如何消除組織培養的污染?
當重要的培養細胞污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養污染的實驗步驟。1)在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞,稀釋到常規細胞傳代的濃度。2)分散細胞懸液到多孔培養板中,或幾個小培養瓶中。在一個濃度梯度范圍內,把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性霉素B推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。3)每天觀測細胞毒性指標,如脫落,出現空泡,匯合度下降和變圓。4)確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2-3倍濃度的抗生素的培養液培養細胞2-3代。5)在無抗生素的培養......閱讀全文
葡萄組織培養
一、葡萄的形態特征和生物學特性葡萄(Vitis vinifera L.)屬落葉木質藤本植物,葡萄地上部分的莖細長柔弱,髓部較大,組織較疏松。節上具有卷須,使新梢可以纏繞其它樹木或支架上向上攀援。葉近圓形或卵形,35裂,基部心形。圓錐花序。葡萄是深根性作物,其根系在土壤中的分布狀況,隨氣候、土壤型,地
組織培養再生
步驟一:接種組織培養的接種是指將滅過菌的材料,在無菌的情況下,切成小塊,放入培養基的過程。科研、生產部門的接種工作,多在無菌室或超凈工作臺上進行,中學可制作接種箱,在箱內進行接種。接種的方法步驟如下: ①在無菌室或接種箱中放好接種時所需要的酒精燈、貯存70%酒精和棉球的廣口瓶、各種鑷子、接種針、
植物組織培養過程
一、培養材料的采集組織培養所用的材料非常廣泛,可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉,有時也利用花粉粒和花藥,其中根尖不易滅菌,一般很少采用。對于木本花卉來說,闊葉樹可在一、二年生的枝條上采集,針葉樹種多采種子內的子葉或胚軸,草本植物多采集莖尖。在快速繁殖中,最常用的培養材料是莖尖,通常切塊在0.5厘
花卉組織培養技術
實驗概要掌握花卉組織培養的基本技術流程。實驗原理花卉組織培養,就是分離花卉植物體的一部分,如莖類、莖段、葉、花、幼胚等,在無菌試管,并配合一定的營養、激素、溫度、光照等條件,使其產生完整植株。由于其條件可以嚴格控制,生長迅速,1-2個月即為一個周期,因此在花卉植物的生產上有重要應用價值。快速大量繁殖
植物組織培養簡介
植物的組織培養是根據植物細胞具有全能性這個理論,近幾十年來發展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養廣義又叫離體培養,指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,通過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其
花卉組織培養技術
一、實驗原理 花卉組織培養,就是分離花卉植物體的一部分,如莖類、莖段、葉、花、幼胚等,在無菌試管,并配合一定的營養、激素、溫度、光照等條件,使其產生完整植株。由于其條件可以嚴格控制,生長迅速,1-2個月即為一個周期,因此在花卉植物的生產上有重要應用價值。快速大量繁殖方面:對一些難繁殖的名貴品種花卉
常規組織培養法
一、初代消化培養法1、 準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3、?處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分
蘭花的組織培養
法國人莫瑞爾(G.M. Morel)首先將組織培養的技術應用在蘭花上,采取莖頂組織進行培養,經由類原球體而獲得植株。利用組織培養進行芽體增殖是另一個獲取種苗的方法,例如,蝴蝶蘭便利用花梗芽進行繁殖,這種方法的缺點是繁殖的效率較差,而且成本較高。由于芽體是經由多細胞發育而成,并不適合做為基因轉殖的材料
馬鈴薯的組織培養
1、繁殖瓶苗 將待繁脫毒苗在無菌條件下每葉節切一段,接種在僅含大量元素、微量元素和鐵鹽的無激素MS固體或液體(可用紙橋)培養基的組培瓶中,置培養室內培養。培養條件為:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,培養溫度(25±2)℃,空氣相對濕度50%-60%,自然通風。葉節段接種30-50
白鶴芋的組織培養
1、取材與處理取白鶴芋小苗,流水沖洗后,剝掉中下部葉片,剪除根系。在超凈工作臺上用75%乙醇浸泡30-60秒,再用0.1%升汞溶液消毒3-8分,無菌水沖洗3次,剝取莖尖0.5-1.0CM長,作為外植體,接種在誘芽培養基上(MS+6BA 2-3mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L)。接種后置培養室
植物組織培養的應用
快速繁殖優良植物株系 組織培養具有時間短、增殖率高和全年生產等優點,比大田生產快得多。加上培養材料和 試管 苗的小型化,這就可使有限的空間培養出大量個體。例如蘭花(Cymbidium)、桉樹(Eucalyptus)、楊樹、秋海棠等植物,用一個莖尖或一小塊葉片為基數,
植物組織培養的概念
植物組織培養指的是在特定條件下用人工手段是植物細胞分裂增殖的生物學技術。
植物組織培養應用介紹
植物組織培養指的是在特定條件下用人工手段是植物細胞分裂增殖的生物學技術。
植物的組織培養技術
一. 實驗目的: 1. 學習固體培養基的配制; 2. 掌握胡蘿卜愈傷組織的誘導方法。 二. 實驗原理: 植物組織培養理論依據是植物細胞具有全能性。 植物組織培養是指用無菌培養的方法,在人工制備的培養基上培養植物體的一個離體器官、離體的一種組織,或單個細胞
植物細胞組織培養
實驗概要植物細胞和組織培養的技術性強,要求無菌操作,通過本實驗可初步掌握常規的組織培養技術,加深對無菌操作的了解。實驗原理植物的全能性:植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力,稱為植物的全能性。植物組織培養就是利用植物的全能性進行離體無菌植物培養的一門技術。植物組織培養按其原始意義
