BCIPNBT堿性磷酸酶顯色試劑盒的簡介和使用方法
英文名稱: BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development 規格:50ml 類別分類: 免疫印跡 儲存條件: 4℃,避光,12個月 主要用途: 免疫印跡檢測中的發色底物顯跡,尤其適用于堿性磷酸酶系統。 注意事項: 用NBT氧化后,BCIP水解產生靛藍沉淀物。 簡介: BCIP NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development) 是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物,在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會被水解產生強反, 該產物會和NBT發生反應,形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。 ......閱讀全文
BCIP－NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒的簡介和使用方法
英文名稱: BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development? 規格:50ml? 類別分類: 免疫印跡? 儲存條件: 4℃,避光,12個月? 主要用途: 免疫印跡檢測中的發色底物顯跡,尤其適用于堿性磷酸酶系統。? 注意事項: 用NBT氧化后,
細胞堿性磷酸酶染色
實驗概要細胞堿性磷酸酶染色實驗原理胚胎干細胞中堿性磷酸酶的活性比較高， 5-溴-4-氯-3吲哚-磷酸鹽（BCIP）能被堿性磷酸酶水解，形成一個中間體，這個中間體能與氯化硝基四氮唑藍，也稱氮藍四唑（NBT）反應生成白色的中間二聚體和NBT-藍紫色結晶物。通過染色結果可以相對得知堿性磷酸酶的活性，進
堿性磷酸酶標記試劑的使用
實驗概要本實驗介紹了堿性磷酸酶標記試劑的使用方法。BCIP／NBT是堿性磷酸酶最常使用的呈色底物，堿性磷酸酶標記的試劑應該用真核生物的堿性磷酸酶，因為這種酶容易被EDTA滅活。細菌酶難以終止其活性，易引起顯色過度，導致較高背景。BCIP／NBT底物在酶結合位點形成強烈的黑紫色沉淀，此反應是一個穩定進
快速蛋白質斑點印跡試驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Tris緩沖鹽溶液(TBS) TBS+1%牛血清白蛋白 TBS+0.1%Tween-20(TBST) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮藍四唑(BCIP NBT)顯
快速蛋白質斑點印跡試驗
試劑、試劑盒 Tris緩沖鹽溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮藍四唑(BCIP NBT)顯色試劑鼠抗σ32單克隆抗體3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~堿性磷酸酶綴合物儀器、耗材 硝酸纖維素膜
快速蛋白質斑點印跡試驗
試劑、試劑盒Tris緩沖鹽溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮藍四唑(BCIP NBT)顯色試劑鼠抗σ32單克隆抗體3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~堿性磷酸酶綴合物儀器、耗材硝酸纖維素膜實驗步驟
關于四唑硝基藍的基本信息介紹
又稱為硝基藍四唑， 氯化硝基四氮唑藍· 英文名：Tetranitroblue tetrazolium chloride(NBT).別名 3,3'-(3,3'-Dimethoxy[1,1'-biphenyl]-4,4'-diyl)bis[2,5-bis(p-nitr
免疫堿性磷酸酶組織化學實驗——間接免疫堿性磷酸酶法
免疫堿性磷酸酶組織化學技術是以堿性磷酸酶（AKP 或 AP）取代 HRP 來顯示結果的免疫酶組織化學技術。最早出現的是間接免疫堿性磷酸酶法（IAP），1983 年 Mason 及 Moir 等建立了堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶（APAAP）復合物法。隨后，人們建立了更為敏感的生物素-親和素-堿性磷酸酶復合
ELISPOT
實驗材料 抗原試劑、試劑盒 PBSPRMI1640培養基氯化銨儀器、耗材 PVDF膜96孔板實驗步驟 1. PBS 溶解抗原為30 μg/ml，加100 μl/孔于PVDF 膜鋪底的96 孔滅菌板過夜；?2. 第二天吸去包被液后，加5％FCS 的PRMI 1640 培養基100 μl 封閉1 小時，
免疫堿性磷酸酶組織化學實驗
實驗方法原理 此方法的基本原理與 HRP-抗體間接法類似，所不同的是用 AKP 代替 HRP 標記第二抗體，將其制備成酶標記抗體。實驗材料 石蠟切片動物血清試劑、試劑盒 蛋白酶特異性一抗核固紅二甲苯乙醇樹膠PBSAKP 標記的二抗TBS（含左旋咪唑、MgCl2）儀器、耗材 滴管玻片濕盒實驗步驟 1.
