一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(二)
材料和方法 對照血清(綿羊)和病毒抗原購自英國NIBSC,除了B/Brisbane/3/2007血清和抗原來自荷蘭Solvay Phormaceuticols,PR/B/34血清(雞)和病毒是購自美國Charles River Laboratories。重組的全長HA蛋白(A/H1N1/New Caledonia/2O/99、A/H3N2/Wyaming/3/2003和B/Jilin/20/2003)分別購自以色列PraspecBio、荷蘭Genway和美國Protein Sciences。表4中分析的工藝樣品來自瑞典通用電氣醫療集團,除了B/Brisbane/3/2007 MBV和TBV)樣品以及A/H1N1/Salamon Islands/3/200 TBV樣品是由荷蘭Solvay Pharmaceuticals提供的。三價疫苗購自三家制造商。覆面活性劑P2O(po......閱讀全文
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(二)
材料和方法??? 對照血清(綿羊)和病毒抗原購自英國NIBSC,除了B/Brisbane/3/2007血清和抗原來自荷蘭Solvay Phormaceuticols,PR/B/34血清(雞)和病毒是購自美國Charles River Laboratories。重組的全長HA蛋白(A/H1N1
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(五)
表3:添加劑對回收的影響。參照抗原B/Jiangsu/lO/2005(5 ug/ml)與添加劑混合,并在B表面上分析樣品。結果與HBS-EP+緩沖液中無添加劑的對照樣品進行比較。??? 工藝樣品的分析??? 為了測試生物傳感器方法的性能,對流感疫苗純化過程中不同階段的樣品進行了分析,從收集的細胞
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(六)
討論在本文中,我們展示了一種新穎的定量HA的生物傳感器方法的開發和初步結果,它利用了與SRID方法相同的參照抗原和血清,再加上固定的HA。來自不同供應商的重組HA蛋白經過固定化的測試,并根據固定性質(如活性和直接稀釋到固定緩沖液的高濃度)進行挑選(數據未顯示)。挑選出的蛋白可利用標準的氨基偶聯步驟,
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(三)
?表1 計算濃度和變異系數,以分析B/jiangsu/10/2005(圖3)???SRID??? 血清以Cy3-染料標記。未標記的血清和Cy3-標記的血清(小于總血清量的0.5%;證實不會干擾沉淀)與熔化的瓊脂糖混合,澆鑄在模中,以形成凝膠中的孔。樣品和參照抗原在加入凝膠孔之前,用1%的兩性洗滌
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(一)
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法—單向放射免疫擴散法一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法——單向放射免疫擴散法譯自= A novel assay for lnfluenza virus quantification using surfece plasman resanance. V
一種利用表面等離子共振定量流感病毒的新方法...(四)
為了擴展特異性研究,對27種不同的血清與固定了HA/H3N2的表面之間的結合進行分析(圖5、表2)。結果顯示只有特異針對H3N2亞型的血清才能與表面明顯結合。抗-B和抗-H1N1血清顯示出低的結合水平。相應地,利用50 mM HCl、0.05% P2O再生后,也開展了27種血清與固定了HA/
表面等離子共振的等離子波
等離子體通常指由密度相當高的自由正、負電荷組成的氣體,其中正、負帶電粒子數目幾乎相等。把金屬表面的價電子看成是均勻正電荷背景下運動的電子氣體,這實際上也是一種等離子體。當金屬受電磁干擾時,金屬內部的電子密度分布會變得不均勻。因為庫侖力的存在,會將部分電子吸引到正電荷過剩的區域,被吸引的電子由于獲