香石竹的組織培養
1、取材與處理 將待繁香石竹脫毒苗在無菌條件下每葉節切一段,接種在裝有快繁培養基(MS或B5+KT0.1-0.5mg/L+NAA0.05-1.0mg/L)的培養瓶中,置培養室內培養。2、確定培養條件 培養環境條件為:光照1000-3000lx,光周期13-16h/d,溫度(23±2)℃,空氣相對濕度
植物細胞組織培養
?? 實驗目的??? 植物細胞和組織培養的技術性強,要求無菌操作,通過本實驗可初步掌握常規的組織培養技術,加深對無菌操作的了解。??? 二.實驗原理??? 植物的全能性:植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力,稱為植物的全能性。??? 植物組織培養就是利用植物的全能性進行離
家庭組織培養建議:操作
1.培養容器和玻璃儀器的準備:進行培養基的配制首先要準備好培養瓶和配制使用的玻璃儀器。培養瓶一般使用各種果醬瓶,要先用洗潔精浸泡瓶子4~8小時,再用流水沖洗數次。其他的玻璃儀器同樣需要這樣清潔,直到玻璃壁上不掛水珠而是成為水膜為止。清洗完畢的玻璃容器要倒扣,空去瓶內的水。清洗干凈的容器要注意防塵,盡
植物組織培養的概念
植物組織培養概念(廣義)又叫離體培養,指從植物體分離出符合需要的組織。器官或細胞,原生質體等,通過無菌操作,在人工控制條件下進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。植物組織培養概念(狹義)指用植物各部分組織,如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養獲得再生植株,也指在培養
植物組織培養技術簡介
上世紀30年代white首次由番茄根建立了第一個活躍生長的無性繁殖系,驗證了l902年Haberlandt提出的植物細胞全能性的理論。所謂植物細胞全能性就是每個植物細胞就像一粒種子,在適宜條件下具有發育成完整植株的潛力。20世紀50年代——誘導培養銀膠菊愈傷組織得到天然橡膠從胡蘿卜體 細胞培養
植物組織培養的流程
植物組織培養的流程:第一步,將采來的植物材料除去不用的部分,將需要的部分仔細洗干凈,如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小,即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時,沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料,可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗在污染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣
什么是植物組織培養
植物的組織培養是根據植物細胞具有全能性這個理論,近幾十年來發展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養廣義又叫離體培養,指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,通過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產
植物細胞組織培養
一.實驗目的植物細胞和組織培養的技術性強,要求無菌操作,通過本實驗可初步掌握常規的組織培養技術,加深對無菌操作的了解。二.實驗原理植物的全能性:植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力,稱為植物的全能性。植物組織培養就是利用植物的全能性進行離體無菌植物培養的一門技術。植物組織培養按其
植物愈傷組織培養
無菌播種(一)實踐目的學習利用植物種子的胚軸進行愈傷組織培養的方法,主要是種子的無菌接種技術。(二)實踐地點和時間植物組培室、建議4學時(三)實踐用具與材料超凈工作臺、手術剪、槍狀鑷、酒精燈、酒精瓶、紗布、高壓滅菌鍋、電子天平、盛物籃、植物種子、70%酒精、0.1%升汞、ZT、2,4—D、大量元素、
葡萄組織培養育苗
一、葡萄嫩梢采集與消毒 將大樹或扦插苗長出5—7片葉的嫩梢,取5—10厘米長,去掉幼葉。用自來水沖洗3—5分鐘,在70%酒精中浸泡30—40秒鐘,用蒸餾水沖洗2—3次,再放入0.5%氯化汞溶液中消毒7一10分鐘,最后用無菌水沖洗5—6次后備用。 二、培養基制作與篩選 (一)莖尖培養 方1 1
組織培養的應用前景
1.快速繁殖某些稀有植物或有較大經濟價值的植物 依靠自然條件在較短時間內繁殖稀有植物和經濟價值較高的植物,受到地理環境和季節的限制,很難達到快速、高效的目的;特別對于在短時期內需要達到一定數量,才能創造應有價值的植物,時間就是效益,只有通過組織培養的方法才能滿足這一要求。用組織培養法繁殖植物,這是組
組織培養的技術分類
按外植體分,植物組織培養可分以下幾類:1、胚胎培養植物的胚胎培養,包括胚培養、胚乳培養、胚珠和子房培養,以及離體受精的胚胎培養技術等。2、器官和組織培養器官培養是指植物某一器官的全部或部分或器官原基的培養,包括莖段、莖尖、塊莖、球莖、葉片、花序、花瓣、子房、花藥、花托、果實、種子等。組織培養有廣義和
植物組織培養的流程
一個完整的植物組織培養過程一般包括以下幾個步驟:(1)準備階段查閱相關文獻,根據已成功培養的相近植物資料,結合實際制訂出切實可行的培養方案。然后根據實驗方案配制適當的化學消毒劑以及不同培養階段所需的培養基,并經高壓滅菌或過濾除菌后備用。(2)外植體選擇與消毒選擇合適的部位作為外植體,采回后經過適當的
植物組織培養知識概要
植物組織培養(Plant Tissue Culture):是指通過無菌操作分離植物體的一部分(外植體explant),接種到培養基上,在人工控制的條件下(包括營養、激素、溫度、光照、濕度)進行培養,使其產生完整植株的過程。(主要有原生質體(Protoplast),懸浮細胞,組織(愈傷組織Callus
如何消除組織培養的污染?
當重要的培養細胞污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產生毒性的劑量水平。這點在使