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  • 從總RNA中除去基因組DNA實驗

    試劑、試劑盒 變性(甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇 甲醛MOPS 緩沖液乙二胺四乙酸MOPS乙酸鈉酚 氯仿(3:1) 溶液氯仿液體酚Tris-HCl電泳緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭離心管配膠板微波爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑變性(甲醛)瓊脂糖凝膠(配制過程見第 18步)1g瓊脂糖83 ml 蒸餾水12.3mol/L甲醛蒸餾水乙醇,100%乙醇(70%), 用 DEPC 處理過的 H20 配制12.3mol/L(37%) 甲醛,pH>4.010XMOPS 緩沖液0.01mol/L 乙二胺四乙酸(EDTA)0.2mol/LMOPS0.05mol/L 乙酸鈉酚/氯仿(3:1) 溶液10 ml 氯仿30 ml 液體酚10 mlTris-HCl,pH7.0電泳緩沖液(見第18f. 步)10 ml10XMOPS用 900 ml 蒸餾水,稀釋到 1X 濃度2. 核酸和寡核苷酸來自方案 1......閱讀全文

    從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗

    為了進行 FDD 基因表達的分析,以及使用任何其他基于 RNA 的基因表達技術,在反轉錄合成單鏈 cDNA 和后續的 PCR 操作之前,必須除掉污染的基因組 DNA。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒變性(甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇甲醛MOPS

    從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗

    試劑、試劑盒?變性(甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇 甲醛MOPS 緩沖液乙二胺四乙酸MOPS乙酸鈉酚 氯仿(3:1) 溶液氯仿液體酚Tris-HCl電泳緩沖液儀器、耗材?離心機和轉頭離心管配膠板微波爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑變性(甲醛)瓊脂糖凝膠(配制過程見第 18步)

    從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗

    從總 RNA 中除去基因組 DNA 實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 變性(甲醛)瓊脂糖凝膠 瓊脂糖 蒸餾

    動物肝DNA提取實驗中除去RNA的試劑

    對于動物DNA/RNA提取實驗有一些經驗,希望我的回答可以幫到你。在動物肝DNA提取實驗中,通常采用的試劑是三氯醋酸(Trizol)試劑。這個試劑是一種廣泛應用于RNA和DNA提取的試劑,可以有效地提取RNA和DNA,且不會相互干擾。在使用Trizol試劑進行DNA提取時,可以通過調整實驗步驟和加入

    純化RNA實驗——從組織中純化總RNA

    實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織,直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織(0.05~0.3 g)在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿,混合均勻,冰浴 15 分鐘

    用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 實驗材料 DNA

    用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗

    欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsC

    用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗

    實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材 透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,水飽和的異戊醇或

    純化RNA實驗——從培養的細胞中純化總RNA

    實驗材料細胞試劑、試劑盒RNA 提取緩沖液變性液水飽和酚儀器、耗材培養皿Falcon 2063 管實驗步驟1. 取 1 個細胞已長滿的 100 ml 培養皿,吸出培養液,加 2 ml RNA 提取緩沖液,用橡膠刮棒刮下細胞。RNA 提取緩沖液:變性液,20 mlβ-巰基乙醇,0.144 ml2 mo

    植物基因組DNA及總RNA提取技術2

    (二)植物總RNA提取?(1)65°C水浴中預熱15 mL CTAB提取液。?(2)液氮中研磨2~3 g新鮮或-70°C冷凍的材料。?(3)轉移樣品至有CTAB提取液的離心管中,立即激烈渦旋30s,短時放回 65°C水浴中(4~5 min)。?(4)加入等體積的氯仿/異戊醇并渦旋混合,10000 r

    植物基因組DNA及總RNA提取技術1

    幼嫩組織的細胞處于旺盛的分裂階段,核較大而胞質較少,核酸濃度高,且內含物少、次生代謝產物少,蛋白質及多糖類物質相對較少,在SDS或 CTAB物質存在時,經機械研磨,使細胞破裂并釋放出內含物,提取的DNA、RNA的產量高,純度好。?提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要高壓滅菌以滅活DNase。R

