驗_細胞內過氧化物酶的顯示
實驗方法原理過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯苯胺處理標本,細胞內的過氧化物酶能把聯苯胺氧化為藍色的聯苯胺藍,進而變為棕色產物,因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。實驗材料小白鼠試劑、試劑盒PBS緩沖液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固綠硫酸銅聯苯胺混合液番紅過碘酸酒精液Schiff氏
細胞組分的分析方法
實驗概要本文介紹了細胞組分分析方法的原理及操作流程等。實驗原理核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連.形成
細胞組分的分析方法2
4.rDNA片段的制備 (1)對所得重組質粒DNA進行SacⅠ酶切,反應體系如下:SacⅠ 4μl(約20單位),質粒DNA 50μl(20μg),10×緩沖液(0.5mol/L Tris-HCl,pH7.5,50mmol/L MgCl2)10μl,滅菌重蒸水36μl。 (2)將反應后
細胞組分的分析方法1
一.基本原理核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連.形成腺嘌呤與胸腺嘧啶(A.T),鳥嘌呤與胞嘧啶(G.C
酶的細胞化學反應過程
酶的細胞化學反應包括兩個反應: 第一反應是酶作用于底物的反應, 稱酶反應,形成的產物稱為初級反應產物;第二反應是捕捉劑與初級反應產物的作用,稱捕捉反應,產生最終反應產物:┌────酶的細胞化學反應─────┐│ 酶+條件 初級 捕捉劑 │底物──→反應產物──→ 最終反應產物(酶反應) (捕
細胞[組分]分級分離的定義
中文名稱細胞[組分]分級分離英文名稱cell fractionation定 義應用不同的離心技術,將細胞勻漿中的各種細胞器或不同組成成分分離純化的過程。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
細胞組分和細胞器——細胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton?(Mitchison Lab)??Recycling Tubulin?(Mitchison Lab)??Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi
細胞組分和細胞器——細胞膜
Isoelectric Focussing of Membrane Protein by Slab Gel Method?(Hancock Lab)??Isolation of Outer Membrane Protein from P.Aeruginosa with Octyl-Poe?(Hanc
常見細胞裂解液及其組分
在許多細胞內蛋白表達、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實驗(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中,細胞裂解是關鍵一步。 圖片源自于網絡 基本介紹 ? 根據不同細胞類型、蛋白定位及下游應用,需要不同的細胞裂解液進行細
細胞組分和細胞器——細胞器分離
Labeling Microtubules?(Molecular Dynamics Inc.??)Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and o
DNA的細胞化學反應——Feulgen反應
實驗概要?1、了解Feulgen反應的基本原理。?2、熟悉傳統細胞化學實驗的基本實驗技能和操作方法。實驗原理?Feulgen反應是1924年由Feulgen和Rossenbeck開創的。這一反應的原理是:DNA經酸(1mol/LHCL)水解,其上的嘌呤堿和脫氧核糖之間的鍵打開,使脫氧核糖的一端形成游
細胞組分和細胞器——染色體
Chromosomal DNA Prep : cultured cells/tissue samples?(Mike A Dyer)This protocol was developed for cultured cells but should be appropriate for dissoci
細胞、細胞器及組分的分離與觀察1
葉綠體的分離與熒光觀察一、實驗目的了解葉綠體分離的一般原理和方法,并熟悉應用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現象。二、實驗原理葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器,能發生特有的能量轉換。利用低速離心機可以分離葉綠體,其分離在等滲溶液(0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液)中進行,目的是為了防
細胞、細胞器及組分的分離與觀察2
細胞器標記酶的測定是評價細胞器內膜組分和分離純度的主要依據,如線粒體內膜上分布有細胞色素氧化酶,該酶使詹納斯綠B染料保持在氧化狀態呈現藍綠色,從而使線粒體顯色,而胞質中的染料被還原成無色。詹納斯綠B是一種活體染料,能對動植物的細胞或組織在活體狀態下進行無毒害的染色。由于染料(堿性染料)的膠粒表面帶有
酶的細胞化學反應的反應過程
酶細胞化學反應實際上就是孵育反應的過程,孵育液的成分主要有酶的底物、捕捉劑,保證孵育液pH的緩沖液以及有關的添加劑等。孵育的溫度和時間可根據不同的酶和組織通過實驗而確定。電鏡酶細胞化學的樣品在孵育反應后需經鋨酸后固定、梯度乙醇脫水、環氧樹脂包埋和超薄切片,至電鏡下觀察。
什么是細胞[組分]分級分離?
中文名稱細胞[組分]分級分離英文名稱cell fractionation定 義應用不同的離心技術,將細胞勻漿中的各種細胞器或不同組成成分分離純化的過程。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
酶的細胞化學反應的樣品制備過程
酶細胞化學的一個重要問題是既要保存好細胞內酶的活性,又要保存好細胞的結構,因此選擇適當的固定劑種類、濃度、固定的方式和時間是細胞化學技術的一個關鍵問題。光鏡樣品固定多選用中性福爾馬林或多聚甲醛,4℃、24小時,常規的石蠟包埋切片可以滿足相當一部分酶的細胞化學要求;電鏡樣品固定通常用0.5~2%戊二醛
細胞組分的分析方法——線粒體的分離與觀察
一.實驗目的用差速離心法分離動、植物細胞線粒體。二.實驗原理 線粒體(mitochondria)是真核細胞特有的,司能量轉換的重要細胞器。細胞中的能源物質——脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化,并通過藕聯磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行
只需100個細胞的表觀基因組分析
近年來,表觀遺傳學已經成為了干細胞分化、炎癥、癌癥等多個領域的研究熱點,但它在臨床上的潛力還未得到充分挖掘。表觀基因組分析可以幫助醫生根據患者的自身狀態調整治療方案,最終實現個性化醫療。問題在于,表觀基因組分析需要的細胞量很大。舉例來說,檢測全基因組的蛋白-DNA互作和染色質修飾大約需要一千萬細
用分離的亞細胞組分進行激酶分析
實驗材料細胞器樣品試劑、試劑盒激酶分析緩沖液ATP儀器、耗材SDS-PAGE 凝膠實驗步驟1. 準備反應混合物:反應體積通常是 50~100 ml。5X 激酶分析緩沖液????????????????????????????? 10 μl[γ-32P] ATP(終濃度 5 μCi/5μmol/L)?
細胞組分的分析方法——定量細胞化學分析技術1
一.流式細胞光度術-單細胞懸液染色標本的多信息分析法1.概述 流式細胞光度計(flow cytometry)可定量地測定某一細胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量,以及細胞群體中上述成分含量不同的細胞的數量,特別是它還可將某一特異染色的細胞從數以萬計的細胞群體中分離出來,以及將DNA含量不同的
細胞組分的分析方法——定量細胞化學分析技術2
5.固定方法(1)福爾馬林法: 在單細胞懸液中加入等體積含8%甲醛的鹽水G,4℃下固定12至18小時。該法常用于Acriflavine-Feulgen染色。(2)乙醇法: 細胞被重新懸浮于5ml冷鹽水G中,慢慢加入-20℃95%的乙醇15ml,其最終濃度為70%,冰浴30分鐘。此法常用于EB及P
細胞組分的分析方法——核酸序列的原位雜交
一.基本原理 核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連.形成腺嘌呤與胸腺嘧啶(A.T),鳥嘌呤與胞嘧啶(G
單細胞代謝組分析有了新技術
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