核酸電泳（RNA電泳與DNA電泳）
（一）DNA的凝膠電泳：凝膠電泳是分子克隆的中心技術之一。瓊脂糖凝膠用于分離大于200～1000bp的片段;操作簡單、快速，且分離范圍廣，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝膠用于分離5－500bp的片段; 效果好、分辨率極高，相差1bp的DNA片斷就能分開，能容納相對大量的DNA ，用于核苷酸多態性的分析。瓊脂糖凝膠電泳的基本過程材料：電泳緩沖液（常用TAE或TBE）、電泳級瓊脂糖、溴化乙錠溶液（核酸顯示劑）、加樣緩沖液（保證核酸不在加樣孔中擴散和用于電泳時間的指示系統）、水平凝膠電泳裝置及制膠系統、直流電源系統。基本過程：制膠→放入電泳槽中并加入電泳緩沖液→取出梳子→將適量的核酸樣品和上樣緩沖液混合并上樣于加樣孔中→一定電壓條件下電泳→合適的時間后停止電泳→取出凝膠進行溴化乙錠染色→凝膠成像系統紫外燈下觀察并照相保存結果注意：溴化乙錠具有致癌性，操作時要帶手套；不同濃度瓊脂糖的凝膠分離范圍；影響DNA在凝膠中遷移速率的因素：1、DNA......閱讀全文
核酸電泳（RNA電泳與DNA電泳）
（一）DNA的凝膠電泳：凝膠電泳是分子克隆的中心技術之一。瓊脂糖凝膠用于分離大于200～1000bp的片段;操作簡單、快速，且分離范圍廣，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝膠用于分離5－500bp的片段; 效果好、分辨率極高，相差1bp的DNA片斷就能分開，能容納相對大量的DNA ，用于核苷酸多態性的分析。
DNA瓊脂糖核酸電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。核酸電泳是進行核酸研究的重要手段，是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所不可或缺的組成部分。核酸電泳通常 在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行，濃度不同的瓊脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子篩網
DNA瓊脂糖核酸電泳
1. 用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上，封閉模具邊緣，架好梳子；2. 根據欲分離 DNA 片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠：準確稱量瓊脂糖干粉，加入到配膠用的三角燒瓶內，定量加入電泳緩沖液（一般20~30 ml） ；3. 放入到微波爐內加熱熔化。冷卻片刻，加入一滴熒光染料
DNA瓊脂糖核酸電泳
核酸電泳是進行核酸研究的重要手段，可以用于：（1）核酸探針；（2）核酸擴增；（3）序列分析等技術。實驗方法原理帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。核酸電泳是進行核酸研究的重要手段，是核酸探針、核酸擴增和序列分析等技術所不可或缺的組成部分。核酸電泳通常 在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進行，濃度不同
RNA電泳
RNA Gel (Crawford Lab)Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.Northern Gel and ?TransferUsing glyoxal
RNA電泳
·?????????RNA Gel?(Crawford Lab)·?????????Gel Electrophoresis of RNA?(Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.?·?????????Northern
RNA－電泳
①電泳RNA 所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %瓊脂糖凝膠,倒膠時溴化乙錠(E直接加入凝膠中。③制備好的瓊脂糖凝膠板放入電泳槽后再加入經高壓滅菌過的1XTBE ,液面只能剛好同膠面平齊,緩沖液不要淹過膠面。④點樣
核酸的電泳與檢測
【實驗目的】（1）了解核酸瓊脂糖凝膠電泳的原理，學會其具體的操作程序。（2）對提取的DNA進行檢測，掌握紫外電泳圖譜的觀察分析方法。【實驗原理】瓊脂糖凝膠電泳是一種非常簡便、快速、最常用的分離純化和鑒定核酸的方法。帶電荷的物質在電場中的定向運動稱為電泳，核酸分子是兩性解離分子，在pH8.0時，DNA
DNA電泳
DNA電泳（主要內容如下）??Preparation of Agarose Gel and Electrophoresis??Extraction of DNA From Agarose Gel??Extraction of DNA from Acrylamide Gels??DNA Marker?
