概述標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物本身,而測定復合物中的標記物,通過標記物的放大作用,進一步提高了免疫技術的敏感性。這種標記免疫技術一般分為兩類,一類用于組織切片或其他標本中抗原或抗體的定位,另一類用于液體標本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術(immunohistochemicaltechnique)范疇,后者則稱為免疫測定(immunoassay)。 首先被用作標記免疫技術中標記物的是熒光素。1941年Coons建立的熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)使組織和細胞中抗原物質的定位成為可能。放射性核素作為標記物在免疫技術......閱讀全文
概述標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物
標記免疫分析技術概述
一、概要?定義:應用廣泛、先進的免疫分析技術,是生物活性物質分析方法的新領域;基本技術是將多種標記示蹤技術和高度靈敏性和醫學免疫學抗原抗體反應的高度特異性相結合的分析技術。?特點:靈敏度高,特異性強,重復性好,準確性高,操作簡便,易于自動化商品化。?發展:放射免疫分析,免疫放射分析,酶標記免疫分析,
標記免疫分析技術概述
一、概要 定義:應用廣泛、先進的免疫分析技術,是生物活性物質分析方法的新領域;基本技術是將多種標記示蹤技術和高度靈敏性和醫學免疫學抗原抗體反應的高度特異性相結合的分析技術。 特點:靈敏度高,特異性強,重復性好,準確性高,操作簡便,易于自動化商品化。 發展:放射免疫分析,免疫放射分析,
標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物
標記的免疫技術
免疫技術是利用抗原抗體反應進行的檢測方法,即應用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑,以檢測標本中的相應抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標記物(例如放射性核素、熒光素、酶等)進行標記,則在與標本中的相應抗體或抗原反應后,可以不必測定抗原抗體復合物
免疫標記技術常用的標記物介紹
常用的標記物有熒光素、酶、放射性核素及膠體金等。免疫標記技術具有快速、定性或定量甚至定位的特點,是應用最廣泛的免疫學檢測技術。 常用的免疫熒光素主要有: 1 .異硫氰酸熒光素 (FITC) ,最大吸收光譜為 490~495nm ,最大發射光譜為 520~530nm ,呈黃綠色熒光。 2 .
標記免疫分析技術的種類
免疫標記分析技術主要包括:放射物標記、酶標記、發光標記、熒光標記和金標記方法。1 放射物標記分析:用放射物標記抗原或抗體發展的放射免疫分析(radio immunoassay, RIA)是美國科學Yalow和Berson于1959年創立的一種微量分析法,它是將具有高靈敏度的放射性核素示蹤技術和特異性
標記免疫分析技術2
四、發光免疫分析:發光免疫分析:直接用發光物質標記抗原或抗體生物的發光劑:熒火蟲熒光素(酶催化發光)化學的發光劑:魯米那、吖啶脂等在有過氧化氫的弱堿溶液中即可迅速發光。美國CHIRON公司生產的ACS-180使用類均相的包被抗體的磁性微粒,擴大了反應面,加速了免疫反應,又應用吖啶脂作標記的化學發光分
免疫標記技術介紹
免疫標記技術是指將抗原抗體反應與標記技術相結合,將已知的抗體或抗原標記上示蹤物質,通過檢測標記物,間接測定抗原-抗體復合物的一類實驗方法。常用的標記物有酶,熒光素,放射性核素,化學發光物質及膠體金等。
標記免疫分析技術1
一、標記分析技術概述1959年,美國學者Yalow和Berson建立了放射免疫分析技術,這種技術以免疫反應的特異性,和放射性同位素標記的靈敏性顯示了其在微量檢測方面的優勢,吸引著各國的生物醫學工作者。標記免疫分析技術進入了一個嶄新的時期。從而使免疫分析,從定性分析和半定量分析走向了定量分析。醫學檢測
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物,在不改變抗原抗體的免疫反應特異性,亦不降低酶活性條件下,與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
關于免疫標記技術的簡介
免疫標記技術指用熒光素、酶、放射性同位素或 電子致密物質等標記抗原或抗體進行的抗原 抗體反應。免疫標記技術不僅極大地提高了 抗原抗體反應的敏感性,以便對微量物質進 行定性或定量檢測,而且結合以顯微鏡或電 鏡技術,能對待測物進行精確的定位檢測。 免疫標記技術有三種基本類型:免疫熒光 法、免疫酶技術
非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理 標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素,通過一系統的非標記抗體的免疫學反應,對組織
斷裂標記免疫電鏡技術(1)
斷裂-標記免疫電鏡技術此法是先進行冷凍斷裂,再做免疫標記,從而可以對斷裂開的各種膜結構及胞漿斷面進行標記。(1)臨界點干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS沖洗3min×3。如為細胞懸液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝膠化,將凝膠切成2mm左右的小塊,用3
斷裂標記免疫電鏡技術(2)
)超薄切片法步驟:①至⑤同臨界點干燥法。⑥1%鋨酸,室溫固定2h,系列酒精或丙酮脫水,常規電鏡包埋。⑦切半薄片,光鏡定位合適的斷裂部位,再切超薄切片,鈾鉛染色,透射電鏡觀察。斷裂標記法目前文獻報告應用較多的是植物凝集素-膠體金免疫標記技術,常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 膠體金免疫標記技術.C
