酰化試劑（Bolton和Hunter試劑）法
1．原理 用酰化劑3--（4-羥苯基）丙酸—N琥珀酰胺酯（Bolton—Hunter試劑）做連接試劑，將125I標記在羥苯基的2，5位置上，再將琥珀酰胺酯水解，通過一個酰氨鍵將3--（4—羥基—5—125I—苯基）接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2．方法 125I—Bolton—Hunter試劑可用氯胺T法自行制備，出已有該試劑的苯溶液作為商品出售。使用時取一定量的標記酯（μmol 蛋白用3～5μmol標記酯），用氮氣吹除苯，投入欲標記蛋白5～10μg及緩沖液10～50μl,pH8.0～8.5為宜，在冰浴中反應15～30min后，加入多量氨基酸（如甘氨酸），使過量標記酯消耗掉以終止反應。 此法避免了蛋白質與氧化劑的接觸，又避免了與放射性碘原子的直接接觸，可防止碘源中有害物質對蛋白質的損傷，適用于標記缺乏酪氨酸的蛋白質或酪氨酸在活性中心，引入碘原子后會引起蛋白質的失活。其缺點是標記技術比較復雜，需要接觸較多的放射性，經......閱讀全文
酰化試劑（Bolton和Hunter試劑）法
1．原理 用酰化劑3--（4-羥苯基）丙酸—N琥珀酰胺酯（Bolton—Hunter試劑）做連接試劑，將125I標記在羥苯基的2，5位置上，再將琥珀酰胺酯水解，通過一個酰氨鍵將3--（4—羥基—5—125I—苯基）接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2．方法?125I—Bolton—Hunter試劑可用
DNA印跡法的實驗器材和試劑
器材 1、電熱真空干燥箱 2、硝酸纖維素濾膜或尼龍膜 3、大方瓷盤、帶蓋方盤、玻璃板 4、濾紙、吸水紙、保鮮膜、蠟膜Parafilm、一次性手套等 5、刀片、刻度吸管、鑷子、剪刀、lkg重物 二、材料 電泳分離DNA的瓊脂糖凝膠 試劑 1、酸變性液:0.25mol/L HCl， 用
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）
Western印跡法（試劑配制和操作步驟） 這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。 Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合
納氏試劑光度法儀器試劑選擇
試劑 配置試劑用水均應無氨水 1)納氏試劑：可選擇下列一種方法制備。 ①稱取60g碘化鉀溶于100ml水中，邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞(HgCl2)結晶粉末(約10g)，至出現朱紅色沉淀不容易溶解時，改為滴加飽和二氯化汞溶液，并充分攪拌，當出現微量朱紅色沉淀不易溶解時，停止滴加氯化汞溶液。
重鉻酸鉀法試劑順序以及試劑的質和量
加入試劑順序以及試劑的質和量加入試劑的順序必須嚴格按分析步驟進行，不能顛倒,否則會影響分析結果的準確度。如:加入試劑顛倒,K2Cr2O7先和HgSO4反應生成桔紅色鉻酸汞,鉻酸汞在加熱條件下分解,使分析結果偏高。其反應方程式為: 4HgCrO4=2Cr2O3+4Hg+5O2↑?K2Cr2O7量取必須
Folin—酚試劑法（Lowry法）
實驗概要本文介紹了Folin—酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難，近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的，只是加入了第二種試劑，即Fol
鉭試劑（BPHA）萃取分光光度法儀器和試劑的選擇
儀器①分光光度計:光程為10 mm的比色皿;②電磁攪拌器;③具玻塞錐形瓶:100 ml;④容量瓶:100 ml、1000 ml各數支。試劑除非另有說明,分析時均使用符合國家標準的分析純試劑,去離子水或同等純度水。①硫酸(H2SO4):ρ=1.84 g/ml;磷酸(H3PO4):ρ=1.69 g/ml
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）（上）
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。 Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、電動勻
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）（下）
（二）使用液單去污劑裂解液（50mmol/L Tris?HCl pH8.0，150mmol/L NaCl，1％SDS，1mmol/L PMSF）： 1mol/L Tris?HCl（pH8.0）2.5mlNaCl??????????????????????????????????? 0.438g10%
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）1
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。 Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、玻
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）2
（二）使用液單去污劑裂解液（50mmol/L Tris?HCl pH8.0，150mmol/L NaCl，1％TritonX－100，100?g/ml PMSF）：1mol/L Tris?HCl（pH8.0） 2.5mlNaCl 0.438gTritonX－100 0.5ml蒸餾水至 50ml混勻后
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）3
10X麗春紅染液麗春紅S 2g三氯乙酸 30g磺基水楊酸 30g蒸餾水至 100ml使用時將其稀釋10倍。TBS緩沖液（100mmol/ L Tris?HCl pH7.5,150mmol/L NaCl）1 mol/ LTris?HCl（pH7.5） 10mlNaCl 8.8g蒸餾水至 1000ml
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）4
操作步驟： （一） 蛋白樣品制備 （1） 單層貼壁細胞總蛋白的提取： 1、倒掉培養液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液（或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。 2、每瓶細胞加3ml 4℃預冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放輕輕搖動1m
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）5
