Structure：損傷DNA末端降解過程機制
2022年7月15日，浙江大學生命科學學院趙燁教授、華躍進教授聯合浙江大學醫學院郭江濤教授團隊在CellPress旗下的Structure雜志發表了題為“Mechanisms of helicase activated DNA end resection in bacteria”的研究成果。該論文使用冷凍電鏡首次解析了細菌中的損傷DNA末端降解復合體HerA-NurA完整八聚體復合物的結構，并結合生化實驗發現NurA延伸到中央孔徑的N端區域（ENR）調節了HerA-NurA的解旋酶和核酸酶活性，揭示了細菌中有別于古菌的DNA末端切除機制。內源性和外源性的脅迫會造成各種類型的DNA損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSB）被認為是最為嚴重的一種DNA損傷類型，如不能及時修復將極大的影響基因組的穩定性，導致早衰，惡性腫瘤等重大疾病的發生。同源重組修復途徑是DSB修復的重要方式之一，其首先依賴于對損傷DNA的末端降解步驟（end resect......閱讀全文
什么是DNA末端復制
端粒是染色體末端的DNA重復序列，作用是保持染色體的完整性。細胞分裂一次，由于DNA復制時的方向必須從5'方向到3'方向，DNA每次復制端粒就縮短一點（參見岡崎片段）。一旦端粒消耗殆盡，染色體則易于突變而導致動脈硬化和某些癌癥。因此，端粒和細胞老化有明顯的關系。一直以來都知道精、卵細
DNA雙鏈末端的概念
中文名稱平端英文名稱blunt end定 義DNA雙鏈末端平齊而無突出單鏈。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
末端標記DNA探針技術
現以Klenow片段標記3'末端為例說明末端標記的方法。1、材料：待標記的雙鏈含凹缺3'末端的DNA。2、設備：高速臺式離心機，水浴鍋等。3、試劑：(1)3種不含標記的dNTP各為200mmol/L。(2)合適的限制酶。(3)[α-32P] dNTP:3000Ci/mmol, 10m
Structure：損傷DNA末端降解過程機制
2022年7月15日，浙江大學生命科學學院趙燁教授、華躍進教授聯合浙江大學醫學院郭江濤教授團隊在CellPress旗下的Structure雜志發表了題為“Mechanisms of helicase activated DNA end resection in bacteria”的研究成果。該論文使
DNA測序——雙脫氧鏈末端終止法
實驗方法原理DNA聚合酶催化的DNA鏈延伸是在3'-OH末端上進行的。由于2’，3’-雙脫氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脫氧而失去游離-OH，當它參入到DNA鏈后，3'-OH末端消失，使DNA鏈的延伸終止。?本實驗根據此原理，將待測DNA片段插入單鏈噬菌體M13載體，
向平末端DNA連接合成接頭實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 接頭是指合成的能夠自身互補的 DNA 片段，一般長 8~16 個核苷酸，互補的片段復性后可形成平末端的含有一個酶切位點的雙鏈分子。 實驗材料
向平末端DNA連接合成接頭實驗
實驗方法原理?接頭是指合成的能夠自身互補的 DNA 片段，一般長 8~16 個核苷酸，互補的片段復性后可形成平末端的含有一個酶切位點的雙鏈分子。實驗材料?T4 噬菌體連接酶T4 噬菌體多聚核苷酸激酶限制性內切核酸酶外源或目的 DNA 片段試劑、試劑盒?乙酸胺ATP乙醇10X 接頭激酶緩沖液MgCl2
向平末端DNA連接合成接頭實驗
接頭是指合成的能夠自身互補的 DNA 片段，一般長 8~16 個核苷酸，互補的片段復性后可形成平末端的含有一個酶切位點的雙鏈分子。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理接頭是指合成的能夠自身互補的 DNA 片段，一般長 8~16 個核苷酸，互補的片段復性后可形成平末端的含有一個
線形質粒DNA－5粘性末端去磷酸實驗
實驗材料 質粒試劑、試劑盒 CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE儀器、耗材 水浴鍋抽干機實驗步驟 1、質粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min?2、補充CIAP 再37 ℃水浴30min?3、加入50 mM EDTA至終濃度5 mM 75 ℃加熱10min 失活CIAP?
末端標記法介紹DNA探針的標記方法
末端標記法不是將DNA進行全長標記，只在其5'端或3’端導入標記物進行部分標記。該標記方法可得到全長DNA探針，因為攜帶的標記分子較少，所以標記比活性不高。
大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ－Klenow片段實驗——標記DNA的3‘末端
實驗方法原理選用本方法可產生用于放射自顯影的32P末端標記分子量標志物。放射自顯影帶的強度與片段長度無關，標記DNA可穩定數月之久。?實驗材料DNA試劑、試劑盒dNTP儀器、耗材水浴鍋實驗步驟1. ?在20 μl 反應體積中，用可產生5’突出端的限制性內切酶消化0.1~0.4 μg DNA。?2.
