應用MD微孔板讀板機和雙報告系統檢測NFκB活性（二）
方法細胞接種和轉染HEK293細胞(80%融合度)用胰酶消化后分到96孔白板中，每孔15,000細胞。當細胞超過50% 融合度時，用NF- κB-RE 螢火蟲熒光素酶和海腎對照組質粒對細胞進行共轉染，其中使用三種不同比例FuGENE和DNA組合方式，轉然后，細胞置于37°C培養箱中培養24h。 TNF-α誘導將10 μg/mL TNF-α的溶液用細胞培養基稀釋到20ng/ml制成誘導溶液。無添加培養基作為對照。操作時將原培養基移除后加入100μL對照或誘導溶液，之后將板放回培養箱繼續孵育7小時。圖2 原始發光值數據。圖中所示為不同轉染條件下(轉染試劑：DNA比值)TNF-α未誘導和誘導的RFU值。每個轉染條件有9個重復。 圖3 均一化發光值結果。用海腎發光值對螢火蟲RLU做均一化。 細胞裂解液的制備移除細胞培養基后孔中細胞用PBS洗兩次。裂解緩沖液恢復至室溫后每孔加入20μL。室溫下溫柔震蕩15分鐘促進細胞裂解。在......閱讀全文
應用MD微孔板讀板機和雙報告系統檢測NFκB活性（二）
方法細胞接種和轉染HEK293細胞(80%融合度)用胰酶消化后分到96孔白板中，每孔15,000細胞。當細胞超過50% 融合度時，用NF- κB-RE 螢火蟲熒光素酶和海腎對照組質粒對細胞進行共轉染，其中使用三種不同比例FuGENE和DNA組合方式，轉然后，細胞置于37°C培養箱中培養24h。
應用MD微孔板讀板機和雙報告系統檢測NFκB活性（一）
前言報告基因對于基因表達的研究來說是非常有用的工具，它可以代替要研究的目的基因，從而幫助我們了解目的基因的信號通路和相關的疾病。熒光素酶是最常用的報告基因，使用光度計和化學發光功能的微孔板讀板機我們可以很容易的檢測到熒光素酶，另一方面，由于在細胞實驗中其背景較低，因此具有很高的靈敏度。我們通常用螢火
應用MD微孔板讀板機和雙報告系統檢測NFκB活性（三）
熒光素酶檢測設定試劑盒中的試劑使用前需在室溫下孵育。向裝有2 . 2 m g 凍干底物的小瓶中加入220μL水混勻后即為螢火蟲酶底物。向裝有440μg凍干底物的小瓶中加入220μL水混勻后即為水蛭素腸桿菌素。用螢火蟲檢測緩沖液按1:50比例稀釋螢火蟲酶底物后即為螢火蟲工作液。用海腎熒光素酶緩沖液
SpectraMax－M系列微孔板讀板機應用集錦（二）
軟件驗證對于在GLP或GMP實驗室工作的科研人員，SoftMax Pro軟件驗證方案提供了最為全面的記錄文檔和可用于驗證GxP管理員功能，軟件運行和分析能力的工具。- 驗證時間從6個月降低到3天支持平行線分析，4-P和5-P曲線擬合驗證- 全面復雜的針對常規實驗計算的檢測- 即時可用于OQ驗證檢測的
EMax－Plus－微孔板讀板機應用Molecular－Devices
?介紹隨著光吸收法可以滿足越來越多的應用檢測領域，終點法讀板機在實驗室中的占有率也越來越高。例如ELISAs方法進行細胞因子定量和Bradford法進行蛋白定量。本篇應用就是要著重比較使用Bradford法進行蛋白定量檢測時，Molecular Devices公司最新的產品EMax? Plu
SpectraMax－M系列微孔板讀板機應用集錦（四）
使用NanoOrange蛋白試劑盒傳統的比色方法，如280吸光，BCA，Bradford或Lowry法，當使用微孔板格式時靈敏度不佳。來自Life Technologies公司的NanoOrange? 蛋白定量試劑盒在多孔板格式的動態區間可達 10 ng/mL到10 μg/mL。此應用文章展
SpectraMax－M系列微孔板讀板機應用集錦（三）
應用原代細胞進行高通量復雜炎癥分析炎癥反應的一個重要步驟是細胞表面抗原與血管中免疫細胞的特異性結合。因此，對這些分子變化的及時監控，如VCAM, E-selectin，以及內皮細胞上的HLADR等等，我們用多通道熒光讀取人原代細胞表面的炎癥標記，并在此基礎上評估不同介質對炎癥反應的調節作用。
SpectraMax－M系列微孔板讀板機應用集錦（一）
引領微孔板檢測系統的行業標準歷經13年發展，SpectraMax? M系列多功能微孔板讀板機由于其優異的檢測表現、可靠的性能、深受廣大科研工作者的信賴，已然成為行業標準的引領者。可以根據應用需求輕松升級滿足您的檢測。儀器設置和數據處理都可借助于專業的SoftMax? Pro軟件完成，所有
利用多功能微孔板讀板機和MycoAlert支原體檢測試...（二）
結果我們利用Lonzede公司的MycoAlert試劑盒針對所有發光型微孔板讀板機進行靈敏度評價，針對于MycoAlert試劑盒質控樣品在1:8稀釋倍數關系時獲得Ratio＞1.2，而針對于MycoAlertPLUS試劑盒質控樣品在1:1000稀釋倍數關系時可獲得Ratio＞1.2。所有的Molec
用SpectraMax多功能微孔板讀板機進行cAMP－HiRange檢測（二）
Z’ 因子由陰性(無cAMP，無cAMP-d2)和陽性質控(無cAMP)計算得到2。利用SoftMax? Pro軟件生成和分析數據，包含一些預設的HTRF實驗模板以簡化檢測和分析。結果使用SoftMax Pro軟件的4-參數曲線擬合如上所述進行數據分析和做圖。依據表2的讀板機參數設置獲得最佳結果
使用SpectraMax微孔板讀板機檢測QuantiT－PicoGreen－dsDNA實驗－二
- 高濃度范圍標曲可以濃度從1 ng/mL制備到1 μg/mL，低濃度范圍標曲可以從25 pg/mL制備到25 ng/mL。對于高濃度范圍標曲，按Table 2中稀釋方案稀釋；對于低濃度范圍標曲，40倍稀釋2μg/mL溶液制備50 ng/mL溶液，參考Table 3中的稀釋方案。 注意：此篇
利用MD微孔板讀板機對細胞內氧化自由基吸收能力(ORAC)...
