從總RNA中除去基因組DNA實驗
試劑、試劑盒 變性（甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇 甲醛MOPS 緩沖液乙二胺四乙酸MOPS乙酸鈉酚 氯仿（3:1) 溶液氯仿液體酚Tris-HCl電泳緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭離心管配膠板微波爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑變性（甲醛)瓊脂糖凝膠（配制過程見第 18步）1g瓊脂糖83 ml 蒸餾水12.3mol/L甲醛蒸餾水乙醇，100%乙醇（70%), 用 DEPC 處理過的 H20 配制12.3mol/L(37%) 甲醛,pH>4.010XMOPS 緩沖液0.01mol/L 乙二胺四乙酸（EDTA)0.2mol/LMOPS0.05mol/L 乙酸鈉酚/氯仿（3:1) 溶液10 ml 氯仿30 ml 液體酚10 mlTris-HCl，pH7.0電泳緩沖液（見第18f. 步）10 ml10XMOPS用 900 ml 蒸餾水，稀釋到 1X 濃度2. 核酸和寡核苷酸來自方案 1......閱讀全文
利用－ConcertPlant－試劑從植物組織中純化－RNA－實驗
實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Concert Plant RNA試劑NaCl氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑ConcertPlantRNA試劑(Invitrogen)，4°C預冷NaCl,5mol/L(無RNA酶）氯仿異丙醇乙醇，75%,用DEPC處理過的水
利用－ConcertPlant－試劑從植物組織中純化－RNA－實驗
以下概述的是 ConcertPlant 試劑（Invitrogen) 所附帶的方案。該方案不是以酚為基礎的，但需要加氯仿。該試劑用于多種植物的組織中分離 RNA, 包括藍葉云杉針、馬鈴薯塊莖、玉米種子和棉花葉。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒 甲酰胺消化緩沖液乙醇肝糖異丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯儀器、耗材 微量離心管恒溫箱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去離子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水消化緩沖液（lmol/L 異硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巰基乙醇
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 石蠟包埋的組織樣品 試劑、試劑盒 甲酰胺 消化緩沖液 乙醇 肝糖
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
該方案是由 Godfrey 等改進 Fisher 的方案發表的。此前已有從固定組織中純化 RNA 的方案發表。Ambion 和 Roche 發明了從石蠟包埋的組織中純化 RNA 的商品化試劑盒。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒甲酰胺
哺乳動物中制備基因組DNA實驗——制備DNA
在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續的實驗打下基礎。一般真核細胞基因組DNA有107-9bp，可以從新鮮組織、培養細胞或低溫保存的組織細胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞，隨后用酚抽提而實現的。實驗材料動物組織試劑、
從鼠尾或其他小樣本中制備基因組DNA
這一簡單的實驗方案在成百上千的實驗室被廣泛應用于轉基因或基因剔除小鼠的基因型鑒定以及從小量培養的細胞或組織塊中提取 DNA。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理這一簡單的實驗方案在成百上千的實驗室被廣泛應用于轉基因或基因剔除小鼠的基因型鑒定以及從小量培養的細胞或組織塊中提取
從鼠尾或其他小樣本中制備基因組DNA
實驗方法原理 這一簡單的實驗方案在成百上千的實驗室被廣泛應用于轉基因或基因剔除小鼠的基因型鑒定以及從小量培養的細胞或組織塊中提取 DNA。實驗材料 蛋白酶 K培養的細胞鼠尾或小鼠組織試劑、試劑盒 乙醇異丙醇酚氯仿異戊醇磷酸鹽緩沖溶液SNETTE儀器、耗材 Sorvall 離心機及 H1000B、SH
從鼠尾或其他小樣本中制備基因組DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一簡單的實驗方案在成百上千的實驗室被廣泛應用于轉基因或基因剔除小鼠的基因型鑒定以及從小量培養的細胞或組織塊中提取 DNA。 實驗材料 蛋白
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
哺乳動物中制備基因組DNA實驗
制備DNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 動物組織 試劑、試劑盒
細菌中制備基因組DNA實驗——小量制備
真核生物的一切有核細胞（包括培養細胞）都能用來制備基因組 DNA。真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細胞核內，因此，制備DNA的原則是既要將DNA與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持DNA分子的完整。實驗方法原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS（十二烷基硫酸鈉）和蛋白酶K的溶液
哺乳動物中制備基因組DNA實驗
實驗材料 動物組織試劑、試劑盒 PBS乙酸銨乙醇酚氯仿異戊醇TE儀器、耗材 離心機搖床研缽實驗步驟 1. ?切下組織并立即剪成小塊，置于液氮中凍結。?2. ?將200 mg~1 g 的組織用預冷的研缽和研杵研碎，或用錘子將其搗為細粉末，每100 mg 組織用1. 2 ml 消化緩沖液懸浮。?3. ?