表面等離子共振的技術展望
隨著 SPR 技術成為分析生物化學、藥物研發和食物監控領域中的一個不可缺少的部分 ,SPR 生物傳感器的應用將更加趨向多樣化 , 特別是它在小分子檢測和脂膜領域的新興應用將使其在未來的藥物發現和膜生物學中扮演一個越來越重要的角色。 近幾年 , 其發展尤為迅猛 , 隨著 SPR 儀器的不斷完善和生
表面等離子共振的檢測原理
綜合運用 表面等離子共振廣泛應用于研究結合特異性、抗體選擇、抗體質控、疾病機制、藥物發明、生物治療、生物處理、生物標記物、配體垂釣、基因調控、細胞信號傳導、親和層析、結構-功能關系、小分子間相互作用等。 檢測原理 表面等離子共振(SPR)是一種光學現象,可被用來實時跟蹤在天然狀態下生物分子
表面等離子共振SPR光學原理
我們在前面提到光在棱鏡與金屬膜表面上發生全反射現象時,會形成消逝波進入到光疏介質中,而在介質(假設為金屬介質)中又存在一定的等離子波。當兩波相遇時可能會發生共振。當消逝波與表面等離子波發生共振時,檢測到的反射光強會大幅度地減弱。能量從光子轉移到表面等離子,入射光的大部分能量被表面等離子波吸收,使
表面等離子共振的QDATTM分析軟件
反應曲線的分析以及其后的動力學和親和性數據測算通常繁瑣費時。SensiQ的QDATTM分析軟件極大地簡化了數據分析過程,為研究人員的動力學和親和性測定提供了簡單、省時、可信的手段。 QDATTM是在Biologic Software公司應用廣泛的Clamp and Scrubber架構之上開發
簡介表面等離子共振的實驗原料
蛋白質–蛋白質(Protein–Protein) 多肽–受體(Peptide–Receptor) 抗體–抗原(Antibody–Antigen) 膜受體–配體(Membrane Receptor–Ligand) 凝集素–聚糖/糖蛋白(Lectin–Polysacharride/Glyco
表面等離子共振實驗的調和方法
任何一對親和分子,一個(靶分子)被鍵合在生物傳感器表面,另一個(分析物)被置于溶液中。當含有分析物的溶液流經靶分子鍵合的生物傳感器表面時,親和性復合物生成。 SensiQ配備雙通道流動注射分析式微射流系統,內有85nL流動池。SensiQ使用一次性的SPR生物傳感器,裝卸簡便。生物傳感器表面包
表面等離子共振的控制軟件介紹
SensiQ的控制軟件在原始反應曲線生成時,同時并實時獲取和展示兩個通道內的數據。參照通道內的數據被減除,以補償熱漂移、非特異性結合、總折射指數移相等效應,從而得到清晰高質的實驗數據。控制軟件在反應曲線上簡單加入報告點,用來確定樣品注入后產生的結合反應。報告點的添加可在實驗中的任何時候由人工進行
簡介表面等離子共振的技術特點
SPR 光學生物傳感器經過 20 年來的發展 , 已經成為生命科學和制藥領域的一種重要的研究工具。與傳統的相互作用技術如超速離心,熒光法,熱量測定法等相比,SPR生物傳感器[1]具有如下顯著特點: 實時檢測,能動態地監測生物分子相互作用的全過程 無需標記樣品,保持了分子活性 樣品需要極少,
表面等離子共振技術的背景介紹
表面等離子共振技術,英文簡寫SPR,是從20世紀90年代發展起來的一種新技術,其應用SPR原理檢測生物傳感芯片(biosensor chip)上配位體與分析物之間的相互作用情況,廣泛應用于各個領域。 1902年,Wood在一次光學實驗中,首次發現了SPR現象并對其做了簡單的記錄,但直到39年后
表面等離子共振的消逝波的介紹
根據法國物理學家菲涅爾所提出的光學定理:可知,當光從光密介質射入光疏介質,入射角增大到某一角度,使折射角達到90°時,折射光將完全消失,而只剩下反射光,這種現象叫做全反射。(圖1)當以波動光學的角度 來研究全反射時,人們發現當入射光到達界面時并不是直接產生反射光,而是先透過光疏介質約一個波長的深
表面等離子共振的商業化系統
表面等離子共振已經在商業化的檢測儀器中應用。目前最廣泛使用的是Biacore Life Sciences公司生產的Biacore系列。Biacore Life Sciences現已被General Electric收購。其它表面等離子共振的商業儀器還有例如ICx的SensiQ等。 SensiQ
光學分析的表面等離子共振法
表面等離子共振(SurfacePlasmonResonance,SPR)是一種物理光學性質,它是一種沿著金屬和電介質界面傳播的電磁波。光以一定的角度入射到界面時,若在界面發生完全內反射,會產生衰減波。若衰減波在金屬表面與自由電子耦合,則發生表面等離子體激元共振,光的反射率達到最小,此時的入射角稱為表
