ONPG的概念
（1）原理：有的細菌可產生β-半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黃色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低濃度下也可檢出。（2）試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸餾水中，用30%NaOH調整pH為7.0，再加水至50ml）5ml，置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液為無色，如出現黃色，則不應再用。（3）方法：從培養基上取菌，于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液，加入一滴甲苯并充分振搖，使酶釋放。將試管置37℃水浴5分鐘，加入0.25ml ONPG試劑，水浴20分鐘～3小時觀察結果。（4）結果：菌懸液呈現黃色為陽性反應，一般在20～30分鐘內顯色。（5）應用：迅速及遲緩分解乳糖的細菌ONPG試驗為陽性，而不發酵乳糖的細菌為陰性。本實驗主要用于遲緩發酵乳糖菌株的快速鑒定。......閱讀全文
ONPG的概念
（1）原理：有的細菌可產生β-半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黃色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低濃度下也可檢出。（2）試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸餾水中，用30%N
ONPG培養基
成分 鄰硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG) 60mg (O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside) 0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5) 10mL 1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL?制法 將ONP
微生物培養基的原理、制作和現象：ONPG培養基
成分 鄰硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG) 60mg (O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside) 0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5) 10mL 1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL?制法 將ONP
β半乳糖苷酶試驗
β-半乳糖苷酶試驗是檢驗主管技師考試輔導的部分內容，以下是醫學教育網對這塊內容的整理，希望對考生有所幫助： β-半乳糖苷酶試驗（ONPG試驗） （1）試劑：0.75M ONPG溶液。 （2）方法：從克氏雙糖鐵培養基上取菌，于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液，加入一滴甲苯并充分振搖，使酶
β半乳糖苷酶試驗
β-半乳糖苷酶試驗 原理：有的細菌可產生β-半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黃色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低濃度下也可檢出。試劑：0.75MONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸餾水中，用3
紫外分光光度計檢測β半乳糖苷酶
β半乳糖苷酶一β一半乳糖苷酶，又稱乳糖酶（Lactase）。能水解乳糖來降低乳制品的乳糖含量，從而提高乳制品的可消化性，用于低乳糖牛奶和非結晶型濃縮牛奶的生產及奶酪風味的改變，同時還可用于生產低聚半乳糖。【酶活測定】以ONPG為底物測定β-半乳糖苷酶活力。【酶活定義】以ONPG為底物，37℃保溫酶解
β半乳糖苷酶試驗的檢查過程
試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸餾水中，用30% NaOH調整pH為7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。 方法：取純菌落用無菌生理鹽水制成濃的菌懸液，加入0.25ml ONPG液，置35℃水浴2
臨床化學檢查方法介紹β半乳糖苷酶試驗
β-半乳糖苷酶試驗介紹： β-半乳糖苷酶試驗是以有些細菌可產生β半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)，生成黃色的鄰硝基酚這樣的原理進行的試驗方法。β-半乳糖苷酶試驗正常值： 體內菌群的種類和比例正常，人體處于動態平衡健康狀態。β-半乳糖苷酶試驗臨床意義： 遲緩發酵乳糖的腸桿菌ON
