ELISA方法檢測IFNα的表達
實驗概要ELISA方法檢測IFN-α的表達并根據標準曲線定量。主要試劑 Human IFN-α標準品實驗步驟1. 建立標準曲線:將500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg/ml,7.8 pg/ml,0 pg/ml的標準品各0.1ml依次加入一排8孔中,每個標準品均做復孔。2. 加樣:樣品孔加細胞培養上清,100μl/孔,輕輕混勻30s,每個樣品均做復孔。3. 37°C反應90min,甩去板內的液體,用1×洗滌液洗滌反應板(每孔內加入350μl洗滌液),并去除水滴;反復洗滌5次,每次均需拍干。4. 將準備好的1×Biotin工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37°C反應60min。5. 甩盡板內液體,用1×洗滌液洗滌反應板(每孔內加入350μl洗滌液),并取出水滴;反復洗滌5次,每次均需拍干。6. 將準備好的1×HRP工作液按每孔0.......閱讀全文
雞γELISA試劑盒干擾素(IFNγ)酶聯免疫分析
雞γELISA試劑盒干擾素(IFN-γ)酶聯免疫分析實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的雞γ干擾素(IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素(IFN-γ)再與HRP標記的γ干擾素(IFN-γ)抗體結合,形成抗體-抗原-酶
你的ELISA試劑盒比色結果的表達方法對了嗎
比色效果的表達以往通用光密度(oplical density,OD),現按規則用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。通常的標明方法是,將吸收波長寫于A字母的右下角,如OPD的吸收波長為492nm,標明方法為"A492nm"或"OD492nm"。酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指專用于測讀
檢測表達的重組蛋白質的方法
檢測表達的重組蛋白質的檢測方法有,首先采用DNA分子雜交技術,找到目的基因。其次檢測目的基因是否轉錄出了mRNA,最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質,進行抗原抗體雜交。
水貂γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒使用說明書
水貂γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒固體樣本的收集 步驟1、組織標本:切割標本后,稱取 1g 組織,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清。分裝一 份待檢測,其余冷凍備用,保存
大鼠干擾素b?(IFN?b)ELISA試劑盒使用說明
原理本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 IFN-b 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 IFN-b與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠IFN-b,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,最后加終止液硫酸,在450n
ELISA檢測方法的原理及其優缺點
1.直接法(directelisa)將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。優勢:操作手續簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。2.間接法(indirectelisa)此測
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法
材料與方法⒈材料人肝癌細胞系HepG2由中國醫科大學科學實驗中心保存。DMEM培養基和胎牛血清購自BioInd公司。細胞轉染試劑Lipofectamine 3000和Trizol購自Invitrogen公司。BDNF AS質粒、BDNF AS與BDNF基因完全互補序列缺失突變質粒以及空載體質
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法!
檢測肝癌細胞基因表達的實驗方法! 材料與方法 ⒈材料 人肝癌細胞系HepG2由中國醫科大學科學實驗中心保存。DMEM培養基和胎牛血清購自BioInd公司。細胞轉染試劑Lipofectamine 3000和Trizol購自Invitrogen公司。BDNF AS質粒、BDN
ELISA檢測方法分哪幾種
雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37
貓α干擾素(IFNα)elisa免疫組化試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再
雞干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒操作注意事項及保存
操作注意事項:1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使
人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)酶聯檢測分析ELISA使用...
使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)含量。試驗原理:TECK/CCL25試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知TECK/CCL25濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TECK/CCL25和生物素標記的抗體同
部分ELISA試劑盒樣本的檢測方法
ELISA試劑盒通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培育上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步。1、血漿ELISA試劑盒用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標本,標本收集后30min
提高ELISA試劑盒檢測質量的方法
ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在實驗上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。 1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。?2.
