雙抗體夾心法,是將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次;加待測抗原,如兩者是特異的,則發生結合,然后把多余抗體洗除;加入與待測抗原呈特異反應的酶聯抗體,使形成“夾心”;加入該酶的底物,若看到有色的酶解產物產生,說明在孔壁上存在相應的抗原。 ①將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次; ②加待測抗原,如兩者是特異的,則發生結合,然后把多余抗體洗除; ③加入與待測抗原呈特異反應的酶聯抗體,使形成“夾心”; ④加入該酶的底物,若看到有色的酶解產物產生,說明在孔壁上存在相應的抗原。......閱讀全文
雙抗體夾心法,是將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次;加待測抗原,如兩者是特異的,則發生結合,然后把多余抗體洗除;加入與待測抗原呈特異反應的酶聯抗體,使形成“夾心”;加入該酶的底物,若看到有色的酶解產物產生,說明在孔壁上存在相應的抗原。 ①將含有已知抗體的抗血清吸附在微量
雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。那么,為什么雙抗體夾心法是檢測抗原*常用的方法?1、將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。?2、加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗
從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。ELISA試劑盒是以免疫學反應為基礎,將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,
操作步驟?1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵
雙抗體夾心法,是將含有已知抗體的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗滌一次;加待測抗原,如兩者是特異的,則發生結合,然后把多余抗體洗除;加入與待測抗原呈特異反應的酶聯抗體,使形成“夾心”;加入該酶的底物,若看到有色的酶解產物產生,說明在孔壁上存在相應的抗原。
?但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。 ? ?現將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。生物素與親和素的結合具有很強的特異性,其親和力較抗原抗體反應大得多,兩者一經結合就極為穩定。由于一個親和素可與4
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。 【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 1、包被抗-HBs反應條 1瓶
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含:? 1、包被抗-HBs反應條1瓶2、酶結合物1瓶3、HBsA
以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據顏色反應來判定抗原含量。 【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 1、包被抗-HBs反應條 1瓶
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原