動植物組織總RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻葉片或小鼠肝組織。 二、設備 研缽，冷凍臺式高速離心機，低溫冰箱，冷凍真空干燥器，紫外檢測儀，電泳儀，電泳槽。 三、試劑 1、無RNA酶滅菌水：用將高溫烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小時）裝蒸餾水，然后加入0.01%的DEPC（體積/體積），處理過夜后高壓滅菌。 2、75%乙醇：用DEPC處理水配制75%乙醇，（用高溫滅菌器皿配制），然后裝入高溫烘烤的玻璃瓶中，存放于低溫冰箱。 3、1×層析柱加樣緩沖液；20mmol/L Tris·Cl(pH7.6)，0.5mol/L NaCl，1mmol/L EDTA(pH8.0)，0.1% SDS。 4、洗脫緩沖液：10mmol/L Tris·Cl (pH7.6)，1mmol/L EDTA (pH8.0)，0.05% SDS。 四、操作步驟 （一）動植物總RNA......閱讀全文
動植物組織總RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻葉片或小鼠肝組織。 二、設備 研缽，冷凍臺式高速離心機，低溫冰箱，冷凍真空干燥器，紫外檢測儀，電泳儀，電泳槽。 ? ?三、試劑 1、無RNA酶滅菌水：用將高溫烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小時）裝蒸餾水，然后加入0.01%的DEPC（體積/體積），處理過夜后高
植物組織總RNA的提取
實驗概要由于RNA分子的結構特點，容易受RNA酶的攻擊反應而降解，加上RNA酶極為穩定且廣泛存在，因而在提取過程中要嚴格防止RNA酶的污染，并設法抑制其活性，這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA酶，人的皮膚、手指、試劑、容器等均可能被污染，因此全部實驗過程中均需戴手套操作并經常更換（使用一
提取動物關節軟骨組織總RNA
實驗目的???????研磨破碎軟骨組織（大鼠膝關節軟骨），提取其總RNA。?實驗原理???????充分磨碎軟骨樣品（大鼠膝關節軟骨），再用相關試劑提取其總RNA。?實驗材料和器具樣品：大鼠膝關節軟骨儀器：多樣品組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-24）耗材：研磨罐（上海凈信，***ml），
TRIzol法提取組織和細胞總RNA
（一）試劑準備1 ． TRIzol 試劑。2 ．氯仿3 ．異丙醇4 ． 75% 乙醇（ DEPC H2O 配制）5 ． DEPC H2O （二）操作步驟 1 ． 樣品處理： （１）培養細胞：收獲細胞 1-5×10 7 ，移入 1.5ml 離心管中，加入 1ml Trizol ，混勻，室溫
總RNA提取（Trizol提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml
總RNA的提取
?完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地將ＲＮ
總RNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒，可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑，異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇，加上整個操作都在冰浴下進行，這樣就能顯著降低RNA 的
總RNA提取實驗
實驗方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸鈉的聯合使用，將促使核蛋白復合體的解離，使RNA 與蛋白質分離，并將RNA 釋放到溶液中。而進一步從復合體中純化RNA ，則根據Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法進行，采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚將使RNA 進入水相
總RNA的提取
完整RNA 的提取和純化，是進行RNA 方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA 分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
動植物組織mRNA提取實驗方法
一、材料? 水稻葉片或小鼠肝組織。? 二、設備? 研缽，冷凍臺式高速離心機，低溫冰箱，冷凍真空干燥器，紫外檢測儀，電泳儀，電泳槽。 三、試劑? 1、無RNA酶滅菌水：用將高溫烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小時）裝蒸餾水，然后加入0.01%的DEPC（體積/體積），處理過夜后高壓滅菌。? 2、
總RNA的提取（Trizol法提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時，每50～100mg組織用1ml
小麥總RNA的提取
實驗概要從黃化小麥苗中提取總RNA，可以為cDNA文庫的構建做好準備。實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃
細胞總RNA的提取
提取細胞RNA的步驟：1)??六孔板每孔細胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，槍頭吹打。2)??將各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振搖15s。15－30℃下孵育2-3min，離心（4℃，12，000g，15min）。3)??離心后液體分為三層（上層－無色
樣品總RNA的提取
實驗概要本實驗介紹了樣品總RNA的提取方法。完整RNA的提取和純化，是進行RNA方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點，即：樣品細胞或組織的有效破碎；有效地使核蛋白復合體變性；對內源RNA酶的
總RNA提取實驗步驟
一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?（1）發酵3~4天（或對數生長期）的菌體，離心收集菌絲體（動植物材料無需此步處理）。?（2）用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次，并盡量除去殘存的水。?（3）加液氮充分研磨，使其成為粉末，以釋放RNA。?（4）研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。
小麥總RNA的提取
實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉入已準備好的離心管中，劇烈震蕩。
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織?目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
多糖多酚植物總RNA快速提取試劑提取水稻胚乳總RNA
實驗概要采用TAKARA的試劑提取水稻胚乳，主要是后期的胚乳RNA量偏少，不易提取！實驗步驟1. 稱量100mg的新鮮或者超低溫凍結的植物RNA提取樣品，迅速轉移至用液氮預冷的研缽中，用研杵研磨組織，其間不斷加入液氮，直至研磨成粉末狀。2. 向研缽中加入1000μL RNAiso-mate for
組織RNA提取方法介紹
1. 最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0~4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后加入一定量的TRIZOL試劑，
組織/細胞RNA快速提取
?操作步驟：（實驗前請先閱讀注意事項）提示：??第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇!??操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巰基乙醇。此裂解液最好現用現配。配好的RLT 4℃可放置一個月。1.?組織培養細胞a.?收
植物總RNA的提取規程
一、實驗目的掌握植物總RNA提取的原理和方法二、實驗原理RNA的提取：破壞細胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去鹽離子。RNase是一類生物活性極其穩定的酶類，能耐高溫、耐酸、耐堿，高壓滅菌處理也不能使其完全失活。在提取RNA實驗中，要盡量抑制RNase的活性。?DEPC（焦磷酸二乙酯）是很強的RNas
總細胞RNA的提取方法
實驗概要總細胞RNA的提取在建庫過程中，由于cDNA合成這一步將使用通用引物oligo dT，因此在總RNA提取這一步中，提取純化mRNA不是非常必要的。提取高純度的總細胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板，目前提取RNA的方法很多，也有不少商業化的試劑盒。實驗步驟1. TRIZOL法?? 1)
總RNA提取實驗——CsCl法
實驗材料RNA試劑、試劑盒PBS異硫氰酸胍CsClDEPC無水乙醇儀器、耗材注射器電泳儀離心機培養箱實驗步驟一、 用于單層培養細胞?1. ?室溫下用PBS冼滌細胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. ?在不超過108細胞中加入異硫氰酸胍溶液，并使之遍布整個平皿。3. ?用橡皮細胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
小麥總RNA的提取方法
實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉入已準備好的離心管中，劇烈震蕩。
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN
動物RNA提取實驗——SV總RNA試劑盒提取法
動物RNA提取可用于：（1）研究生物體基因調控機制；（2）分子克隆和基因表達以獲得該性狀基因；（3）可以對特定的基因表達進行定量的檢測，從分子水平精確的了解細胞生命活動的規律。實驗方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 總RNA 純化系統)可在1小時內從組織、培養