RNA在脊椎動物胚胎和器官中整體標本原位雜交檢測實驗2
小鼠胚、雞胚或者器官中RNA雜交的酶學檢測實驗材料雜交溶液A中雜交過的小鼠胚或雞的胚胎或器官樣本試劑、試劑盒預雜交溶液A 70℃2×SSCpH 4.570℃ 0.1% (V V) CHAPS3- [ (3-膽胺丙基）二甲銨]-I-丙烷磺酸鹽） (3- [ (3- cholamidopropyl) d
ISPCR擴增的產物的雜交和檢測實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 探針 試劑、試劑盒 SSC SDS 顯影液 定影液
DAB顯色，堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶顯色原理是什么？
DAB顯色在辣根過氧化物酶的作用能形成一種灰褐色的終末產物，該產物難溶于醇和其他有機溶劑，DAB的氧化還能引起聚合作用，導致與四氧化鋨反應而增加其染色強度和電子密度。
Western－Blot實驗步驟
實驗步驟： 1.分別配制 5%濃縮膠和12%分離膠 12%分離膠10mL 5%積層膠6mL H2O 3.3mL H2O 4.20mL 30% Acrylamide 4mL 30% Acrylamide 1mL pH8.8 Tris HCl（1.5M） 2.5mL PH6.8Tris
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)_PVDF－Elispot法
實驗方法原理細胞受到刺激后局部產生細胞因子，此細胞因子被特異單克隆抗體捕獲。細胞分解后， 被捕獲的細胞因子與生物素標記的二抗結合，其后再與堿性磷酸酶標記的親和素結合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF孔板出現"紫色"的斑點表明細胞產生了細胞因子，通過ELISPOT酶聯斑點分析系統對斑點的分析后得出
ELISPOT
隨著酶聯免疫分析技術在醫學及生物學領域的廣泛應用，使體外檢測各種細胞因子及抗體研究有了新的突破。在研究免疫應答機制時以往常用用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測體液中游離的細胞因子（CK）或抗體，但由于游離的循環抗體或CK的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合，而不能確切的反映體內的抗體
ELISPOT實驗方法步驟詳解
ELISPOT1.????? PBS溶解抗原為30 μg/ml，加100 μl/孔于PVDF膜鋪底的96孔滅菌板過夜；2.????? 第二天吸去包被液后，加5％FCS的PRMI 1640培養基100 μl封閉1小時，37?oC；3.????? 準備脾細胞懸液（用氯化銨去除紅細胞，制備成單個脾淋巴細胞
AP標記山羊抗兔IgG使用說明
● 產品簡介本抗體為用純化的兔IgG免疫羊，然后用親和純化柱對獲得的抗血清進行純化而獲得的優質二抗，可用于Western、ELISA和IHC等實驗。AP，即Alkaline Phosphatase，中文名為堿性磷酸酯酶，可以在Western或ELISA等檢測時催化BCIP/NBT等顯色試劑顯
原位PCR和原位RTPCR操作規程
（一）、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 （二）、操作流程 1、原位PCR步驟 1）預處理： （1）切片常規脫蠟； （2）0.2mol/L HCl處理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10m
原位聚合酶鏈式反應和原位反轉錄聚合酶鏈式反應操作
（一）、儀器設備????英國Thermo Hybaid原位PCR儀。????（二）、操作流程??????1、原位PCR步驟?????1）預處理：?????（1）切片常規脫蠟；?????（2）0.2mol/L HCl處理10min；?????（3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min；????