生化檢測項目半乳糖苷酶試驗介紹
β-半乳糖苷酶試驗介紹： β-半乳糖苷酶試驗是以有些細菌可產生β半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)，生成黃色的鄰硝基酚這樣的原理進行的試驗方法。β-半乳糖苷酶試驗正常值： 體內菌群的種類和比例正常，人體處于動態平衡健康狀態。β-半乳糖苷酶試驗臨床意義： 遲緩發酵乳糖的腸桿菌ON
β半乳糖苷酶試驗的注意事項及檢查過程
注意事項 試劑：0NPG溶液為無色，如出現黃色，則不應再用。 不合宜人群： 沒有 檢查前禁忌：注意正常的生活飲食習慣，注意個人衛生。 檢查時要求：積極配合醫生 檢查過程 試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液(6.9g NaH2P04溶于45ml
哺乳動物原代細胞培養的β半乳糖苷酶（熒光測定）
β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大腸桿菌lacZ基因編碼，可催化半乳糖苷水解。最大優勢是易于用免疫組織化學法觀測其原位表達，是最常用的監測轉染率的報道基因之一。以鄰—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)為底物可用標準的比色法檢測酶活性，其檢測動力學范圍為6個數量級。氯酚紅—β—D—半乳吡喃糖苷(CP
哺乳動物原代細胞培養的β半乳糖苷酶（分光光度測定）
試劑和器材：?1.反應緩沖液：5g/L聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）、0.05mol/L檸檬酸鈉-磷酸鹽緩沖液，pH4.3；2.終止液：0.25%甘氨酸-NaOH，pH10；3.底物：6mmol/L對硝基苯基-β-半乳呋喃糖苷溶于緩沖溶液中；4.微量離心機，帶1.5—2.0ml小管；
細菌對于碳水化合物的代謝試驗
?? 細菌對于碳水化合物的代謝試驗原理為：由于細菌各自具有不同的酶系統，對糖的分解能力不同，有的能分解某些糖產生酸和氣體，有的雖能分解糖產生酸，但不產生氣體，有的則不分解糖。據此可對分解產物進行檢測從而鑒別細菌。具體試驗方法有：①糖類發酵試驗是鑒定細菌最常用的生化反應，特別是對腸桿菌的鑒定尤為重要；
細菌對于碳水化合物的代謝試驗
1.糖（醇、苷）類發酵試驗 （1）原理：由于各種細菌含有發酵不同糖（醇、苷）類的酶，故分解糖類的能力各不相同，有的能分解多種糖類，有的僅能分解1～2種糖類，還有的不能分解。細菌分解糖類后的終末產物亦不一致，有的產酸、產氣，有的僅產酸，故可利用此特點以鑒別細菌。 （2）培養基：在培養基中加入
細菌對于碳水化合物的代謝試驗
1.糖（醇、苷）類發酵試驗 （1）原理：由于各種細菌含有發酵不同糖（醇、苷）類的酶，故分解糖類的能力各不相同，有的能分解多種糖類，有的僅能分解1～2種糖類，還有的不能分解。細菌分解糖類后的終末產物亦不一致，有的產酸、產氣，有的僅產酸，故可利用此特點以鑒別細菌。 （2）培養基：在培養基中加入0.
β半乳糖苷酶的測定實驗
實驗方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖實驗材料 β-半乳糖苷酶試劑、試劑盒 磷酸鉀鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」實驗混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm
β半乳糖苷酶的測定實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖 實驗
β半乳糖苷酶的測定實驗
實驗方法原理β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖實驗材料β-半乳糖苷酶試劑、試劑盒磷酸鉀鄰硝基苯基 β-D-半乳糖苷儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」實驗混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm處吸收值升
β半乳糖苷酶試驗的臨床意義
遲緩發酵乳糖的腸桿菌ONPG實驗陽性，如埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬等。不發酵乳糖的細菌如沙門菌屬、變形桿菌屬等為陰性。本試驗可作為遲緩發酵乳糖細菌的快速鑒定方法。 異常結果：埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿道感染。 枸櫞酸桿菌屬引起原發性枸櫞酸桿菌肺炎或繼發性枸櫞酸桿菌肺炎。病理改
大腸桿菌的檢測方法酶底物法
