蛋白質常見的四種測定方法
蛋白質含量測定的幾種方法 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測定。該法操作簡單、快捷,并且測定的樣品可以回收,低濃度鹽類不干擾測定結果,故在蛋白質和酶的生化制備中廣泛被采用。但此方法存在以下缺點: 1.當待測的蛋白質中酪氨酸和色氨酸殘基含量差別較大會產生一定的誤差,故該法適用于測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的樣品。 2.若樣品中含有其他在280nm吸收的物質如核酸等化合物,就會出現較大的干擾。但核酸的吸收高峰在260nm,因此分別測定280nm和260nm兩處的光吸收值,通過計算可以適當的消除核酸對于測定蛋白質濃度的干擾作用。但因為不同的蛋白質和核酸的紫外吸收是不同的,雖經校正,測定結果還存在著一定的誤差。 2Bradford法 1976年Bradford建立了用考馬斯亮藍G-250......閱讀全文
常用的蛋白質含量測定方法有哪些
①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。 ②雙縮脲法 原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形
食品中蛋白質含量測定有多少方法
pro的測定方法分為兩大類:一類是利用pro的共性,即含氮量,肽鏈和折射率測定pro含量,另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸、堿性基團和芳香基團測定pro含量。但是食品種類很多,食品中pro含量又不同,特別是其他成分,如碳水化合物,脂肪和維生素的干擾成分很多,因此pro的測定通常利用經典的剴氏定
常用的測定蛋白質含量方法的比較
? ?蛋白質定量是生物化學、食品檢驗和其它生命學科zui常涉及的分析內容,是臨床診斷的重要指標,也是許多生物制品、藥物、食品質量檢測的重要指標。生化實驗中,在對生化藥品,特別是蛋白質、酶、某些多肽或蛋白質激素的分離純化時,對蛋白質進行準確可靠的定量分析是非常重要的。??????? 紫外分光光度法是根
蜂產品中蛋白質測定方法的改進
蜂產品中蛋白質的測定主要采用凱氏定氮法,其測定結果穩定可靠,被廣泛采用。但其操作較繁雜,消化時間長,需 蒸餾滴定,費時費力。本法通過改進消化條件,即采用過氧化氫2濃硫酸混合液為消化液,消化過程中滴加硝酸2高氯酸混合酸,縮短了消化時間。樣品中的蛋白質 與硫酸和催化劑一同加熱分解,生成的氨與硫酸反應生成
用-Bradford方法測定蛋白質含量實驗
實驗方法原理 溶解蛋白質,與染料混勻,l0min 后閱讀 O.D.。實驗步驟 材料十二烷基硫酸鈉(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考馬斯亮藍 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷
用-Bradford方法測定蛋白質含量實驗
實驗方法原理溶解蛋白質,與染料混勻,l0min 后閱讀 O.D.。實驗步驟材料十二烷基硫酸鈉(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考馬斯亮藍 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸:將 10
臨床化學檢查方法介紹蛋白質濃度測定
蛋白質濃度測定介紹: 蛋白質濃度測定是利用化學或物理方法測定蛋白質的濃度,是往往用于計算純化方法的回收率的重要方法。蛋白質濃度測定正常值: 人體正常值一般是 60 - 80 g/L。蛋白質濃度測定臨床意義: 異常結果: (1) 雙縮脲法:雙縮脲法是第一個用比色法測定蛋白質濃度的方法,硫銨不干
常用的蛋白質含量測定方法有哪些
①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。 ②雙縮脲法 原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形
測定蛋白質分子量的常用方法
知道蛋白質分子量、氨基酸組成計算器http://www.proteomics.com.cn/tools/mwcal/一般的方法:SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量[原理]十二烷基硫酸鈉(Sodium dodecyl sulfate, 簡稱SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的分子量,
常用的蛋白質含量測定方法有哪些
①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。 ②雙縮脲法 原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形
國家標準檢測蛋白質含量測定方法
蛋白質含量測定方法就是檢測N元素的含量,像三聚氰胺的問題,就是通過增加N的含量使“蛋白質”含量提高的。國家標準檢測蛋白質含量的方法叫做凱氏定氮法,食物中的蛋白質在催化加熱條件下分解,導致氨和硫酸結合產生硫酸銨。 堿蒸餾采用無硫,硼酸吸收,用硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定,根據酸耗計算氮含量,再乘以轉化系
蛋白質常見的四種測定方法
蛋白質是由氨基酸以“脫水縮合”的方式組成的多肽鏈經過盤曲折疊形成的具有一定空間結構的物質。蛋白質中一定含有碳、氫、氧、氮元素,常見的蛋白質檢測方法很多。蛋白質含量測定是指通過物理或化學方法對蛋白質含量進行測定,主要有以下4種。 1.凱氏定氮法 準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,像1、2號燒瓶中
常用的蛋白質含量測定方法有哪些
①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。 ②雙縮脲法 原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+形
