共聚焦顯微鏡
一、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本原理和發展科學研究工作對更高圖像分辨率的追求產生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術在生物學研究領域的廣泛應用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統的熒光顯微鏡使用場光源,因標本鄰近結構(細胞或亞細胞結構)產生的衍射光和散射光的干擾,使標本中細微結構的成像不夠清晰。激光共聚焦顯微鏡的主要原理是利用激光掃描束通過光柵針孔形成點光源,在熒光標記標本的焦平面上逐點掃描,采集點的光信號通過探測針孔到達光電倍增管(PMT),再經過信號處理,在計算機監視屏上形成圖像。由于激光光源的光柵針孔和探測針孔對物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于光柵針孔和探測針孔,進行點掃描時,掃描點以外的點不會成像,經逐點掃描后才形成整個標本的光學切片(Optic section)。二、圖像激光掃描共聚焦顯微鏡的主要生物學應用1 、組織和細胞中熒光標記的分子和結構的檢測標本制備方法主要有免疫熒光組織和細胞化學法、熒......閱讀全文
共激光掃描共聚焦顯微鏡
共激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning confocal microscope,LSCM)是一種先進的分子生物學和細胞生物學研究儀器。它在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝激光掃描裝置,結合數據化圖像處理技術,采集組織和細胞內熒光標記圖像,在亞細胞水平觀察鈣等離子水平的變化,并結合電生理等技術
共聚焦顯微鏡中熒光團的共定位
在多標熒光樣品圖像中,因兩個或多個熒光團在顯微結構中距離很近,經常會有發射信號疊加,這種效應就稱為共定位。目前,高特異性合成熒光團和經典免疫熒光技術的應用、精密光切技術的應用、共聚焦和多光子顯微鏡提供的數字圖像處理技術等大大提高了生物樣品中共定位檢測的能力。
共聚焦顯微鏡的共焦顯微技術
共聚焦顯微鏡有較高的分辨率,而且能觀察到樣本隨時間的變化。因此,共聚焦顯微技術在生物學研究領域起著不可或缺的作用。以下為共焦顯微技術的幾個主要應用方面: (1)組織和細胞中熒光標記的分子和結構的檢測: 利用激光點掃描成像,形成所謂的“光學切片”,進而可以利用沿縱軸上移動標本進行多個光學切片的疊加
共聚焦的共焦顯微
共焦顯微技術是由美國科學家M.Minsky在1957年提出的,當時的主要目的是消除普通光學顯微鏡在探測樣品時產生的多種散射光。20世紀60年代通過提高掃描精度突破了普通寬場成像的分辨率限制,在20世紀80年代研制成商用共焦顯微鏡。共焦顯微鏡分為普通光照明激發和激光照明激發兩種類型,而以后者應用最為廣
共聚焦圖中對熒光團共定位
正如上面所討論的,在共聚焦圖中對熒光團共定位的定量測定,可通過散點圖和感興趣區域的信息獲得。從整個散點圖的信息,可獲得很多變量值。Pearson′s 系數就是用于分析整個散點圖的諸多變量中的一個,為描述兩幅圖之間重疊程度,在識別一幅圖像和另一幅圖像的匹配程度上, Pearson′s, R(r)系數是
共聚焦顯微鏡
在生命科學研發中所占的比重共聚焦顯微技術幾乎已經成為生物醫學中一個標準的研究工具。借助其他各種常規分析,通過成像方法回答了越來越多的科學問題。現在的共聚焦顯微鏡的功能非常多,好像是一個科研工作站,其應用也大多在生命科學研究領域。尼康95%的共聚焦顯微鏡系統都銷往生物科學領域。而奧林巴斯顯微鏡在北美的
共聚焦顯微鏡
一、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本原理和發展科學研究工作對更高圖像分辨率的追求產生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術在生物學研究領域的廣泛應用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統的熒光顯微鏡使用場光源,因標本鄰近結構(細胞或亞細胞結構)產生的衍射光和散射光的干擾,使標本中細微結構的成像
代表委員聚焦“共護一江碧水”
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/3/495091.shtm 中新社武漢3月2日電 題:長江保護力度步步升級 代表委員聚焦“共護一江碧水” 中新社記者 張芹 湖北地處長江之“腰”,是長江干流流經里程最長的省份。每年全國兩會上,在鄂全
