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  • 解決PCR實驗室污染的方法

    (1)開窗通風:如在短時間內要消除實驗室污染,開窗通風促進實驗室內空氣流通,使停留在室內的核酸排放到室外。 (2)紫外燈照射:將實驗室內好生物安全柜內物品平鋪,打開離心機內蓋,然后將紫外等打開照射12-24小時,通風12小時以上。 (3)消毒液降解核酸:及時用1%-2%的次氯酸鈉擦拭操作臺面和儀器,用10%次氯酸鈉浸泡試驗器具,同時用10%次氯酸鈉涮洗拖布擦拭地面。 (4)高壓:試驗耗材、工作衣等進行121℃30分鐘高壓。 (5)使用商品化核酸去除劑噴灑室內降解核酸。 (6)陽性污染特別嚴重,可以采取高錳酸鉀—甲醛(2:1)過夜熏蒸實驗室。......閱讀全文

    解決PCR實驗室污染的方法

    (1)開窗通風:如在短時間內要消除實驗室污染,開窗通風促進實驗室內空氣流通,使停留在室內的核酸排放到室外。? ? (2)紫外燈照射:將實驗室內好生物安全柜內物品平鋪,打開離心機內蓋,然后將紫外等打開照射12-24小時,通風12小時以上。? ? (3)消毒液降解核酸:及時用1%-2%的次氯酸鈉擦拭操作

    實驗室如何檢測及解決PCR污染的方法

    生物實驗,大多數實驗檢測都是微觀的,基于細胞,分子,蛋白水平,而這些微觀樣本對外界環境的影響敏感,比如溫度、ph值、酶解、損傷等,在我們盡力呵護樣本的生存環境的同時,污染也是需要注意的頭等大事,要堅決避免環境中的“雜質”的亂入,包括樣本污染,試劑儀器交叉污染、產物氣溶膠污染等對實驗結果的影響。“易查

    實驗室如何檢測及解決PCR污染的方法

    生物實驗,大多數實驗檢測都是微觀的,基于細胞,分子,蛋白水平,而這些微觀樣本對外界環境的影響敏感,比如溫度、ph值、酶解、損傷等,在我們盡力呵護樣本的生存環境的同時,污染也是需要注意的頭等大事,要堅決避免環境中的“雜質”的亂入,包括樣本污染,試劑儀器交叉污染、產物氣溶膠污染等對實驗結果的影響。“易查

    如何檢測及解決PCR實驗室污染的方法

    ?【導讀】?面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質粒污染、PCR擴增產物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質點分散并懸浮在氣體介質中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦時,比如在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶

    PCR污染及解決對策

    ?聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法,在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中,擴增的DNA產量是呈指數上升的,經過n個循環的擴增,一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為1013拷貝/

    PCR實驗室的防污染方法

    按照實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序,所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008)。1、嚴格執行各區功能劃分:試劑儲存和準備區:貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。標本制備區:核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴

    PCR實驗室的污染應急處理方法

    1、若核酸樣本溢出:立即用布或紙巾覆蓋,由外圍向中心傾倒10%的次氯酸消毒劑,約30分鐘后,清除污染物品,再用次氯酸消毒劑擦拭,并用75%酒精噴灑,移動紫外車定點照射1小時。2、其他不明情況污染:1、暫停所有實驗操作;2、清理實驗室內所有物品,尋找污染來源;3、加大實驗室的通風;4、對實驗室內所有表

    『PCR實驗污染』的解決辦法!

    PCR污染是每個實驗室都多多少少會遇到的問題。原因在于,PCR是非常靈敏的一項檢測,100個拷貝之內的靶序列就足以產生陽性擴增,從而容易出現DNA污染導致的假陽性。那么,怎樣遠離PCR的污染呢??  圖 PCR污染之一瞥?  首先,要辨別PCR污染的來源。設立陰陽性對照,有利于檢測反應體系各成分的污

    PCR實驗室污染

    在眾多的生物實驗室中,分子生物學檢測方法如PCR因其檢測靈敏度高、準確度好、操作方便、快速等優勢已經被廣泛應用。不過正是由于它的高靈敏性,實驗室中極微量的污染源都有可能導致檢測結果的假陽性,所以對環境中污染源的防控也極為重要。一旦出現實驗室環境污染,比如樣本之間交叉污染、試劑污染、儀器污染、陽性對照

    PCR污染及防止污染的方法

    污染原因 (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。 (二)PCR試劑的污染:主

    PCR污染的監測方法

    1.陽性對照:在建立PCR反應實驗室及一般的檢驗單位都應設有PCR陽性對照,它是PCR反應是否成功、產物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好,經各種鑒定是該產物的標本,如以重組質粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下),但陽性對照尤其是重組

    PCR污染的防止方法

    (一)合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行,特別注意樣本處理及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液制備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線

    PCR實驗室污染的原因

    污染原因:1)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。2) PCR試劑的污染:主要是

    PCR實驗室的污染來源

    1、樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。2、實驗試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照

    怎么防止PCR實驗室污染

    PCR實驗室污染標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。PCR試劑的污染:主要是由于

    PCR實驗室如何避免污染?