引言活性氧簇 (Reactive oxygen species， ROS) 是由細胞內正常代謝反應，環境壓力 以及紫外輻射產生的一類物質，包括過氧 自由基、羥基自由基、超氧離子和單線態 氧。氧化自由基吸收能力 (oxygen radical absorbance capacity，ORAC)
利用MD微孔板讀板機對細胞內氧化自由基吸收能力ORAC
活性氧簇 (Reactive oxygen species， ROS) 是由細胞內正常代謝反應，環境壓力 以及紫外輻射產生的一類物質，包括過氧 自由基、羥基自由基、超氧離子和單線態 氧。氧化自由基吸收能力 (oxygen radical absorbance capacity，ORAC) 分析是
利用多功能微孔板讀板機和MycoAlert支原體檢測試...（一）
利用多功能微孔板讀板機和MycoAlert支原體檢測試劑盒進行相應污染物評價這篇應用文章介紹了如何利用Molecular Devices公司的具有化學發光的微孔板讀板機進行相應檢測，儀器和試劑盒組合簡單易操作，進行相應檢測時表現出很高的靈敏度。兩種類型的檢測試劑盒均可在Molecular D
利用SpectraMax－i3x多功能微孔板讀板機檢測功能對...（二）
ATP標準曲線既可以驗證試驗條件也可以用來計算細胞內ATP的含量。因此ATP標準品濃度范圍從1nM至10uM產生的化學發光信號范圍可覆蓋整個不同細胞數目孔中產生的信號值(圖二)，檢測的線性范圍大于四個數量級。??經十字孢堿(staurosporine)和茴香霉素 (anisomycin)等化合物
如何使用M5－多功能微孔板讀板機和IMAP?－熒光偏振...（二）
結合反應步驟1.將75%的結合緩沖液A與25%的結合緩沖液B混合，制備結合緩沖液；步驟2.將結合試劑以1:600倍稀釋成結合緩沖液，得到結合反應液；步驟3.移出60ul結合反應液到每個檢測孔和校正標準孔中(包括背景孔樣本)步驟4.室溫避光孵育1小時 在SoftMax Pro軟件上設置模板，并在Spe
用SpectraMax多功能微孔板讀板機進行cAMP－HiRange檢測（一）
簡介在這篇應用文獻中，我們展示了如何用SpectraMax?i3、SpectraMax?Paradigm?和SpectraMax?M5e多功能微孔板讀板機進行可靠的、高通量的HTRF?檢測，并具有完美的Z’因子和高重復性的EC50值。HTRF?是CisbioBioassays公司開發的一項檢測生物分
使用SpectraMax微孔板讀板機檢測QuantiT－PicoGreen－dsDNA實驗－－一
簡介雙鏈DNA通常使用微孔板讀板機通過測量DNA溶液的260nm吸收光進行定量。然而，這種方法通常在微孔板讀板機上只能檢測到最低250ng/mL的濃度。對于生物學應用涉及到小體積樣品，如新一代測序和擴增產物定量時，更靈敏的方法才能滿足需求。Life Technologies公司的Quant-iT
利用－SpectraMax－iD3－微孔板讀板機檢測內源色氨酸熒光
介紹蛋白質的內源熒光主要來源于芳香族氨基酸如色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。在水中，色氨酸的最大激發光波長在270-280nm左右而其發射光波長峰值接近350nm。蛋白的發射光譜對溶劑的極性和外界環境十分敏感。當蛋白質變性時，色氨酸殘基會暴露在水中而其發射波長會變長。這種發射波長峰值的改變可以用來檢測蛋白
利用SpectraMax－i3x多功能微孔板讀板機檢測功能對...（一）
利用SpectraMax i3x多功能微孔板讀板機檢測功能對于細胞活力和細胞毒性的評價優勢1.儀器具有超高靈敏度化學發光檢測功能，最低至10個細胞/每孔2.微孔板讀板高度自動優化設置，可提高檢測信號強度 軟件預置3.軟件預置模板可以更快分析出檢測結果?簡介SpectraMax i3x是Molecul
如何使用M5－多功能微孔板讀板機和IMAP?－熒光偏振...（三）