表面等離子共振技術在蛋白蛋白相互作用的應用(二)
控制軟件SensiQ的控制軟件在原始反應曲線生成時,同時并實時獲取和展示兩個通道內的數據。參照通道內的數據被減除,以補償熱漂移、非特異性結合、總折射指數移相等效應,從而得到清晰高質的實驗數據。控制軟件在反應曲線上簡單加入報告點,用來確定樣品注入后產生的結合反應。報告點的添加可在實驗中的任何時候由人工
表面等離子共振儀器結構及工作原理
表面等離子共振儀核心部件包括光學系統、傳感器芯片、液體處理系統三個主要部分,其他的組成部分包括LED狀態指示器及溫度控制系統等。 光學系統 能夠產生和測量SPR信號的光電組分稱為光學檢測單元。 傳感器芯片 傳感器的芯片是其最為核心的部件。在SPR技術中必須首先有一個生物分子偶聯在傳感片上
表面等離子共振分子互作BIACORE的原理
首先先了解幾個術語和定義:表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)一、消逝波當光從光密介質入射到光疏介質,入射角增加到某一角度,使折射角達到90°時,折射光將完全消失,而只剩下反射光,這種現象叫做全反射。當以波動光學的角度來研究全反射時,人們發現當入射光到達界面時
表面等離子共振技術檢測乳鐵蛋白的介紹
以臨界角入射到不同折射率的兩種金屬介質界面的入射光線可以引起金屬產生自由的電子共振,電子吸收光能量使反射光大幅減弱,能夠使反射光在一定角度內完全消失的入射角稱為SPR角。SPR角隨介質表面折射率變化而變化,而折射率的變化又與介質表面結合的分子質量成正比,因此可以通過對生物反應過程中SPR角的動態
表面等離子共振檢測蛋白相互作用實驗
用 BlAcore 芯片 用 NTA-SAM 芯片 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 CM
表面等離子共振檢測蛋白相互作用實驗
實驗方法原理 實驗材料 CM-5 葡聚糖芯片(BIAcore)配體蛋白靶蛋白試劑、試劑盒 PBS胺-偶聯試劑盒(詳見「其他」)儀器、耗材 BIAcore SPR 設備BIA 評估軟件(point-and-click)實驗步驟 1. 插入一個新的 BIAcore CM-5 葡聚糖芯片。2. 用 PBS
表面等離子體共振OpenSPR改進肽篩選研究方法
在任何治療開發項目的第一階段,有必要使用一個完善的模型系統來審查比較新的治療藥物。用一個穩定的模型系統來比較新的治療方法。建立模型系統將為有效的篩選分析提供基礎,從而使研究者能夠有效地比較和對比他們感興趣的治療劑的各種生物學變化。重要的是,透明質酸介導的運動受體,也被稱為RHSMM,通常在乳腺癌,結
全自動表面等離子體共振成像儀的優異功能
1.陣列式檢測,同一芯片可同時獲得多達400種相互作用???? 創新的陣列式芯片設計,同一芯片可同時分析超過400組相互作用,與傳統的通道-技術相比,所需時間縮短百倍,并節約試劑和人力成本,特別適用于快速篩選。?2.無標記,實時生物分子相互作用分析與成像???? 基于SPR技術、新型的生物傳感技術,
表面等離子共振生物分子相互作用分析基于SPR原理
生物分子相互作用分析是基于SPR原理的新型生物傳感分析技術,無須進行標記,也可以無須純化各種生物組分。在天然條件下通過傳感器芯片實時、原位和動態測量各種生物分子如多肽、蛋白質、寡核苷酸、寡聚糖,以及病毒、細菌、細胞、小分子化合物之間的相互作用過程。表面等離子共振是表面增強拉曼的重要增強機理之一,
表面等離子共振技術在蛋白蛋白相互作用的應用(一)
應用領域結合特異性、抗體選擇、抗體質控、疾病機制、藥物發明、生物治療、生物處理、生物標記物、配體垂釣、基因調控、細胞信號傳導、親和層析、結構-功能關系、小分子間相互作用等檢測原理表面等離子共振(SPR)是一種光學現象,可被用來實時跟蹤在天然狀態下生物分子間的相互作用。這種方法對生物分子無任何損傷,且
利用-TSQ-Quantiva-定量肉類摻假比例(二)
實驗結果1.種屬特征性多肽的確認種屬特征性多肽尋找驗證是肉類摻假實驗的關鍵點,因此我們通過高分辨的 Q Exactive 質譜平臺,研究了常見的五種肉類。選出每個物種專屬性的多肽,去掉含有酶漏切位點的多肽,鑒定到各個物種相對于其他四種物種專屬性的多肽條數為:雞 339 條,鴨 125 條,豬