電泳技術RNA電泳操作步驟
試劑： 瓊脂糖（Agarose）、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制（0.1 M MOPS pH7； 5mM EDTA； 10mM NaAc） 1. 稱量20.9g的MOPS，置于1L燒杯中。 2. 加700mL
核酸電泳實驗
瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標準方法。該技術操作簡便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度離心法）所無法分離的DNA片段。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶EB（德元國際Cat# LY5009）染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外
分子克隆常用技術簡介（核酸純化、濃縮、電泳和DNA、RNA的...
分子克隆常用技術簡介（核酸純化、濃縮、電泳和DNA、RNA的定量）一、核酸的純化在分子克隆的所有操作中，最基本的操作是核酸的純化。其關鍵步驟是去蛋白質，通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每當需要把克隆有某一些所用的酶滅活或去除以便進行下一步時，可進行這種抽提。然而，如要從細胞裂解液等復雜的
RNA電泳操作步驟
試劑:?瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 ?步驟?一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc)?1、稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。?2. 加700mL DEPC水溶解
RNA電泳鑒定步驟
? ? 一，準備工作? ? 1，實驗器具與材料:? ? (1)移液槍:10ul? ? (2)吸頭:20ul? ? (3)吸頭臺:放置 200ul 和 20ul 的吸頭一個 (4)三角燒瓶:50ml 一個? ? (5)瓊脂糖 2，實驗器具的處理與準備? ? (1) 塑料制品:(包括吸頭等)? ? 送至
關于核酸電泳—瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳介紹
(1) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—用透明膠將玻璃板或電泳裝置所配備的塑料盤的邊緣圈封，制成膠模，置水平工作臺上； (2) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—稱取適量瓊脂糖，置電泳緩沖液中，加熱使瓊脂糖溶解； (3) 瓊脂糖凝膠電泳凝膠的制備和電泳—待溶液冷至60℃，加入10mg/ml E
DNA電泳（agarose膠）
DNA瓊脂糖凝膠電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場
質粒DNA電泳鑒定
1．目的學會常用的DNA瓊脂糖凝膠電泳。2．原理DNA雙螺旋分子骨架兩側帶有含負電荷的磷酸根，在電場中會向正極方向移動。不同長度的DNA由于受到凝膠介質的阻力不同，表現為不同的遷移率而被分開。3．器材電泳儀，水平凝膠電泳槽和梳子及其制膠模塊，250ml三角瓶，微波爐，臺式離心機，旋渦混合器，凝膠成像
DNA電泳（agarose膠）
實驗材料?DNA樣品試劑、試劑盒?瓊脂糖 電泳緩沖液溴化乙錠 上樣緩沖液儀器、耗材?電泳儀電泳漕 透射紫外燈 膠帶紙 紫外成像儀
DNA電泳（agarose膠）
DNA電泳可用于：（1）分離不同大小的DNA片段；（2）鑒定目的DNA片段；（3）純化和回收DNA片段。實驗方法原理利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場中向正極移動，且相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，能以