蛋白質常見的四種測定方法
蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。奶牛的蛋白質需要主要用于維持、生長、妊娠和泌乳等需要。為了科學的為奶牛提供日糧,日糧中各種飼料蛋白質含量的檢測成為一項日常性且必需性的工作。 蛋白質含量測定的幾種方法 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對2
用-Bradford方法測定蛋白質含量實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 溶解蛋白質,與染料混勻,l0min 后閱讀 O.D.。 實驗步驟 材料 十二烷基硫酸鈉(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L
蛋白質常見的四種測定方法
蛋白質含量測定的幾種方法 1紫外分光光度法 蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測定。該法操作簡單、快捷,并且測定的樣品可以回收,低濃度鹽類不干擾測定結果,故在蛋白質和酶的生化制備
蛋白質常見的四種測定方法
1、凱氏定氮法 準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅混合物,再加入濃硫酸,將4個燒瓶放到消化架上進行消化。 消化完畢后進行蒸餾,全部蒸餾完畢后用標準鹽酸滴定各燒瓶中收集的氨量,直至指示劑混合液由綠色變回淡紫
測定蛋白質含量的6種方法
一、微量凱氏(kjeldahl)定氮法樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。若以甘氨酸為例,其反應式如下:NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S
蛋白質測定儀用于羊奶蛋白質測定
????? 研究表明,羊奶是最接近母乳的奶,分子結構與母乳最相似,含有大量的乳清蛋白,嬰兒對羊奶的消化率可達94%以上。因此在現代的很多奶制品生產企業,羊奶的生產頻率很高,而在這些企業的品控中心,一般都配備有蛋白質測定儀這樣的檢測儀器,用于測定羊奶中的蛋白質含量,從而保障產品的質量。?????
常用來測定蛋白質含量的方法有哪些
①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強堿性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最后用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。 ②雙縮脲法 原理:尿素在180℃下脫氨生成雙縮脲,在堿性溶液中雙縮脲可與Cu2+
腦脊液蛋白質定量測定主要有哪些方法?
腦脊液蛋白質定量測定主要有哪些方法?:正常時腦脊液的蛋白質含量較其他體液均低,因此測定時需選用敏感的方法。測定腦脊液蛋白質的方法很多,主要圍繞提高敏感度及白蛋白和球蛋白含量在形成濁度與醫師招聘成色上一致。常用的方法有:考馬斯亮藍法、磺基水楊酸-硫酸鈉濁度法、鄰苯三酚紅鉬絡合法。染料結合法如考馬斯亮藍
蛋白質一級結構的測定方法(二)
?? 2)末端分析 其方法較多,這里我們只介紹較常用的幾種。 (1)N-末端測定 A.二硝基氟苯法(FDNB,DNFB):1945年Sanger提出此方法,是他的重要貢獻之一。 DNP-氨基酸用有機溶劑抽提后,通過層析位置可鑒定它是何種氨基酸。Sanger用此方法測定了胰島素的N末端分別為甘
蛋白質一級結構的測定方法(三)
?? 2)酶解法 酶水解法較化學法具有更多的優越性,使用也更廣泛。因其具有較高專一性,而且水解產率較高,所以可以選擇各種不同專一性的酶進行專一性的斷裂。 常用的酶有胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶和嗜熱菌蛋白酶。 胰蛋白酶專一斷裂Lys,Arg的羧基側肽鍵,如果對Lys,Arg,CysH進行化學修
常用來測定蛋白質含量的方法有哪些
1、凱氏定氮法凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是
蛋白質一級結構的測定方法(一)
?? 研究蛋白質的一級結構從確定組成蛋白質的單元結構棗氨基酸算起,已有150年的悠久歷史,直到1955年,Sanger首次闡明胰島素的氨基酸排列順序,為研究蛋白質的一級結構開辟了道路。這在分子生物學的發展進程中是一個重要突破。目前關于核酸的一級結構研究,由于Sanger等發明了加減法,可以得到了突
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蛋白質是由氨基酸以“脫水縮合”的方式組成的多肽鏈經過盤曲折疊形成的具有一定空間結構的物質。蛋白質中一定含有碳、氫、氧、氮元素,常見的蛋白質檢測方法很多。 1、凱氏定氮法 準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅
關于蛋白質等電點的測定方法介紹
一、蛋白質等電點的測定方法方法:平板等電聚焦 二、蛋白質等電點的測定原理:蛋白質分子在含有載體兩性電介質形成的連續而穩定的線性pH梯度中進行電泳。按照等電點不同被分離,形成一個很窄的區帶 三、蛋白質等電點的測定儀器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell 四、蛋白質等
常用來測定蛋白質含量的方法有哪些
1、凱氏定氮法凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是
測定蛋白質相對分子質量最準確方法
1。根據化學組成測定最低分子量用化學分析方法測出蛋白質中某一微量元素的含量,并假設分子中只有一個這種元素的原子,就可以計算出蛋白質的最低分子量。2. 滲透壓法當蛋白質濃度不大時,可用以下公式: M=RT/lim(∏/C) 其中R是氣體常數(0.082),T是絕對溫度,∏是滲透壓(以大氣壓計),濃度單