免疫金標記技術原理
免疫金標記技術原理:膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能,蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面,無共價鍵形成,標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅
非標記抗體免疫電鏡技術
(一)??原理標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素,通過一系統的非標記抗體的免疫學反應,對組
斷裂—標記免疫電鏡技術介紹
此法是先進行冷凍斷裂,再做免疫標記,從而可以對斷裂開的各種膜結構及胞漿斷面進行標記。(1)臨界點干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS沖洗3min×3。如為細胞懸液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝膠化,將凝膠切成2mm左右的小塊,用30%的甘油—PBS浸透
放射免疫標記技術
一、放射免疫標記技術放射免疫標記技術是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合,以放射性同位素作為示蹤物的標記免疫測定方法,由于此項技術具有靈敏度高 (可檢測出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物質,特異性強(可分辨結構類似的抗原)、重復性強、樣品及試劑用量少
免疫標記技術及其應用
近二十幾年來,免疫學檢測的方法發展很快,特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后,使檢測的敏感性和特異性都大大提高。繼20世紀50年代的免疫熒光(1FA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技術之后,在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。 標記免疫技術是將某種可微量測定或超微量
概述熒光標記物種類及熒光免疫層析技術應用
熒光免疫層析分析方法具有靈敏度高、穩定性好、受自然熒光干擾低等優點,成為食品質量安全快速檢測分析研究的熱點。用于熒光免疫分析的標記物主要包括熒光素、量子點、上轉換納米粒子等。
免疫球蛋白標記技術_熒光素標記抗體技術
實驗方法原理目前用于抗體標記的熒光素主要有異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或羅達明(Lissamine rhodamine B200,RB200)。在堿性條件下FITC的碳酰胺鍵可與抗體賴氨酸的ε氨基共價結合,標記后的抗體仍保持與相應抗原結合的能力。在熒
免疫球蛋白標記技術_酶標記抗體
免疫標記技術是用特定的物質標記抗原或抗體進行的抗原抗體反應。可借助各種儀器觀察結果或進行自動化測定,可在細胞、亞細胞、超微結構及分子水平上,對抗原抗體反應進行定性和定位研究;或應用各種液相和固相免疫分析方法,對液體中的抗原、半抗原或抗體進行定性和定量測定。實驗方法原理酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗
免疫學技術專題:非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理標記抗體法雖然具有許多優點,但也存在一些難以克服的問題,如標記抗體的分子增大,對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合,影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素,通過一系統的非標記抗體的免疫學反應,對組織中的
免疫分析法的標記技術
基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測
免疫分析法的標記技術
基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測
免疫分析法的標記技術
基本原理:采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質 標記抗體(或抗原)進行抗原 -抗體反應,通過對免疫復合物中的標記物的測定,達到對免疫反應進行監測的目的。標記免疫技術主要類型:放射免疫技術、酶免疫技術、熒光免疫技術、化學發光免疫技術 基本原理:利用化學或生物發光系統作為抗原抗體反應的指示系統,借以定量檢測
免疫標記電鏡技術標本制備的要求
為保持組織的抗原性,固定劑不宜過強。 1.包埋前染色 優點是切片染色前不經過鋨酸固定、脫水及樹脂包埋等過程,抗原未被破壞,易于獲得良好的免疫反應。特別適用于含抗原量較少的組織。 2.包埋后染色 優點是超微結構保存較好,方法簡便,陽性結構有高度的可重復性,能在同一張切片上進行多重免疫染色。
標記抗體的免疫放射技術(IRMA)
(一)原理? IRMA是采用過量的標記抗體與待測抗原的非競爭性結合反應,然后加入固相的抗原吸附劑以結合游離的標記抗體,離心去沉淀,測定上清液中的放射性強度,從而推算出待測樣品的抗原含量。???見表1。表1?? IRMA與RIA的區別IRMARIA標記物質抗體抗原標記物用量過量限量反應方式直接結合競爭
標記抗體的免疫放射技術(IRMA)
(一)原理??IRMA是采用過量的標記抗體與待測抗原的非競爭性結合反應,然后加入固相的抗原吸附劑以結合游離的標記抗體,離心去沉淀,測定上清液中的放射性強度,從而推算出待測樣品的抗原含量。(二)放射免疫檢測與免疫放射檢測(即IRMA與RIA)的區別見表13-4。表13-4?? IRMA與RIA的區別