Northern印跡和總RNA雜交實驗
試劑、試劑盒 甲醛凝膠溶液RNA 電泳緩沖液儀器、耗材 凝膠模梳齒凝膠用具實驗步驟 1. 用肥皂和水徹底清洗凝膠模，梳齒和凝膠用具。2. 準備甲醛凝膠溶液。甲醛凝膠溶液（300 ml 1％ 瓊脂糖凝膠）：瓊脂糖，3.0 g10x RNA 電泳緩沖液，30 ml ? ??Milli-Q 或用玻璃器皿蒸
Northern印跡和總RNA雜交實驗
Northern印跡分析雜交和放射自顯影試劑、試劑盒甲醛凝膠溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?RNA 電泳緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
Northern印跡和總RNA雜交實驗
Northern印跡分析 雜交和放射自顯影 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甲醛凝膠溶液 RNA 電泳緩沖液
植物總RNA的提取實驗技術
一、實驗目的 通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法 二、實驗原理 RNA是一類極易降解的分子，要得到完整的 ?RNA，必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍，可溶解蛋白質，破壞細胞結構，使核蛋白與核酸分離，失活RNA酶，所以RNA從細胞中釋
怎樣從總rna中進行mrna的分離和純化
真核生物的mRNA分子是單順反子，是編碼蛋白質的基因轉錄產物。真核生物的所有蛋白質歸根到底都是mRNA的翻譯產物，因此，高質量mRNA的分離純化是克隆基因、提高cDNA文庫構建效率的決定性因素。哺乳動物平均每個細胞含有約1x10-5?g RNA，理論上認為每克細胞可分離出5～10mg RNA。其中
怎樣從總rna中進行mrna的分離和純化
真核生物的mRNA分子是單順反子，是編碼蛋白質的基因轉錄產物。真核生物的所有蛋白質歸根到底都是mRNA的翻譯產物，因此，高質量mRNA的分離純化是克隆基因、提高cDNA文庫構建效率的決定性因素。哺乳動物平均每個細胞含有約1x10-5?g RNA，理論上認為每克細胞可分離出5～10mg RNA。其中
怎樣從總rna中進行mrna的分離和純化
真核生物的mRNA分子是單順反子，是編碼蛋白質的基因轉錄產物。真核生物的所有蛋白質歸根到底都是mRNA的翻譯產物，因此，高質量mRNA的分離純化是克隆基因、提高cDNA文庫構建效率的決定性因素。哺乳動物平均每個細胞含有約1x10-5?g RNA，理論上認為每克細胞可分離出5～10mg RNA。其中
怎樣從總rna中進行mrna的分離和純化
真核生物的mRNA分子是單順反子，是編碼蛋白質的基因轉錄產物。真核生物的所有蛋白質歸根到底都是mRNA的翻譯產物，因此，高質量mRNA的分離純化是克隆基因、提高cDNA文庫構建效率的決定性因素。哺乳動物平均每個細胞含有約1x10-5?g RNA，理論上認為每克細胞可分離出5～10mg RNA。其中
植物基因組總DNA的分離———SDS法
實驗方法原理SDS(十二烷基磺酸鈉)是一種強去污劑,可使細胞膜及核膜破裂,因此被用來分離DNA。該分離過程的第一步是用熱的去污劑(SDS)進行抽提,然后將抽提物置于0℃并加入高摩爾濃度的乙酸鉀,離心去除不溶物,以去除蛋白和多糖類雜質。實驗材料植物新鮮葉片試劑、試劑盒液氮提取緩沖液(用前加入)20%S
植物基因組總DNA的分離———SDS法
實驗方法原理 SDS(十二烷基磺酸鈉)是一種強去污劑,可使細胞膜及核膜破裂,因此被用來分離DNA。該分離過程的第一步是用熱的去污劑(SDS)進行抽提,然后將抽提物置于0℃并加入高摩爾濃度的乙酸鉀,離心去除不溶物,以去除蛋白和多糖類雜質。實驗材料 植物新鮮葉片試劑、試劑盒 液氮提取緩沖液(用前加入)2
如何從糞便中快速提取基因組DNA
糞便基因組DNA快速提取方法，無抑制物，可直接做PCR。采用硅膠膜技術從新鮮或冷凍人類糞便或其他樣品類型（混有高濃度的PCR抑制劑）中抽提多至30μg 的基因組、細菌、病毒和寄生物DNA。獨特的吸附樹脂配合經優化的緩沖液可去除PCR抑制劑。方便的Aidlab 離心柱純化過程只需40分鐘，用于
從瓊脂糖凝膠(Agaros－gel)中回收DNA片段實驗
實驗原理限制性內切酶切割后的DNA片斷經過電泳后，按分子量大小被分開，排列在瓊脂糖凝膠中，可以將特定的某條DNA帶所在的凝膠切下來，加熱或用特殊的試劑熔解凝膠，使DNA溶回到溶液中，再經過乙醇沉淀或過柱即可獲得目的 DNA酶切片段。實驗試劑1. 電泳緩沖液2. 熒光染料3. 電泳級瓊脂糖粉4. 10
提取的總RNA跑膠從大到小有幾條帶
提取的總RNA跑膠從大到小有帶3條。三條是主帶。哺乳動物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根據分子量和沉降系數的不同，rRNA又可分為28s, 18s 和5.8s 的rRNA。從RNA的含量上看，rRNA是幾種RNA中最多的，高達90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
提取的總RNA跑膠從大到小有幾條帶
提取的總RNA跑膠從大到小有帶3條。三條是主帶。哺乳動物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根據分子量和沉降系數的不同，rRNA又可分為28s, 18s 和5.8s 的rRNA。從RNA的含量上看，rRNA是幾種RNA中最多的，高達90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他
提取的總RNA跑膠從大到小有幾條帶
提取的總RNA跑膠從大到小有帶3條。三條是主帶。哺乳動物的RNA包括mRNA，rRNA，tRNA和du小RNA，根據分子量和沉降系數的不同，rRNA又可分為28s, 18s 和5.8s 的rRNA。從RNA的含量上看，rRNA是幾種RNA中最多的，高達90%以上，而mRNA很少，只有1-2%，而其他