綠色熒光蛋白(GFP)在科學研究上的應用
綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein,簡稱GFP)bs-2194P是一種能在藍色波長光線激發下發出熒光的特殊蛋白質,正是這種神奇的性質,讓它成為當今生物化學領域最有力的工具之一,被稱為“生物北斗”。GFP在科學研究上有著驚人的用途,因為它能夠使我們直接看到細胞內部的運動、分布情況。在任何指定的時間我們都可以輕易地找出GFP的定位和存在:你只需要用紫外光去照射,這時所有的GFP都將發出鮮艷的綠色光芒。顯微鏡下的微觀世界與我們看到的宏觀世界極為不同,而GFP的作用是在微觀與宏觀間架起一座橋梁,讓科學家通過觀察發光效應推測出物質在分子水平上的活動。讓生物化學家們在研究細胞、蛋白、基因的水平上,從顯微鏡下獲得滿意的結果。 綠色螢光蛋白在細胞生物學與分子生物學領域中,通常被用作為一個報導基因(reporter gene)。一些經修飾過的型式可作為生物探針,由于GFP熒光有著生物細胞的自主功能,其熒光的產生不......閱讀全文
GFP抗體|GFP抗體檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗體
檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗體GFP是綠色螢光蛋白(Green Fluorescent Protein)的簡稱,由238個氨基酸殘基組成。GFP蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質,在藍色波長范
GFP單抗的概述
GFP單抗,又叫GFP單克隆抗體,或維多利亞水母綠色熒光蛋白單抗,是蛋白質研究過程中非常重要的工具,尤其是在鑒定重組的帶有GFP標簽的蛋白質是否表達或者表達的相對豐度時有著極重要的作用。
iRNA干擾GFP表達實驗
實驗概要本文介紹了iRNA干擾GFP表達實驗的原理及方法步驟。實驗原理RNA沉默是發生在植物(轉錄后基因沉默或共抑制)、動物(RNA干擾,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物細胞中的的特異性和高效率的mRNA降解機制。在哺乳動物細胞中,RNAi通常用于阻斷特定基因的表達從而研究基因的功能。將靶向特
iRNA干擾GFP表達實驗
【原理】RNA沉默是發生在植物(轉錄后基因沉默或共抑制)、動物(RNA干擾,RNAi)和真菌(消除作用)等真核生物細胞中的的特異性和高效率的mRNA降解機制。在哺乳動物細胞中,RNAi通常用于阻斷特定基因的表達從而研究基因的功能。將靶向特定基因的大約21堿基長短的雙鏈siRNAs(smallinte
綠色熒光蛋白GFP性質
GFP熒光極其穩定,在激發光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比熒光素(fluorescein)強,特別在450~490nm藍光波長下更穩定。 GFP需要在氧化狀態下產生熒光,強還原劑能使GFP轉變為非熒光形式,但一旦重新暴露在空氣或氧氣中,GFP熒光便立即得到恢復。而
GFP:熒光蛋白的起源
綠色熒光蛋白(簡稱GFP),是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色熒光。GFP的熒光非常穩定,在激發光照射下,其抗光漂白能力比熒光素強很多。因此GFP及其變種被廣泛地用作分子標記;此外,GFP還被用作砷和一些重金屬的傳感器。 1962年,下村脩和約翰遜在一
GFP與YFP有哪些區別
YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP則不發出綠色熒光,而發出較長波長的黃色熒光,也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題,只是有幾個問題應該考慮:1. 應該標記在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果將
活體GFP綠色熒光成像系統
? 系統提供動物活體綠色熒光蛋白的實時觀察與成像等一系列的熒光檢測。能夠應用在像深度腫瘤,大動物等活體腫瘤追蹤觀察成像研究。??? 該設備是一個高靈敏度的圖像成像工作系統,主要利用特定波長的激光進行激發后,通過高靈敏度的致冷CCD進行實時檢測后,獲得所需的各類 特性的圖像,有利于進一步的分析作用?。
GFP與YFP有哪些區別
YFP和GFP其實是序列基本相同的兩種蛋白,YFP就是把Thr203以Tyr取代,GFP則不發出綠色熒光,而發出較長波長的黃色熒光,也就是YFP。因此兩者最大的區別則是發射波長了。我覺得這兩種蛋白標記應該都沒有問題,只是有幾個問題應該考慮:1. 應該標記在C端,一般的核定位序列均位于蛋白N端,如果將
GFP:熒光蛋白的起源
作者:?羅輯科學?? ? ? ?綠色熒光蛋白(簡稱GFP),是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色熒光。GFP的熒光非常穩定,在激發光照射下,其抗光漂白能力比熒光素強很多。因此GFP及其變種被廣泛地用作分子標記;此外,GFP還被用作砷和一些重金屬的傳感器。? ?