結果SoftMax Pro軟件中預置的IMAP 熒光偏振模板會自動計算出水平偏振均值和垂直偏振均值(mP值)，總的熒光強度，標準方差和CV值。每一組試驗樣品的組群一欄中，模板會自動扣除背景樣品的熒光偏振值，然后計算出最小偏振mP值。也可根據相應的校正曲線計算出樣品磷酸化比率。(See IMA
如何使用M5－多功能微孔板讀板機和IMAP?－熒光偏振...（一）
如何使用M5 多功能微孔板讀板機和IMAP? 熒光偏振檢測平臺進行激酶活性的分析？介紹 蛋白激酶在調節許多細胞反應過程時起著核心的作用。近年來已經成為癌癥和其它許多疾病藥物重要的作用靶點。IMA P是Molecular Devices 公司推出一種快速、非放射性的激酶檢測技術，由于技術本身特點其
微孔板讀板機和SimpleStep－ELISA試劑盒定量白細胞介素8
前言THP-1 是人外周血的單核細胞系，最初來源于急性單核細胞性白血病患者，常被用來體外研究巨噬細胞功能。 它通常屬于懸浮細胞，當用 PMA 處理后可分化為貼壁生長的巨噬細胞。THP-1 能釋放許多細胞因子，其中包括白細胞介素 -8(IL-8)，一種能被許多類型細胞分泌的、在調節急性炎癥反應
如何利用微孔讀板機進行微量DNA和蛋白的高通量檢測？
介紹在遺傳學和分子生物學中，對核酸和蛋白進行定量是許多復雜實驗必要的上游檢測。雖然已有多種檢測方法，但是最常用的仍然是紫外分光光度法。紫外分光光度法的原理是利用分子在固定波長范圍吸收光和散射光，在朗伯比爾定律(方程式1)的基礎上計算待測物質的濃度。這種方法還需要提前知道樣品的摩爾消光系數和通路長度。
BMG微孔板測讀器的10大應用
德國BMG LABTECH創建于1989年，是微孔板測讀儀器領域中一家主導性開發商和制造商，提供許多測量方法以及集成的液體操作設備。BMG LABTECH在微孔板測讀技術領域擁有多項首創記錄：第一個包括FP在內的多功能微孔板測讀器，第一個用于384孔板的激光測濁儀，第一個帶有高性能化學發光能
如何充分發掘化學發光微孔板讀板機特點及優勢呢？
眾所周知，目前人類許多疾病的發生過程都或多或少與細胞因子變化有關系，如腫瘤、糖尿病、神經退行性疾病等等。細胞因子（Cytokine,CK）其實就是一類能在細胞間傳遞信息，可分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子和趨化性細胞因子等六類。 正常情況下，細胞因子的表達和分泌受機體
細胞成像微孔板檢測系統
細胞成像微孔板檢測系統是一種用于生物學、農學、畜牧、獸醫科學、基礎醫學領域的分析儀器，于2016年10月27日啟用。 技術指標 孵育溫度范圍：室溫以上5℃-65℃；CO2和O2控制范圍：0-20%(CO2)；1-19%(O2)控制分辨率：+0.1%(CO2和O2)穩定性:+0.2%at5%C
應用SpectraMax微孔板檢測系統和CyQUANT試劑盒檢測細胞增殖3
RNA酶處理、基于DNA含量做標準曲線的CyQUANT實驗法細胞增殖同樣可以用DNA含量來評價并作出標準曲線。根據細胞曲線可計算出DNA含量，細胞裂解液經過RNA酶處理就排除了RNA對結果的干擾。在本應用說明中，列出了用DNA含量做標準曲線來定量細胞樣品的設置步驟。準備試劑步驟1：制備1X細胞裂解液
應用SpectraMax微孔板檢測系統和CyQUANT試劑盒檢測細胞增殖2
設置儀器和軟件參數步驟1：打開微孔板讀板儀開關，打開SoftMaxPro軟件并點擊ProtocolLibrary中CellGrowth&Viability文件夾中的CyQUANTFluorescenceprotocol。步驟2：按表中所示參數設置儀器，此設置已在預配置的列表中。步驟3：使用Templ
應用SpectraMax微孔板檢測系統和CyQUANT試劑盒檢測細胞增殖1
簡介用熒光方法定量細胞增殖可以簡單快速的檢測藥物或其他實驗處理方法對細胞生長的影響。Life Technologies公司的CyQUANT細胞增殖試劑盒是一個敏感性高、可重復并且簡便的做熒光微孔板檢測的方法。CyQUANT的GR染料可標記到細胞核上，通過熒光來計算細胞個數。DNA與RNA的比例會