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    綠色熒光蛋白GFP性質

    GFP熒光極其穩定,在激發光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比熒光素(fluorescein)強,特別在450~490nm藍光波長下更穩定。 GFP需要在氧化狀態下產生熒光,強還原劑能使GFP轉變為非熒光形式,但一旦重新暴露在空氣或氧氣中,GFP熒光便立即得到恢復。而一些弱還原劑并不影響GFP熒光。中度氧化劑對GFP熒光影響也不大,如生物材料的固定、脫水劑戊二酸或甲醛等。 GFP融合蛋白的熒光靈敏度遠比熒光素標記的熒光抗體高,抗光漂白能力強,因此更適用于定量測定與分析。但因為GFP不是酶,熒光信號沒有酶學放大效果,因此GFP靈敏度可能低于某些酶類報告蛋白。 由于GFP熒光是生物細胞的自主功能,熒光的產生不需要任何外源反應底物,因此GFP作為一種廣泛應用的活體報告蛋白,其作用是任何其它酶類報告蛋白無法比擬的。......閱讀全文

    圖解光誘導熒光蛋白系統

    GFP蛋白曾經為蛋白質定位等相關研究帶來革命性的進展,而隨著具有和GFP類似遺傳學特征的光學指示劑蛋白的出現,蛋白質相關的動態研究也將獲得更多的手段和技術,本文詳細介紹了激光誘導熒光系統在蛋白質研究中的應用。 近年來隨著蛋白質學研究的進展,研究人員相繼發現和特異克隆了一些特殊蛋白質。這些蛋

    【分享】幾種常用的蛋白標簽的功能和優點

      重組蛋白表達技術現已經廣泛應用于生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。本文將簡要介紹幾個常用的蛋白標簽及其功能和優點。  一. GST標簽  GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶,它的天然大小為26KD。

    超分辨顯微技術淺析

    光學顯微成像的衍射極限生物醫學成像技術是基礎生物學研究和臨床醫學最重要的工具之一。回顧歷史,已有多位科學家憑借在成像技術方面的突破獲得諾貝爾獎。其中,Roentgen 因發現 X 射線獲得 1901 年諾貝爾物理學獎; Zernike 因發明相襯顯微鏡獲得 1953 年諾貝爾物理學獎; Ruska

    超分辨顯微技術淺析

    光學顯微成像的衍射極限 生物醫學成像技術是基礎生物學研究和臨床醫學最重要的工具之一。回顧歷史,已有多位科學家憑借在成像技術方面的突破獲得諾貝爾獎。其中,Roentgen 因發現 X 射線獲得 1901 年諾貝爾物理學獎; Zernike 因發明相襯顯微鏡獲得 1953 年諾貝爾

    生物物理所基于光致電子轉移擴展熒光蛋白的傳感性質

      9月11日,美國化學會雜志JACS 在線發表了中國科學院生物物理研究所王江云研究組的最新研究成果——《基因編碼非天然氨基酸作為光致電子轉移探針擴展熒光蛋白的傳感性質》。該研究利用基因密碼子擴展技術,實現了在活細胞中編碼一系列鹵代酪氨酸(3-氯代酪氨酸(ClY)、3,5-二氯代酪氨酸(Cl2Y)、

    天津大學最新Nature子刊文章

    來自天津大學,南開大學生命科學學院的研究人員發表文章報道稱增強型綠色熒光蛋白的熒光會由于激光而被關閉,這種特殊的激光即飛秒激光,是人類目前在實驗室條件下所能獲得最短脈沖的技術手段,研究人員還通過癌細胞的系列離子進程驗證了這一點,相關成果公布在Nature Photonics雜志(影響因子為29.2)

    報告基因分類及優缺點

    報告基因(reporter gene)是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,其表達產物非常容易被鑒定。把它的編碼序列和基因調節序列相融合,在調控序列控制下進行表達,從而利用它的表達產物來標定目的基因的表達調控。作為報告基因必須具備的條件:(1)全序列已測定(2)表達產物在手提細胞中不存在,即無背景,

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

    綠色熒光蛋白(GFP)在科學研究上的應用

    綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein,簡稱GFP)bs-2194P是一種能在藍色波長光線激發下發出熒光的特殊蛋白質,正是這種神奇的性質,讓它成為當今生物化學領域最有力的工具之一,被稱為“生物北斗”。GFP在科學研究上有著驚人的用途,因為它能夠使我們直接看到細胞內部的運動、分布

    細胞RNA實時成像或將“成為可能”?!