聚焦激光掃描顯微鏡
聚焦激光掃描顯微鏡(confocallaser scanning microscopy,CLSM)是生物醫學實驗室中重要的儀器設備,可以檢測細胞甚至分子水平的改變,1995年美國學者在傳統共聚焦激光掃描顯微鏡基礎上加上在體掃描裝置,實現了皮膚上的在體共聚焦成像,這是一種在皮膚原位、無創、細胞水平的成
共聚焦顯微鏡簡介
共焦顯微鏡[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(Beam Splitter),將已經通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點上有一個帶有針孔(Pinhole)的擋板,小孔就位于焦點處,擋板后面是一個光電倍
共聚焦顯微鏡原理
? ? ?從一個點光源發射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上,如果物體恰在焦點上,那么反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡稱共焦。共焦顯微鏡[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(Beam
共聚焦顯微鏡介紹
一、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本原理和發展 科學研究工作對更高圖像分辨率的追求產生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術在生物學研究領域的廣泛應用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統的熒光顯微鏡使用場光源,因標本鄰近結構(細胞或亞細胞結構)產生的衍射光和散射光的干擾,使標本中細
激光掃描共聚焦顯微鏡的激光共聚焦顯微鏡結構
激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。系統經一次調焦,掃描限制在樣品的一個平面內。調焦深度不一樣時,就可
聚焦分析測試行業發展-共討儀器未來
2022北京科學儀器高峰論壇線上舉辦——2022年8月17日至18日,在北京市科學技術協會支持下,由北京理化分析測試技術學會主辦的“2022年北京科學儀器高峰論壇”在線上順利舉辦。分析測試百科網作為大會支持媒體為您帶來大會的報導。為慶祝第六個“全國科技工作者日”,弘揚科學家精神,普及科學知識,宣傳推
與單光子共焦顯微鏡相比,雙光子共焦顯微鏡有何優點
雙光子共焦顯微鏡具有許多突出的優點:雙光子共焦顯微鏡可以采用波長比較長的、在生物組織中穿透能力比較強的紅外激光作為激發光源,因此可以解決生物組織中深層物質的層析成像問題。由于雙光子熒光波長距離發光波長,因此雙光子共焦顯微鏡可以實現暗場成像。雙光子可以避免普通成像中的熒光漂白問題和生物細胞的光致毒
與單光子共焦顯微鏡相比,雙光子共焦顯微鏡有何優點
雙光子共焦顯微鏡具有許多突出的優點:雙光子共焦顯微鏡可以采用波長比較長的、在生物組織中穿透能力比較強的紅外激光作為激發光源,因此可以解決生物組織中深層物質的層析成像問題。由于雙光子熒光波長距離發光波長,因此雙光子共焦顯微鏡可以實現暗場成像。雙光子可以避免普通成像中的熒光漂白問題和生物細胞的光致毒
與單光子共焦顯微鏡相比,雙光子共焦顯微鏡有何優點
雙光子共焦顯微鏡具有許多突出的優點:雙光子共焦顯微鏡可以采用波長比較長的、在生物組織中穿透能力比較強的紅外激光作為激發光源,因此可以解決生物組織中深層物質的層析成像問題。由于雙光子熒光波長距離發光波長,因此雙光子共焦顯微鏡可以實現暗場成像。雙光子可以避免普通成像中的熒光漂白問題和生物細胞的光致毒
激光共聚焦顯微鏡與真實色共聚焦顯微鏡的區別
真實色共焦顯微鏡與激光掃描共焦顯微鏡,二者在成像原理上基本是一樣的,最大不同之處是照明光源不同。1、激光掃描共焦顯微鏡激光掃描共焦顯微鏡的照明光源是激光,即單色光。其實際成像過程是根據被觀察物體對該單色激光的反射光的強弱來成像的。由于是單色光照明,不能分辨顏色,對于在同一試樣的同一視場內,顏色不同,
激光掃描共焦顯微鏡技術
l 樣品要求:1.經熒光探劑標記(單標、雙標、三標)2.固定的或活的組織3.固定的或活的貼壁培養細胞(Confocal專用小培養皿,蓋玻片)4.懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封一. 組成倒置或直立熒光顯微鏡、掃描頭(照明針孔、探測針孔、熒光濾片系統、鏡掃描系統和光電倍增管)、掃描頭控制電路、計算機