GFP:熒光蛋白的起源
? ? ?綠色熒光蛋白(簡稱GFP),是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色熒光。GFP的熒光非常穩定,在激發光照射下,其抗光漂白能力比熒光素強很多。因此GFP及其變種被廣泛地用作分子標記;此外,GFP還被用作砷和一些重金屬的傳感器。? ? ? ?1962年,下村
gfp激發波長和發射波長
gfp激發波長是488nm,發射波長是507nm。gfp是綠色熒光蛋白的簡稱,是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色螢光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白,但傳統上,綠色熒光蛋白指首先從維多利亞多管發光水母中分離的蛋白質。綠色熒光蛋白主要應用1.由于熒光
Measurement-of-GFP-Expression-and-DNA-Content-in-Permeabilized-Cells
ReagentsCells to be studied expressing green fluorescent protein (GFP). Note that the same cell type without GFP is needed as a control.1 X PBS2% Buff
什么是gfp蛋白及其應用
綠色熒光蛋白GFP的研究進展及應用作者:吳沛橋~巴曉革~胡海~趙靜【摘要】 源于多管水母屬等海洋無脊椎動物的綠色熒光蛋白(GFP)~是一種極具應用潛力的標記物~有著極其廣泛的應用前景。我們就GFP的理化性質、熒光特性、改進和應用研究進行了綜述。【關鍵詞】 綠色熒光蛋白,GFP,,標記物,熒光特性,進
Flow-Sorting-Fibroblasts-with-GFP-and-P.I.
ProtocolWash cells with PBS and trypsinize to a single cell suspension.Count an aliquot on a hemocytometer. Meanwhile centrifuge the cells (e.g. 1000
綠色熒光蛋白(GFP)的應用
骨架和細胞分裂 Kevin Sullivan's 實驗室 酵母菌內SPB 和微管動力學 酵母菌中肌動蛋白的動力 果蠅中MEI-S332蛋白 果蠅有絲分裂和mRNA運輸 網丙菌屬細胞骨架 RNA剪切因子的核內運輸 網丙菌屬的趨化作用 網丙菌屬中細胞骨架動力和細胞運動 核
pcDNA3.1GFP轉染細胞實驗
實驗概要本實驗學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法 — 脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白)。實驗原理外源基因進入細胞主要有三種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法,實際上其基本原理都是利用不同的方法在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入,但是由于
免疫雙擴散檢測抗GFP血清抗體
實驗概要本實驗利用免疫雙擴散檢測了抗GFP血清抗體。實驗原理在溶液中的可溶性多價抗原與血清抗體相遇,當兩者的比例適當時可以形成一種網狀的不溶性的大分子復合物,這叫作免疫沉淀反應。當這樣的抗原和相應的抗體在含有電解質的瓊脂凝膠中相對擴散時,在抗原與抗體的比例適當處會形成可見的沉淀線,這叫免疫雙擴散實驗
gfp質粒轉染細胞后多久發熒光
6個小時以上
GFP骨的冰凍切片實驗方法
Protocol for Frozen section of GFP Bone:Fix the bone in 4% Paraformaldehyde at 4?C under constant agitation for 3 days.Decalcification in 14% EDTA sol
Nature子刊:首個電鏡版GFP問世
綠色熒光蛋白GFP曾給分子生物學領域帶來了一場革命,科學家們用GFP標記細胞內的特定蛋白,就能夠通過熒光顯微鏡輕松的進行識別和定位。但GFP無法用于電鏡,而電鏡的分辨率可比熒光顯微鏡高多了。 日前,麻省理工的化學家們就開發出了類似GFP的電鏡標記,利用這一新技術科學家們可以在電鏡下觀察標記的蛋白,
免疫雙擴散檢測抗GFP血清抗體
實驗概要本實驗利用免疫雙擴散檢測了抗GFP血清抗體。實驗原理在溶液中的可溶性多價抗原與血清抗體相遇,當兩者的比例適當時可以形成一種網狀的不溶性的大分子復合物,這叫作免疫沉淀反應。當這樣的抗原和相應的抗體在含有電解質的瓊脂凝膠中相對擴散時,在抗原與抗體的比例適當處會形成可見的沉淀線,這叫免疫雙擴散實驗
GFPTrap如何設計成功的IP實驗?
借助Chromotek公司GFP-Trap如何設計成功的IP實驗?How to plan an immunoprecipitation of your GFP-fusion protein when using the ChromoTek GFP-Trap?PreambleThis document
T克隆綠色熒光蛋白(GFP)基因實驗
【原理】經TaqDNA聚合酶擴增后的PCR產物末端都帶有單個A。正是基于這一原理,pGEM-T質粒經EcoRV切成平端后,在開口端加上一個T制成T載體,一方面避免了自身環化,另一方面由于T-A互補,從而提高了T載體與PCR產物之間的連接效率。由于T-A克隆只需純化PCR產物,因而操作較為簡便。pGE
綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位
一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法,在光鏡水平進行研究,不需要制樣,沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD,經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后,可產生一種綠色熒光,從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共
亞細胞定位的GFP融合蛋白表達法
GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發出綠色熒光,從而可以精確地定位蛋白質的位置。綠色螢光蛋白(GFP)是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色熒光。通過基因工程技術,綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉進不同物種的基因組,在后代中持續表達,并且能根
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些?
檢測方法:1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502)? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些
檢測方法:1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502)? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-
基因槍轟擊洋蔥表皮觀察GFP瞬時表達
實驗概要本實驗在構建了OsAGAP瞬時表達載體的基礎上,采用基因槍轟擊洋蔥表皮觀察了GFP的瞬時表達。主要試劑高滲培養液(MS無機鹽、40g/L甘露醇),高滲固體培養基(MS無機鹽、40g/L甘露醇、0.7% agar),無水乙醇,無菌去離子水,12.5 M CaCl2,0.1 M亞精胺,等滲培養基
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些
檢測方法:1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502)? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-