質粒DNA的提取與電泳鑒定
質粒DNA的提取是從事基因工程工作中的一項基本實驗技術，但提取方法有很多種，以下介紹一種最常用的方法： 堿裂解法：此方法適用于小量質粒DNA的提取，提取的質粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。方法如下： 1、接1%含質粒的大腸桿菌細胞于2ml?LB培養基。 2、37℃振蕩培養過夜。 3
質粒DNA的提取與電泳鑒定
質粒DNA的提取是從事基因工程工作中的一項基本實驗技術，但提取方法有很多種，以下介紹一種最常用的方法：堿裂解法：此方法適用于小量質粒DNA的提取，提取的質粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。方法如下：1、接1%含質粒的大腸桿菌細胞于2mlLB培養基。2、37℃振蕩培養過夜。3、取1.5
核酸電泳儀類型
核酸電泳儀類型有多種。1、按分離目的可分：實驗室核酸電泳儀和工業核酸電泳儀。2、按分離裝置可分：核酸毛細管電泳儀和核酸芯片電泳儀等。3、按分離規模可分：微型核酸電泳儀、小型核酸電泳儀和大型核酸電泳儀。4、按分離裝置數量可分：核酸一維電泳儀和核酸陣列電泳儀等。5、按靈敏性可分：微量核酸電泳儀和痕量核酸
核酸電泳儀類型
?核酸電泳儀類型有多種。1、按分離目的可分：實驗室核酸電泳儀和工業核酸電泳儀。2、按分離裝置可分：核酸毛細管電泳儀和核酸芯片電泳儀等。3、按分離規模可分：微型核酸電泳儀、小型核酸電泳儀和大型核酸電泳儀。4、按分離裝置數量可分：核酸一維電泳儀和核酸陣列電泳儀等。5、按靈敏性可分：微量核酸電泳儀和痕量核
核酸凝膠電泳1
核酸是帶均勻負電荷的分子，在電場中向正極移動，不同大小和構象的核酸分子的電荷密度大致相同，在自由泳動時，各核酸分子的遷移率區別很小，難以分開。以適當濃度的凝膠介質作為電泳支持介質，具有分子篩效應，使得分子大小和構象不同的核酸分子泳動率出現較大差異，達到分離的目的。此為分離、鑒定、純化核酸片段的標準方
核酸凝膠電泳4
5、室溫下聚合至少30min，若聚合完全，梳齒下可見二條折光線，小心拔出梳子，用水沖洗樣品孔。6、在電泳槽中加入1×TBE緩沖液，使緩沖液覆蓋樣品孔，并用緩沖液稍淋洗樣品孔。7、加上1/6體積6×上樣緩沖液與DNA樣品及DNA分子量標準液中混合，用微量進樣器吸取，小心快速地加入加樣孔中（一般加樣量3
核酸凝膠電泳2
二、核酸電泳的指示劑與染色劑【指示劑】電泳過程中，常使用一種有顏色的標記物以指示樣品的遷移過程，核酸電泳常用的指示劑有兩種：溴酚蘭，呈藍紫色；二甲苯青，呈藍色。溴酚藍分子量為670道爾頓，在不同溶液凝膠中，遷移速度基本相同，其分子篩效應小，近似自由電泳。在0.6%、1%、2%的瓊脂糖凝膠電泳中，溴酚
核酸凝膠電泳3
3、電泳：電壓＜10V/cm，電泳至溴酚蘭移出樣品槽到凝膠板的2/3距離時，關閉電源。4、取出凝膠塊，置紫外透射反射分析儀上觀察，即可見桔紅的DNA區帶。【注意事項】1、加樣時槍頭不要碰壞孔壁，否則DNA帶型不整齊。大多情況下，加樣時不必更換槍頭，可在陰極槽中反復吸打電泳緩沖液清洗，但對Southe
RNA電泳實驗方法
Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE)for use withRibonuclease Protection Assay (RPA):1. Making the Gel:? 5% Denaturing gel for Ribonuclease Protec
RNA甲醛變性膠電泳
提取樣品的總RNA后，一般根據RNA的凝膠電泳圖來判斷RNA的質量。由于RNA容易形成二級結構，因此常用甲醛變性膠來進行RNA電泳，得到的電泳圖能真實反映RNA的質量狀況。一、試劑：DEPC（Sigma公司產品），MOPs（Bocherigmer公司產品），甲酰胺（Formamide，Sigma公司
rna電泳實驗的目的
可以參考如何做RNA電泳實驗，RNA容易降解所以操作中有很多要注意的細節。。。實驗基本原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是