原位PCR和原位RT
（一）、儀器設備?英國Thermo Hybaid原位PCR儀?。（二）、操作流程1、原位PCR?步驟1）預處理：（1）切片常規脫蠟；（2）0.2mol/L HCl處理10min；（3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min；（4）Nase消化組織37℃ 30min；（5）梯度酒精脫水，室溫干燥
原位聚合酶鏈式反應（in－situ－PCR）和原位反轉錄
一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程（一）原位PCR步驟1、預處理： （1）切片常規脫蠟； （2）0.2mol/L HCl處理10min； （3）5μg/ml蛋白酶K消化組織37℃10min； （4）Nase消化組織37℃ 30min； （5）梯度酒精脫水，
原位聚合酶鏈式反應原位反轉錄聚合酶鏈式反應操作規程
（一）、儀器設備????英國?Thermo Hybaid?原位?PCR?儀。????（二）、操作流程??????1?、原位?PCR?步驟??????1?）預處理：??????（?1?）切片常規脫蠟；??????（?2?）?0.2mol/L HCl?處理?10min?；??????（?3?）?5?μ?
Western－blotting－Protocol(試劑配方和實驗操作)
一、 試劑配方：1X TBS: Tris-base 12.11gNacl 8.775g用HCl 調pH7.4，用純水稀釋至1L5X Transfer buffer: Tris-base 15.1gGlycine 72.0gTo 1 L10X堿性磷酸酶緩沖液： 1 mol/L Tris-HCl pH
原位聚合酶鏈式反應（in－situ－PCR）和原位反轉錄聚合酶...
原位聚合酶鏈式反應（in situ PCR）和原位反轉錄聚合酶鏈式反應原位聚合酶鏈式反應（in situ PCR）和原位反轉錄聚合酶鏈式反應（in situ RT-PCR）操作規程 （一）、儀器設備 英國Thermo Hybaid原位PCR儀。 （二）、操作流程 1、原位PCR步驟
原位PCR和原位RTPCR操作規程
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。一、儀器設備英國Thermo Hybaid原位PCR儀。二、操作流程1、原位PCR步驟（1）預處理
Southern－雜交技術2
三：操作(一)轉膜1電泳2切膠 在紫外下，切取凝膠有條帶部分3脫嘌啉0.25NHCL浸泡凝膠10分鐘，蒸餾水洗膠（大于15kb的DNA片段轉移時做此步驟）4變性，變性液（0.5MNaOH、1.5MNaCL）浸泡凝膠2次，每次15分鐘，蒸餾水洗膠5中和,中和液（0.5Mtris-HCL,pH7.0、3
RD－Systems試劑－QA－常見問題解答（五）
問：我用了DuoSet ELISA開發系統，但幾乎就沒有顏色產生。那些步驟可能出了問題？答：很多方面都會影響到顏色的產生。比如：1)??? BSA的干擾。選擇不含脂肪酸的ELISA級別的BSA很重要，可以降低球蛋白對實驗的干擾。R&D Systems建議使用Serological Proteins的
非同位素標記探針的酶法檢測實驗——堿性磷酸酶檢測法
實驗材料探針試劑、試劑盒PBS鏈親和素HRPODAB雙氧水甘油二氨基聯苯胺堿性磷酸酶緩沖液儀器、耗材蓋玻片水浴鍋實驗步驟1. ?生物素酰化探針與切片雜交、洗滌、封閉，然后與鏈親和素溶液溫育（“辣根過氧化物酶法檢測”，步驟1~4）。?2. ?由0.1% Tween 20/PBS中取出玻片，吸去殘液，勿
ISPCR擴增的產物的雜交和檢測實驗
實驗材料?探針試劑、試劑盒?SSCSDS顯影液定影液蘇木精PBSAEC封阻液NaClTris·Cl二甲基甲酰胺BCIPNBT乙醇儀器、耗材?培養箱蓋玻片載玻片干燥劑加濕盒實驗步驟?1.? 配如下雜交混合液?（1）2 μl 200 pmol/l 探針（終濃度4 pmol/l）?（2）50 μl 去離子