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準備干凈的配膠板和電泳槽注意 DNA 酶污染的儀器可能會降解 DNA ，造成條帶信號弱、模糊甚至缺失的現象選擇電泳方法 一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以；如果需要分辨率高的電泳，特別是只有幾個 bp 的差別應該選擇聚丙烯酰胺凝膠電泳；用普通電泳不合適的巨大 DNA 鏈應該使用脈沖凝膠電泳。注意巨大的 DNA 鏈用普通電泳可能跑不出膠孔導致缺帶。正確選擇凝膠濃度 對于瓊脂糖凝膠電泳，濃度通常在 0.5 ～ 2 ％之間，低濃度的用來進行大片段核酸的電泳，高濃度的用來進行小片段分析。低濃度膠易碎，小心操作和使用質量好的瓊脂糖是解決辦法。注意高濃度的膠可能使分子大小相近的 DNA 帶不易分辨，造成條帶缺失現象。適合的電泳緩沖液 常用的緩沖液有 TAE 和 TBE ，而 TBE 比 TAE 有著更好的緩沖能力。電泳時使用新制的緩沖液可以明顯提高電泳效果。注意電泳緩沖液多次使用后，離子強度降低， PH 值上升，緩沖性能下降，......閱讀全文
方案8 第二向：蛋白質的 SDS-PAGE 實驗實驗方法原理在第一向 IEF 和 IPG 膠條平衡之后，需進行第二向 SDS-PAGE。SDS-PAGE 是基于蛋白質分子量的不同而將其分離的。這種分離系統可從多家供應商處獲得，在許多蛋白質化學實驗室中也普遍使用。這里介紹放置 IPG 膠條的方法以及第
前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體，它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成，每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋
M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用實驗 實驗材料 羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236 試劑、試劑盒 生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-T 緩沖液PBS-T-BSA 緩沖液 儀器、耗材 2YT 培養基SOC 培養基 實驗步驟 下述方法描述了 P8 庫
M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用實驗實驗材料 羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236試劑、試劑盒 生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-T 緩沖液PBS-T-BSA 緩沖液儀器、耗材 2YT 培養基SOC 培養基實驗步驟 下述方法描述了 P8 庫的設計（見 12.3.1)、構建（見
本章描述了改進融合蛋白在 M13 噬菌體顆粒表面展示水平的一個方法。向 M13 衣殼錨定蛋白引入突變后，蛋白質展示水平約能增加兩個數量級。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236試劑、試劑盒生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-
實驗方法原理 實驗材料 樣品 DNA試劑、試劑盒 PCR 引物 氯化鎂溶液dATP、dGTP、dCTP 和 dTTP 混合液Taq 聚合酶96孔板PCR熱循環儀瓊脂糖EB 溶液上樣緩沖液電泳緩沖液Long Ranger? 凝膠溶液尿素儀器、耗材 水平凝膠電泳裝置紫外透射反射儀濾膜 GS-400 HD
七、桿狀病毒表達載體的新一代昆蟲細胞宿主最早的鱗翅類昆蟲細胞的遺傳轉化技術出現在1990年（Jarvisetal.，1990)。那時，研發該技術的初衷在于構建一個穩定轉化的昆蟲細胞系，它旨在能夠持續生產目標重組蛋白而無需使用桿狀病毒進行感染。然而, 構建這個生產用細胞系所用的載體及方法也為構建具有新
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
實驗材料 表達 BMP 融合蛋白的大腸桿菌細胞 試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖
親和層析方法幾乎可以將麥芽糖結合融合蛋白純化成單組分。麥芽糖結合蛋自（MBP) 是一個由大腸桿菌 malE 基因編碼的周質蛋白，是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一。MBP 能結合微摩爾水平的麥芽糖和麥芽糊精，因此可用交聯了麥芽糖的瓊脂糖進行純化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J
實驗材料 表達 BMP 融合蛋白的大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液細胞洗滌緩沖液柱洗脫緩沖液柱洗滌緩沖液MgCl2PMSFSDS 凝膠加樣緩沖液Tris-ClDNase溶菌酶RNase凝血酶、腸激酶或 Xa 因子溶液SDS-聚丙烯酰胺凝膠儀器、耗材 Beckman Ti60 轉頭或相當的轉頭
實驗材料樣品 DNA試劑、試劑盒PCR 引物氯化鎂溶液dATP、dGTP、dCTP 和 dTTP 混合液Taq 聚合酶96孔板PCR熱循環儀瓊脂糖EB 溶液上樣緩沖液電泳緩沖液Long Ranger? 凝膠溶液尿素儀器、耗材水平凝膠電泳裝置紫外透射反射儀濾膜GS-400 HD ROXABI 377
一．用戶需要自備的材料和儀器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit：A2010B0B03 ； Biotnt qPCR Premix Kit： A2010A0112； RNA 抽提：推薦使用Qiagen RNeasy Mini Kit (
一．用戶需要自備的材料和儀器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit：A2010B0B03 ； Biotnt qPCR Premix Kit： A2010A0112； RNA 抽提：推薦使用Qiagen RNeasy Mini Kit (
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一．用戶需要自備的材料和儀器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit：A2010B0B03 ；Biotnt qPCR Premix Kit： A2010A0112；RNA 抽提：推薦使用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104，RNas
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被