    怎樣從總RNA中提取mRNA

    大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高

    怎樣從總RNA中提取mRNA

    大多數真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(OligoT)可以與之配對結合,這就是提取mRNA最基本的原理。具體到實驗手段上,現在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用。磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠(生物素和親和素間具有高

    從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA

    試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸鈉 苯酚 無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖液 TE 緩沖液 SEVAG 漂白劑(Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蠅勻漿緩沖液實驗步驟 一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/

    從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH ?乙醇 ?3mol L 乙酸鈉 ? 苯酚 ?無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖

    總RNA提取實驗

    實驗方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸鈉的聯合使用,將促使核蛋白復合體的解離,使RNA 與蛋白質分離,并將RNA 釋放到溶液中。而進一步從復合體中純化RNA ,則根據Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法進行,采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚將使RNA 進入水相

    總RNA提取實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒,可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑,異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇,加上整個操作都在冰浴下進行,這樣就能顯著降低RNA 的

    從全血中純化基因組-DNA-實驗方法

    試劑、試劑盒 乙醇異丙醇RNA 酶 A全血儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳離心管Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇,70%,室溫異丙醇, 室溫RNA 酶 A將 RNA 酶 A 溶解于 DNA 再水合液中至終濃度為 4 mg/ml, 煮沸 10min 以去

    從全血中純化基因組-DNA-實驗方法

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 異丙醇 RNA 酶 A 全血 儀器、耗材 瓊脂糖凝膠電泳

    從全血中純化基因組-DNA-實驗方法

    用于從全血(10 ml) 中分離基因組 DNA 的 Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒建立在一個四步程序基礎上的。純化程序的第一步包括血紅細胞的裂解、可溶部分的棄除,隨后是白細胞及其細胞核的裂解。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇異丙醇RNA 酶 A

    利用-Trizol-從植物組織中制備-RNA-實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗材料 植物組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇

    利用-Trizol-從植物組織中制備-RNA-實驗

    下述方案是經修改過的 Trizol 方案,用于從植物組織中分離 RNA,其中增加了一個高鹽異丙酵沉淀步驟,以選擇性地沉淀 RNA,而將多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態

    利用-Trizol-從植物組織中制備-RNA-實驗

    實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態N2NaCl檸檬酸鈉儀器、耗材 轉子-定子均化器研缽和杵圓錐形管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 處理過的水配制DEPC 處

    2.3.1-從果蠅胚胎中提取總-RNA-或-poIy(A)-+RNA

    試劑、試劑盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸鈉苯酚無 SDS 的結合緩沖液含 SDS 的結合緩沖液TE 緩沖液SEVAG漂白劑(Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蠅勻漿緩沖液實驗步驟一 材料與設備1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/

    細菌中制備基因組DNA實驗

    實驗方法原理?提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質,得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。實驗材料?細菌試劑、試劑盒?TE氯化銫溴化乙錠NaCl乙醇CTAB儀器、耗材?離心機搖床實驗步驟 1

    細菌中制備基因組DNA實驗

    小量制備 氯化銫法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿

    利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 β-巰基乙醇 儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Ra

    利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗

    由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可從各種樣品中提取 RNA,且產量和質量非常穩定。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材轉子-定子均化器或類似設備Marligen Rap

    利用-Marligen-總-RNA-快速純化系統純化總-RNA-實驗

    試劑、試劑盒 乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Rapid Total RNA System實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑乙醇,70%和100%β-巰基乙醇2.特殊設備轉子-定子均化器或類似設備3.其他Marligen Rapid Total RNA

    總RNA提取實驗步驟

    一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?(1)發酵3~4天(或對數生長期)的菌體,離心收集菌絲體(動植物材料無需此步處理)。?(2)用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次,并盡量除去殘存的水。?(3)加液氮充分研磨,使其成為粉末,以釋放RNA。?(4)研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。

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