    PCR實驗室污染? ? 標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。?? ? P

    PCR實驗室整體解決方案

    PCR實驗室簡介Pcr實驗室又叫基因擴增實驗室、DNA實驗室,基因檢測實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase?Chain?Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精

    PCR實驗室污染的原因有哪些

    污染原因:1)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。2) PCR試劑的污染:主要是

    PCR實驗室污染的原因有哪些

    污染原因:1)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。2) PCR試劑的污染:主要是

    PCR實驗室污染了怎么處理

    A. 實驗室進行通風處理,至少2 周的時間;通風可加速擴增產物的消散的速度B. 使用清水對實驗臺面、實驗室進行清洗;DNA不溶于酒精,使用清水多次擦拭后可消除附在實驗臺面等的核酸DNA;C. 使用紫外燈進行房間的照射;紫外線及產生的臭氧都有破壞DNA結構的作用D. 之前使用的滅菌鍋使用清水清洗多次,

    怎樣判斷定量-pcr-儀的樣本加熱塊是否被污染及解決方法

    怎樣判斷定量 pcr 儀的樣本加熱塊是否被污染?怎樣清除污染? 一個辦法是運行背景校正反應板,當一個或多個反應孔連續顯示出不正常的高信號,則表明該孔可能被熒光污染物。 另外一種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下,執行 ROI 的校正,當某個孔的信號明顯高出其他孔時,則表明該孔被污染。 清除樣本加

    PCR實驗室如何預防污染

    1、合理的實驗室分區2、實驗操作流程:(1)樣品制備區進行樣品處理,核酸提取;(2)配液區配置反應體系:酶混合液和PCR反應液混合,分裝至PCR反應管;(3)樣品制備區加樣:樣品核酸和陰陽性對照加至反應液中;(4)PCR擴增區上機擴增檢測。務必保持單向操作流程,避免各區實驗室污染。3、各個實驗區內試

    PCR儀反應液污染處理方法

      PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而,在PCR儀使用時對于環境要求很高,為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況,應該了解關于反應液受到污染時,反應液處理方法:  l ?紫外照射法:未加模板

    PCR儀反應液污染處理方法

      PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而,在PCR儀使用時對于環境要求很高,為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況,應該了解關于反應液受到污染時,反應液處理方法:  l ?紫外照射法:未加模板

    PCR條帶微弱原因及解決方法

    CDNA:0.5微升primer:1微升dNTP:2微升10*buffer:2微升TAG酶:0.25微升D.W.:14.25微升PCR反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和緩沖液(其中需要Mg2+)1、預變性(Initialdenaturation).模板DNA完全變

    PCR條帶微弱原因及解決方法

    CDNA:0.5微升primer:1微升dNTP:2微升10*buffer:2微升TAG酶:0.25微升D.W.:14.25微升PCR反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和緩沖液(其中需要Mg2+)1、預變性(Initialdenaturation).模板DNA完全變

    PCR污染的監測

    一個正規的實驗室,要時刻注意監測實驗室的污染情況。了解實驗室有無污染,污染原因,污染程度,以便采取有效措施,防止和消除污染。一般通過陰陽性對照檢測污染情況。1、陰性對照:? ? 不將模板DNA或RNA加入到PCR試劑中,進行PCR擴增,對試劑是否污染進行監測。陰性水樣參與核酸提取和擴增監測整個試驗

    解讀:PCR實驗室污染了怎么辦?

    面對眾多的污染源,比如樣本交叉污染、試劑儀器交叉污染、克隆質粒污染、PCR擴增產物污染、還有極容易忽視的氣溶膠污染,氣溶膠是由固體或液體小質點分散并懸浮在氣體介質中形成的膠體分散體系,在空氣與液體面摩擦時,比如在操作時比較劇烈地搖動反應管,開蓋時、吸樣時及污染進樣槍的反復吸樣都可形成氣溶膠而污染。你

    PCR常見問題解決方法

    ?1)出現假陽性的原因是什么?出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。①引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。②靶序列或擴增產物的交叉污染

    定量PCR常見問題及解決方法

    Q1.CT值出現過晚1.擴增效率低,反應條件不夠優化。設計更好的引物或探針;改用三步法進行反應;適當降低退火溫度;增加鎂離子濃度等。2.PCR各種反應成分的降解或加樣量的不足。3.PCR產物太長。一般采用80-150bp的產物長度。Q2.無CT值(信號)出現1.反應循環數不夠。一般都要在35個循環以

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