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    細胞凋亡實驗

    細胞凋亡(Apoptosis) 又稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指細胞基因調控的一種自主性的自殺現象。即是在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,自主結束生命的死亡方式。凋亡一詞最早是由年澳大利亞組織病理學家John Kerr通過研究大鼠肝左葉細胞死亡時,于1972首先提出的。凋亡與壞死的形態特征不同,拿凋亡研究比較清楚的動物細胞來講,壞死細胞首先表現為胞膜通透性增加,細胞外形發生不規變化;內質網擴張;核染色質不規則位移;線粒體及胞核腫脹;溶酶體破壞;胞膜破裂胞漿外溢;最后被巨噬細胞吞噬。細胞壞死常引起周圍炎癥反應。而凋亡細胞形態變化為:細胞變圓,與鄰周細胞脫離;胞膜表面微絨毛減少或者消失;核質固縮(Condensation),邊移(Margination);胞漿堅實(Compactness);細胞器集中(Squeeze);胞膜芽生(Bud);凋亡小體 (Apoptotic-b......閱讀全文

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用

    細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用

      細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞

    六種染色后光鏡觀察法檢測肝癌細胞凋亡

    作者:楊連君,司曉輝,王文亮,王文勇,趙一嶺,方正清[摘  要] 目的:探討簡便易行的在光鏡下通過形態學觀察檢測細胞凋亡的方法,并對其進行比較。方法:首先用6%的乙醇作用6 h誘導人肝細胞癌細胞系HCC9204細胞凋亡,然后進行未固定細胞的臺盼藍染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染色,

    細胞凋亡及其檢測技術-1

    細胞凋亡又稱程序性細胞死亡(PCD),是細胞衰老自然死亡的主要方式之一,在機體中承擔著重要的調控作用。它不僅在維持細胞群體數量的穩定、胚胎發育和免疫系統的克隆選擇方面,而且在腫瘤發生、發展、抗腫瘤藥物的治療等方面具有十分重要的作用。細胞凋亡是由基因編程控制的細胞主動參與的自殺過程沒事一種生理性調節機

    檢測細胞凋亡的實驗方法比較-2

    二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面(細胞膜)的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍,又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種,以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用(二)

    C.起源于細胞核的凋亡信號及HSP的調控 細胞核內DNA的斷裂是細胞凋亡的一種生化特征,是由于特異的核酸內切酶活化后將染色質切割成較短的DNA片段。但是,DNA的損傷也可能是一個細胞凋亡級聯反應的早期信號轉導事件,經研究認為:當DNA發生斷裂后,組蛋白H1.2轉運至細胞質,通過激活Bcl-2蛋白-B

    熱休克蛋白HSP對細胞凋亡的調節作用(一)

    細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導,其中熱休克蛋白(熱激蛋白)是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫,并且根據脅迫程度的強弱,利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫,或主動誘發細胞死亡

    細胞凋亡實驗操作細則

    一、實驗目的: 1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事

    流式細胞儀之細胞凋亡檢測的PI雙染色法

    流式細胞儀是檢測懸浮的單細胞或微粒的信號分析技術,被譽為實驗室的“CT”,可用于細胞凋亡檢測 、細胞分選、單細胞內細胞因子表達分析等。這里簡單介紹下流式細胞儀檢測細胞凋亡的兩種方法。第一部分 流式細胞儀 檢測細胞凋亡:Heochst 33342/PI雙染色法一、基本原理

    細胞凋亡檢測(Annexin-V-FITC 單染法)-2

    2 熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細胞核染色質的形態學改變為指標來評判細胞凋亡的進展情況。常用的DNA 特異性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三種染料與 DNA 的結合是非嵌入式的,主要結合在DNA 的A

    細胞凋亡實驗步驟及注意事項

    一、實驗目的1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序

    凋亡細胞核DNA片段檢測方法進展(一)

    摘  要:當今生物學領域的研究一個熱點之一是細胞凋亡。開展對細胞凋亡的研究,首先要解決是方法學問題。作者從凋亡細胞的特征性核DNA片段檢測著手,闡述了多種凋亡細胞核DNA片段檢測方法以及近年來的一些新進展。細胞凋亡(apoptosis)又稱細胞凋謝或稱程序性細胞死亡(Programmed