      結合并激活熒光染料的適體熒光 RNA(FR)已用于對豐富的細胞 RNA 種類進行成像。然而,諸如低亮度和具有不同光譜特性的染料 / 適體組合的有限可用性的局限性,限制了這些工具在活的哺乳動物細胞和體內的使用。  2019 年 9 月 23 日,華東理工大學朱麟勇及楊弋共同通訊在 Nature B

    小動物活體成像系統比較

    分子影像產品的研究與發展,是伴隨著分子影像成像理論和成像算法的發展而逐步發展的。在熒光標記的分子成像方面,目前世界上僅有少數實驗室研制成功可以對小動物進行跟蹤性在體熒光斷層分子影像的系統,并接連在Nature/Science上發表一系列突破性研究進展。  近年來,國外某些公司改進了現有的體外熒光成像

    美制成首個活細胞激光器

      美國馬薩諸塞州綜合醫院研究人員成功利用表達了綠色熒光蛋白(GFP)的腎臟細胞產生了一種納秒級的激光脈沖,首次用單個活細胞作為增益介質產生了激光。相關論文將于近日發表在《自然·光子學》雜志上。   產生激光通常要有3個要素,第一是光源,第二是受激產生激光的“增益介質”,第三是將所產生的光聚攏到一

    《科學》:突破顯微鏡的局限 這套系統能看清體內基因表達

      今日,最新一期《科學》雜志上報道了一篇值得關注的論文。加州理工學院的一支團隊開發出了一套全新的超聲成像系統。它能夠在活體動物中,讓科學家們親眼看到基因的表達。盡管這項技術目前還較為初步,但可以想象,一旦發展成熟,它將能給多種疾病的檢測帶來突破。  事實上,過去的科學家們早已開發出了許多檢測基因表

    如何閱讀基因載體圖譜

      基因載體是基因工程的核心,也是基因治療中強有力的生物工具,我們先來認識和閱讀載體圖譜吧。   一、載體分類及載體組成元件   載體分類   1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體   病毒載體是一種常見的分子生物學工具,可將遺傳物質帶入細胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目

    如何閱讀基因載體圖譜

      基因載體是基因工程的核心,也是基因治療中強有力的生物工具,我們先來認識和閱讀載體圖譜吧。   一、載體分類及載體組成元件   載體分類   1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體   病毒載體是一種常見的分子生物學工具,可將遺傳物質帶入細胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目的細

    如何閱讀基因載體圖譜?(三)

    三、改造載體 1、改造啟動子:一般在過表達載體中CMV屬于廣譜型的強啟動子,具體可根據實驗需求,選用不同啟動子,尤其是對于AAV載體構建時選用組織特異性啟動子。 啟動子名稱啟動子大小組織特異性ALB2.4kb肝臟特異性CAG944bp廣泛表達的強啟動子CamKIIa1.2kb大腦皮層和海馬神經元特異

    著名華人科學家Cell子刊細胞研究新技術

      由麻省理工學院的神經科學家領導的一個研究小組開發出了一種新方法來監控腦細胞是如何相互協調控制如啟動動作或探測氣味等特異行為的。這項新的成像技術是基于檢測神經元中的鈣離子,可以幫助他們繪制出執行這些功能的腦回路,并提供關于自閉癥、強迫癥和其他精神疾病起因的新認識。相關論文發表在10月18日的《神經

    Nat Methods: 2014年值得關注的技術

      單細胞測序被評為2013年年度技術   2014 年首刊,《Nature Methods》雜志將2013年度技術(Method of the Year 2013)授予了單細胞測序(single-cell sequencing)。同時,雜志還介紹了2014年值得關注的技術,包括

    2014值得關注的技術:迷你的胞內探針

      2013年末,《Nature Methods》雜志將年度技術授予了單細胞測序(single-cell sequencing)。同時,雜志還介紹了2014年值得關注的技術,包括CRISPR和基因組編輯、神經學工具、原位測序、單顆粒低溫電子顯微鏡等。   追蹤小的分子并干擾其活性對了解活細胞如