共聚焦顯微鏡的簡介
從一個點光源發射的探測光通過 透鏡聚焦到被觀測 物體上,如果物體恰在焦點上,那么反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源,這就是所謂的 共聚焦,簡稱共焦。其意義是:通過移動透鏡系統可以對一個半透明的物體進行三維掃描。共聚焦顯微鏡能提供無比精確的三維成像,以及對亞細胞結構和動力學過程的精準測試。 激光掃
共聚焦顯微鏡的原理
傳統的 光學顯微鏡使用的是場光源, 標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的 衍射或 散射光的干擾;激光掃描共聚焦顯微鏡利用激光束經照明 針孔形成 點光源對標本內 焦平面的每一點掃描,標本上的被照射點,在探測針孔處 成像,由探測針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點或逐線接收,迅速在
共聚焦顯微鏡系統優點
共聚焦顯微鏡系統優點 可對固定或者活的細胞、組織切片進行連續斷層掃描,獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器、細胞膜等系統的三維圖像, 高水平分辨率 普通顯微鏡 0.61λ/NA;共聚焦顯微鏡 0.55λ/NA 實時多通道熒光(熒光平衡)、透射DIC觀測 數字化圖像,可以進行圖像處理和定量分析
共聚焦顯微鏡及配件
共聚焦顯微鏡及配件制造商提供的軟件可對熒光團共定位進行散點圖分析。圖 4 顯示了一系列分析圖,這個圖是印度麂鹿皮膚成纖維細胞,用 AlexaFluor568 染色(標記對象是黏著斑蛋白,紅色通道),同時用 Alexa Fluor488染色(標記對象是纖維狀肌動蛋白,綠色通道)。在散點圖中選擇一個感興
共聚焦顯微鏡技術原理
SURF技術的功能原理????????NanoFocus共聚焦顯微鏡包括LED光源、旋轉多針孔盤、帶有壓電驅動器的物鏡和CCD相機。LED源通過多針孔盤(MPD)和物鏡聚焦到樣品表面上,從而反射光。反射光通過MPD的針孔減小到聚焦的部分,這落在CCD相機上。來自傳統光學顯微鏡的圖像包含清晰和模糊的細
激光掃描共聚焦顯微鏡
激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning ConfocalMicroscopy,簡稱LSCM),在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發熒光,利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖象,捕捉到微弱的信號或追蹤高效的進程以及在亞細胞水平上觀察諸如
共聚焦顯微鏡操作順序
操作順序如下:1. 打開計算機2. 打開激光器(鑰匙開關)3. 打開汞燈電源開關4. 啟動電腦5. 開始軟件
共聚焦顯微鏡(1)簡介
共焦顯微鏡[ConfocalLaserScanningMicroscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(BeamSplitter),將已經通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點上有一個帶有針孔(Pinhole)的擋板,小孔就位于焦點處,擋板后面是一個光電倍增管(pho
共聚焦顯微鏡的介紹
共焦顯微鏡[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(Beam Splitter),將已經通過透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點上有一個帶有針孔(Pinhole)的擋板,小孔就位于焦點處,擋板后面是一個 光電倍增
共聚焦顯微鏡的組成
共聚焦顯微鏡主要由五部分組成:顯微光學系統、掃描裝置、光源、檢測器和應用軟件系統。整套儀器由計算機控制,各部件之間的操作切換都可在計算機操作平臺界面中方便靈活地進行。 (1)顯微光學系統: 顯微鏡是共焦檢測系統常用的組件,是系統成像質量的核心部分。顯微鏡光路一般采用無限遠光學系統結構,可以方便地
激光共聚焦掃描顯微鏡
對比激光共聚焦掃描顯微鏡與傳統光學顯微鏡在高放大倍率下的成像效果。結果顯示,激光共聚焦掃描顯微鏡在高放大倍率下,其成像景深大的優點對于獲取高質量的圖像有很大的幫助。同時通過激光共聚焦掃描顯微鏡的激光光源實現單色光成像,可以清晰觀察到濺鍍了消影層的ITO玻璃。