bcl2凋亡基因表達的檢測原理和方法
(一)原理:細胞凋亡是一個受基因調控的主動過程,bcl-2是抑制細胞凋亡的原癌基因,正常細胞的激活和發育過程中都有表達,但在發育成熟的細胞中,其表達降低,在低分化或癌變的細胞中,bcl-2高表達與腫瘤的發生、發展相關,bcl-2過量表達常導致對化療藥物的耐藥性而阻止細胞凋亡,影響治療效果,一旦細胞發
表達蛋白檢測實驗
免疫印跡法 免疫沉淀法 點印跡法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當重組病毒通過噬斑純化和擴增后,免疫印跡可用于鑒定重組蛋白,并檢測其是否有預期的大小以及是
表達蛋白檢測實驗
實驗方法原理 當重組病毒通過噬斑純化和擴增后,免疫印跡可用于鑒定重組蛋白,并檢測其是否有預期的大小以及是否從感染細胞中分泌。下面的步驟是介紹檢測非分泌性(細胞內)蛋白的,如果重組蛋白是分泌到培養基中的,可按注解中的步驟操作。實驗材料 生長至匯片的單層 BS-C-1 細胞重組痘苗病毒儲液試劑、試劑盒
雞β干擾素(IFNβ)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:???????????????????????????????????????????????????????? ?96T2ng/L - 48ng/L?使用目的:本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中β干擾素(IFN-β)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測
牛α干擾素(IFNα)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1ng/L -35ng/L使用目的:本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中 α干擾素(IFN-α)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛 α干擾素(IFN-α)水平。用純化的牛 ? α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包
PCR-Array-簡單實用的檢測基因表達的高通量方法
?簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和
PCR-Array-簡單實用的檢測基因表達的高通量方法
簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達最靈敏,最可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和同時分析內
ELISA試劑盒有幾種檢測方法
1、用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,后來會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等指標。2、對于一些小分子的檢測,比如前列腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,因為因
ELISA試劑盒有幾種檢測方法
1、用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,后來會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等指標。2、對于一些小分子的檢測,比如前列腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,因為因
ELISA法是定性還是定量檢測方法
對你想要的已知蛋白進行定量測定。簡單的說,就是把蛋白量轉換成你能看到的顏色信號,顏色的深淺就代表蛋白的多少,通過酶標儀進行顏色深淺的量化,最后得到數值,根據標準曲線來測定蛋白濃度。
ELISA常用檢測方法優劣勢對比
我們知道,Elisa可分為多種類型測定,是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。 我公司技術部將各種Elisa常用方法的優勢劣勢進行對比,結果如下:?一、直接法(direct Elisa)將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性
ELISA方法檢測HBSAg標準操作規程
一.目的本SOP規定了HBSAg酶聯免疫吸附實驗的程序和相應的操作.二.范圍HBSAg檢測三.責任實驗室操作人員嚴格按要求執行。四.定義無五.背景為使實驗結果準確無誤,需要技術員從第一步開始就按標準操作進行。六.程序本程序適用于乙型肝炎病毒抗原(HBSAg)診斷試劑盒。(一).設備和材料???? 酶
表達序列標簽的方法
首先從樣品組織中提取mRNA,在逆轉錄酶的作用下用oligo(dT)作為引物進行RT-PCR合成cDNA,再選擇合適的載體構建cDNA 文庫,對各菌株加以整理,將每一個菌株的插入片段根據載體多克隆位點設計引物進行兩端一次性自動化測序,這就是EST序列的產生過程。
最準確的基因表達檢測方法——RNA測序遭遇“信任”危機?
當前,RNA測序成為了一種常用工具。 利用RNA測序,研究人員能夠定量地檢測各種生物體的基因表達,從而更好地了解細胞中正在發生的事情以及特定基因的功能。 RNA測序的準確性 早在2014年,《Nature Biotechnology》上發表了三篇文章。它們屬于RNA測序質量控制(SEQC)
有哪些方法可以檢測細胞周期蛋白的表達水平?
常用于檢測細胞周期蛋白表達水平的方法:免疫印跡法(Western Blot):通過特異性抗體識別細胞周期蛋白,然后利用顯色或發光技術檢測蛋白條帶的強度,從而反映蛋白的表達水平。免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC):適用于檢測組織切片中細胞周期蛋白的表達和定位。酶聯免疫吸附
elisa試劑盒原理與檢測方法的關系
elisa的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質