    熒光顯微鏡的原理及應用要點

      熒光顯微鏡是利用特定波長的光照射被檢物體產生熒光進行鏡檢的顯微光學觀測技術,已有100多年歷史。近年來,由于免疫熒光在醫學研究、診斷領域里的廣泛應用,FISH、綠色熒光蛋白(GFP)技術分別在基因組學、蛋白質組學研究方面的推廣,顯微照相、數字CCD成像技術的輔助驅動,賦予這一傳統技術更新的應用價

    2016國際熒光前沿技術高端論壇(FluoroFest)在京開幕

      分析測試百科網訊 2016年4月19日,2016國際熒光前沿技術高端論壇(2016 FluoroFest)在北京大學開幕。FluoroFest 是一個全球性的熒光學術論壇,旨在促進相關領域的廣大科技工作者交流最新熒光技術,推動跨學科及領域的經驗分享與合作。

    2011中國、世界十大科技進展揭曉

     由中國科學院、中國工程院主辦,中國科學院院士工作局、中國工程院學部工作局、中國科學報社承辦,中國科學院院士和中國工程院院士評選的瀚霖杯2011年中國十大科技進展新聞、世界十大科技進展新聞,2012年1月17日揭曉。 2011年中國十大科技進展新聞   1 天宮一號與神舟八號成功實現交會對接

    《環球科學》2011年十大科學新聞評選

      “十大科學新聞”評選是《環球科學》(《科學美國人》雜志中文版)每年一度的重頭戲,也是本年度全球各大科學領域的重大事件進行的一次全面盤點。經過專業編輯和專家團隊的商討,《環球科學》初步挑選出了30條候選新聞,接受網友的點評和投票。  1、超光速粒子挑戰愛因斯坦相對論  9月23日,歐洲核子研究中心

    無損探測技術?光譜讓細胞不再“受傷”

    在低分辨率(左)和高分辨率(右)下的小鼠大腦組織中,紅外光譜學可將星形膠質細胞與神經元分辨開來。 圖片來源:ARIS POLYZOS & LILA LOVERGNE  為了觀察細胞,研究人員經常不得不“虐待”它:把它從“家”里揪出來,用有毒的固定液浸泡它,修改它的DNA,強迫它產生可能會擾亂

    無損探測技術? 讓細胞不再“受傷”

      在低分辨率(左)和高分辨率(右)下的小鼠大腦組織中,紅外光譜學可將星形膠質細胞與神經元分辨開來。 圖片來源:ARIS POLYZOS & LILA LOVERGNE   為了觀察細胞,研究人員經常不得不“虐待”它:把它從“家”里揪出來,用有毒的固定液浸泡它,修改它的DNA,強迫它產生可能會擾亂

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      在低分辨率(左)和高分辨率(右)下的小鼠大腦組織中,紅外光譜學可將星形膠質細胞與神經元分辨開來。 圖片來源:ARIS POLYZOS & LILA LOVERGNE   為了觀察細胞,研究人員經常不得不“虐待”它:把它從“家”里揪出來,用有毒的固定液浸泡它,修改它的DNA,強迫它產生可能會擾亂

    諾貝爾化學獎全收錄(1901-2018)

      當地時間10月3日,2018年度諾貝爾化學獎獲得者揭曉。瑞典皇家科學院決定將2018年的諾貝爾化學獎授予美國加州理工學院科學家Frances H. Arnold在“酶的定向進化(the directed evolution of enzymes)”方面的研究,另一半授予美國密蘇里大學科學家Geo

    華中科技大學Nature子刊發布轉錄調控新方法

      來自華中科技大學、伊利諾伊大學香檳分校的研究人員證實,通過機械力誘導直接拉伸染色質可上調轉錄。這項研究發布在8月22日的Nature Materials雜志上。  華中科技大學生命學院的汪寧(Ning Wang)教授,與伊利諾伊大學香檳分校的Andrew S. Belmont是這篇論文的共同通訊

    T細胞增殖分析的人氣之選

      對免疫學家而言,細胞增殖通常是T細胞受刺激的反映。受到刺激的T細胞產生它們自己的克隆副本,時刻警惕著特定抗原的再次來襲。   對于細胞增殖的分析,目前一般分為兩大陣營。在第一個陣營中,研究人員依賴某些試劑來區分靜止和分裂的細胞。這些試劑包括核苷類似物(如BrdU)、DNA染料(Hoechst和

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