    雙氧水誘導腫瘤細胞凋亡——雙氧水誘導法

    實驗材料Hela細胞系試劑、試劑盒DMEM培養基生理鹽水臺盼藍染色液DAPI染料青霉素鏈霉素Rnase A硫酸亞鐵儀器、耗材普通光學顯微鏡熒光顯微鏡載玻片蓋玻片細胞培養瓶電泳儀高速離心機超凈工作臺二氧化碳培養箱恒溫水浴鍋細胞記數器1. 實驗目的通過實驗了解細胞凋亡的一般過程和形態特征,了解誘導細胞凋

    Bcl-2與細胞凋亡

    摘要 Bcl-2基因是一原癌基因,能抑制細胞凋亡。但近年研究發現,存在有Bcl-2敏感和不敏感的細胞凋亡現象。Bcl-2抑制細胞調亡的機制目前仍然不清,大多認為與Bcl-2的細胞內抗氧化作用及抑制鈣離子的跨膜運動有關。最近,Reed提出Bcl-2具有離子通道蛋白和吸附/錨定蛋白的雙重特性,并闡述

    高內涵成像技術在網絡集成式細胞內特征的......(二)

                   圖3 單細胞耗氧率動態代謝檢測及分析 一步染色法檢測細胞對藥物的敏感性 應用ImageXpress?

    Bcl-2與細胞凋亡

    摘要 Bcl-2基因是一原癌基因,能抑制細胞凋亡。但近年研究發現,存在有Bcl-2敏感和不敏感的細胞凋亡現象。Bcl-2抑制細胞調亡的機制目前仍然不清,大多認為與Bcl-2的細胞內抗氧化作用及抑制鈣離子的跨膜運動有關。最近,Reed提出Bcl-2具有離子通道蛋白和吸附/錨定蛋白的雙重特性,并闡述

    Annexin V 與細胞凋亡的不解之緣

    細胞凋亡(Apoptosis)或程序性細胞死亡(Programmed Cell Death)是指細胞為了清除自身不需要的和失去功能細胞的一種高級調控過程。凋亡可以發生在細胞生長、衰老、免疫反應或者當細胞受到疾病和毒害因素的破壞,例如放射性藥物和化學化療等的過程中。凋亡細胞會產生諸

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗

    實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變zui具特征性,主要包括以下幾個方面:1. 細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗

    實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變最具特征性,主要包括以下幾個方面: 1.  細胞核的改變 由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色

    細胞凋亡檢測(Annexin-V-FITC 單染法)-1

    一、實驗原理細胞凋亡或稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是細胞的生命現象之一,它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關,自身免疫性疾病和腫

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗

    PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法             實驗方法原理

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗

    PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法             實驗方法原理

    流式細胞儀檢測細胞凋亡――Heochst 33342/PI雙染色法

    基本原理  經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據

    利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡

    一、基本原理流式細胞儀檢測細胞凋亡:PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等,其中細胞核的改變zui具特征性,主要包括以下幾個方面:1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變,造成各種染色

    流式細胞儀檢測細胞凋亡——Heochst 33342/PI雙染色法

    基本原理  經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗——Heochst 33342/PI雙染色法

    實驗方法原理流式細胞儀通常根據細胞膜完整性將細胞分為“活細胞”和“死細胞”,因此正常細胞和凋亡細胞歸為活細胞。活細胞染料如Hoechst 33342能少許進入正常細胞膜而對細胞沒有太大得細胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡細胞中的熒光強度要比正常細胞中要高,Hoechst 33342在凋亡細

    流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗-Heochst 33342/PI雙染色法

    實驗方法原理流式細胞儀通常根據細胞膜完整性將細胞分為“活細胞”和“死細胞”,因此正常細胞和凋亡細胞歸為活細胞。活細胞染料如Hoechst 33342能少許進入正常細胞膜而對細胞沒有太大得細胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡細胞中的熒光強度要比正常細胞中要高,Hoechst 33342在凋亡細

    流式細胞儀檢測細胞凋亡——Heochst 33342/PI雙染色

    基本原理  經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據

    流式細胞儀檢測細胞凋亡(雙染色法)

    一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據

    細胞凋亡形態學檢測與觀察

    hoechst33258染色,他們認為細胞發生凋亡時,染色質會固縮。 所以Hoechst染色時,細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。正常細胞核刺激后有致密濃染的凋亡細胞  AO-EB染色法:The image below shows human lymphoma cells

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