酶底物法已被列為國家標準(GB/T4789.32－2002)，用酶底物法來檢測大腸桿菌的主要原理是:大腸桿菌細菌能夠產生 β－半乳糖苷酶(β－D－galactosidase)，它能夠分解 ONPG(Ortho－nitro phenyl－β－D－galactopyr－anoside)，從而使得培養
酶法測定鈉的原理
酶法測定鈉的原理是利用鈉依賴的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（鄰硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解釋放出有色產物鄰硝基酚，在波長420nm處測吸光度變化。 酶法測鉀的原理是利用對丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸變為乳酸同時伴有還原型輔酶Ⅰ的消耗，在波長340nm處測NADH的
類鼻疽假單胞菌的培養介紹
在血平板上經24小時培養呈細小菌落，48小時后菌落增大至中等大小，灰黃色，外形似車輪狀或菊花樣。菌落周圍呈半溶血狀態。在液體培養中，初為混濁生長，后形成皺褶菌膜。在麥康凱平板上為分解乳糖的紅色菌落；在SS平板上生長不良；在含2%和3%NaCl營養瓊脂平板上不生長。所有生長菌落的平板均有濃烈的異味
類鼻疽假單胞菌的培養
在血平板上經24小時培養呈細小菌落，48小時后菌落增大至中等大小，灰黃色，外形似車輪狀或菊花樣。菌落周圍呈半溶血狀態。在液體培養中，初為混濁生長，后形成皺褶菌膜。在麥康凱平板上為分解乳糖的紅色菌落；在SS平板上生長不良；在含2%和3%NaCl營養瓊脂平板上不生長。所有生長菌落的平板均有濃烈的異味
β半乳糖苷酶試驗的正常值及臨床意義
正常值 體內菌群的種類和比例正常，人體處于動態平衡健康狀態。 臨床意義 遲緩發酵乳糖的腸桿菌ONPG實驗陽性，如埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬等。不發酵乳糖的細菌如沙門菌屬、變形桿菌屬等為陰性。本試驗可作為遲緩發酵乳糖細菌的快速鑒定方法。 異常結果：埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿
酶法測定血清離子的原理
酶法測定鈉的原理是利用鈉依賴的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（鄰硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解釋放出有色產物鄰硝基酚，在波長420nm處測吸光度變化。酶法測鉀的原理是利用對丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸變為乳酸同時伴有還原型輔酶Ⅰ的消耗，在波長340nm處測NADH的吸光度下
細菌鑒定的生化試驗碳源代謝試驗
碳源是為微生物提供碳素來源的物質。用于合成菌體,碳源物質在細胞內經過一系列復雜的化學變化后成為微生物自身的物質(如糖類、脂質、蛋白質等),碳可占一般細菌細胞干重的一半。大多數碳源還能為機體提供維持生命活動所需的能源,因此,碳源物質通常也是能源物質。碳源代謝試驗主要是通過檢測細菌在利用碳源時的代謝途徑
β半乳糖苷酶試驗的臨床意義及注意事項
臨床意義 遲緩發酵乳糖的腸桿菌ONPG實驗陽性，如埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬等。不發酵乳糖的細菌如沙門菌屬、變形桿菌屬等為陰性。本試驗可作為遲緩發酵乳糖細菌的快速鑒定方法。 異常結果：埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿道感染。 枸櫞酸桿菌屬引起原發性枸櫞酸桿菌肺炎或繼發性枸櫞酸桿菌
酶法測定血清離子的原理
酶法測定鈉的原理是利用鈉依賴的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（鄰硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解釋放出有色產物鄰硝基酚，在波長420nm處測吸光度變化。 酶法測鉀的原理是利用對丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸變為乳酸同時伴有還原型輔酶Ⅰ的消耗，在波長340nm處測NADH的吸光
FDA認可使用的檢測系統和試劑盒
美國FDA認可使用的檢測系統和試劑盒詳見下列表格： ?表1：檢測和鑒定食源性病原菌的微量生化復合試劑盒 ? ? ? ? ? ? ?微生物 ? ? ? ? ? ?檢測系統名稱 ? ? ? ? ? ?生產商 ? ? ? ? ? ??腸桿菌科 API-20Ea ? ? ? ? ? ?? ? ?
實驗動物細菌學監測標準操作規程
主體內容：1. 標本的采集正常動物細菌檢測主要檢查呼吸道和腸道，分別取氣管分泌物及腸內容物做細菌培養檢查。對于發病動物，采取其病變組織和臟器做細菌學檢查。2. 細菌的培養細菌是單細胞的原核生物，絕大部分都可以在人工培養基上進行繁殖，只有少數例外，如泰澤病原體需在活細胞中繁殖。不同細菌種類所要求的最適