（三） SDS－PAGE電泳（1） 清洗玻璃板：一只手扣緊玻璃板，另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。兩面都擦洗過后用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。（2） 灌膠與上樣1、玻璃板對齊后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠。（操作時要使兩玻璃對齊，以免漏膠。）2、按前面方法配10％分離膠，加入
Western印跡法（試劑配制和操作步驟）6
（五）免疫反應（1）將膜用TBS從下向上浸濕后，移至含有封閉液的平皿中，室溫下脫色搖床上搖動封閉1h。（2）將一抗用TBST稀釋至適當濃度（在1.5ml離心管中）；撕下適當大小的一塊兒保鮮膜鋪于實驗臺面上，四角用水浸濕以使保鮮膜保持平整；將抗體溶液加到保鮮膜上；從封閉液中取出膜，用濾紙吸去殘留液后，
硫酸銨純化法所需儀器和試劑
1.組織培養上清液、血清樣品或腹水等?2. 硫酸銨（ NH 4 ） SO 4?3. 飽和硫酸銨溶液（ SAS ）?4. 蒸餾水?5. PBS( 含 0.2g /L 疊氮鈉 )?6. 透析袋?7.?超速離心機?8. pH 計?9.?磁力攪拌器
什么是鱟試劑法
內毒素測定方法有：凝膠法動態濁度法終點濁度法動態顯色法終點顯色法凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時應加除熱原水（細菌內毒素檢查用水）復溶后使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應的終點
納氏試劑分光光度法配制試劑
配制試劑用水均應為無氨水3.1 無氨水可選用下列方法之一進行制備：蒸餾法：每升蒸餾水中加0.1mL硫酸，在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去50mL初餾液，按取其余餾出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存.離子交換法：使蒸餾水通過強酸型陽離子交換樹脂柱.3.2 1mol/L鹽酸溶液.3.3 1mol/L氫氧化納
實驗室試劑試劑的概念和分類
試劑(reagent),又稱生物化學試劑或試藥。主要是實現化學反應、分析化驗、研究試驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品。一般按用途分為通用試劑、高純試劑、分析試劑、儀器分析試劑、臨床診斷試劑、生化試劑、無機離子顯色劑試劑等。
斐林試劑和班氏試劑的對比
斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑，二者的使用方法及原理、成分也有區別，下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。（1）班氏試劑常用于尿糖的鑒定，其配方與斐林試劑不一樣，其配方為：①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸
斐林試劑和班氏試劑的區別
斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑，二者的使用方法及原理、成分也有區別，下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。 （1）班氏試劑常用于尿糖的鑒定，其配方與斐林試劑不一樣，其配方為： ①400mL水中加85g檸檬酸鈉和5
ELISA試劑盒保存條件和試劑準備
ELISA試劑盒存條件和試劑準備：1）有效期內的試劑如開封后未用完，請2-8°C 保存。2）過期的試劑請不要用，打開后的試劑2-8°C 保存。3）酶標包被板必須2-8°C 保存，如有未用完的酶標包被板，打開的鋁箔袋須密封并2-8°C 保存。4）試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
ELISA試劑盒競賽法檢查抗原和抗體
牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒競賽法檢查抗原當小分子抗原或半抗原因缺少可作夾心法的兩個以上的抗體位點，因而不能用雙抗體夾心法進行測定，能夠選用競賽法形式。辦法的基本原理可見圖2，經洗刷后分成兩組：一組加酶符號抗原和被測抗原的混合液，而另一組只加酶符號抗原，再經孵育洗刷后加底物顯色，這兩組底物
融變時限檢查法所需試劑和溶液
融變時限檢查用水或規定介質。
電極法測電導率所需儀器和試劑
儀器①容量瓶:1000ml。②燒杯:50ml。③電導儀。④恒溫水浴器。試劑標準氯化鉀溶液C(KCl)=0.01000mol/L:稱取0.7455g氯化鉀,溶解于重蒸蒸餾水中(重蒸蒸餾水必須煮沸以除去水中溶解的CO2,放冷后使用),移入1000ml容量瓶,用水稀釋至標線。
蛋白測定方法介紹Folin—酚試劑法所需試劑與器材
1.試劑（1）試劑甲：（A）10克Na2CO3，2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O）。溶解于500毫升蒸餾水中。（B）0.5克硫酸銅（CuSO4·5H2O）溶解于100毫升蒸餾水中，每次使用前，將50份（A）與1份（B）混合，即為試劑甲。（2）試劑乙：在2升磨口回流瓶中
免疫印跡法試劑準備
1、SDS-PAGE試劑：見電泳實驗。 2、勻漿緩沖液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml；10%SDS 6.0ml；β-巰基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。 3、轉膜緩沖液：甘氨酸2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容
DNA印跡法所需儀器試劑
儀器1電熱真空干燥箱?2硝酸纖維素濾膜或尼龍膜?3大方瓷盤、帶蓋方盤、玻璃板?4濾紙、吸水紙、保鮮膜、蠟膜Parafilm、一次性手套等?5刀片、刻度吸管、鑷子、剪刀、lkg重物?材料電泳分離DNA的瓊脂糖凝膠試劑1 酸變性液:0.25mol/L HCl, 用分析純的鹽酸12Mol/L稀釋?2堿變性
重鉻酸鉀法的試劑介紹
（1） 重鉻酸鉀標準溶液（1/6 =0.2500mol/L：）稱取預先在120℃烘干2h的基準或優級純重鉻酸鉀12.258g溶于水中，移入1000ml容量瓶，稀釋至標線，搖勻。 （2） 試亞鐵靈指示液：稱取1.485g鄰菲啰啉，0.695g硫酸亞鐵溶于水中，稀釋至100ml，貯于棕色瓶內。
斐林試劑和雙縮脲試劑的對比
斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液（斐林試劑中還有酒石酸鉀鈉）和CuSO4溶液組成，但二者有如下三點不同：（1）溶液濃度不同CuSO4溶液稱為斐林試劑乙，其濃度為0.05 g/mL；CuSO4溶液稱為雙縮脲試劑B，其濃度為0.01 g/mL。（2）使用原理不同斐林試劑是新配制的溶液，它在加熱條件下