線形質粒DNA－5粘性末端去磷酸實驗——抽提法
實驗材料質粒試劑、試劑盒CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE儀器、耗材水浴鍋抽干機實驗步驟1、質粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min?2、補充CIAP 再37 ℃水浴30min?3、加入50 mM EDTA至終濃度5 mM 75 ℃加熱10min 失活CIAP?4、冷卻
雙脫氧ATP末端標記雙鏈DNA的3突出端
? ? ? ? ? ? 實驗材料 限制性內切核酸酶 小牛胸腺末端轉移酶 模板 DNA 試劑、試劑盒 乙酸銨
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不在自
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極其強大，我們無時無刻不在受傷，也無時無刻不
DNA損傷修復機制——非同源末端鏈接NHEJ和同源重組HR
【干貨】拯救你受傷的DNA-NHEJ與HR生命極其脆弱，我們每天在電子輻射、紫外線、霧霾等等各種外部環境及細胞代謝產物等內源因素影響下，我們生命的核心-DNA都會受到不同程度的損傷，其中DNA雙鏈斷裂（DSBs，Double strand breaks）是損傷中最為嚴重的一種，然而生命卻又極
高容量載體中基因組DNA片段末端的分離(小載體PCR)
實驗方法原理 許多真核生物的基因所包含的 DNA，遠非單個重組子所能容納得了的。對于大多數染色體來說，更是如此。因此，必須構建一套重疊的 DNA 克隆，這些克隆的 DNA 按次序排列能形成疊連序列（疊連群），可以涵蓋一個很大的基因或目的區域。實驗材料 T4 噬菌體 DNA 連接酶限制性內切核酸酶 P
高容量載體中基因組DNA片段末端的分離(小載體PCR)
許多真核生物的基因所包含的 DNA，遠非單個重組子所能容納得了的。對于大多數染色體來說，更是如此。因此，必須構建一套重疊的 DNA 克隆，這些克隆的 DNA 按次序排列能形成疊連序列（疊連群），可以涵蓋一個很大的基因或目的區域。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理許多真核生物
高容量載體中基因組DNA片段末端的分離(小載體PCR)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 許多真核生物的基因所包含的 DNA，遠非單個重組子所能容納得了的。對于大多數染色體來說，更是如此。因此，必須構建一套重疊的 DNA 克隆，這些克隆的 DNA 按次序排列能形成疊連序列（疊連群），可以涵蓋一個很大的基因或目的區域。
5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）激酶標記試劑盒
5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）激酶標記試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）激酶標記試劑是一種旨在針對目標片段DNA、寡核苷酸引物、銜接體（LINKER）、線性載體等，使用多聚核苷酸激酶的正向反應，進行5’末端同位素標記處
PCR擴增在擴增DNA產物末端引入限制性核酸內切酶酶切位點
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 噬菌體 T4 DNA 連接酶 限制性內切核酸酶 靶 DNA
PCR擴增在擴增DNA產物末端引入限制性核酸內切酶酶切位點
實驗方法原理實驗材料噬菌體 T4 DNA 連接酶限制性內切核酸酶靶 DNA試劑、試劑盒氯仿EDTA乙醇酚氯仿乙酸鈉TE儀器、耗材瓊脂糖凝膠水浴箱實驗步驟一、材料1. 緩沖液與溶液氯仿EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0)乙醇酚：氯仿（1:1，V/V)乙酸鈉（3 mol/L, pH 5.2
什么是還原末端？
還原末端是指寡糖或多糖鏈中有游離半縮醛羥基或半縮酮基的一端。
突出末端的結構
中文名稱突出末端英文名稱protruding terminus定 義由限制性內切酶作用于DNA產生的黏性末端的突出單鏈部分。有5`端突出和3`端突出兩種情況。應用學科遺傳學（一級學科），分子遺傳學（二級學科）
通過PCR擴增在擴增DNA產物末端引入限制性核酸內切酶酶...
通過PCR擴增在擴增DNA產物末端引入限制性核酸內切酶酶切位點實驗方法原理 實驗材料?噬菌體 T4 DNA 連接酶限制性內切核酸酶靶 DNA試劑、試劑盒?氯仿EDTA乙醇酚氯仿乙酸鈉TE儀器、耗材?瓊脂糖凝膠水浴箱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液與溶液氯仿EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.
大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ－Klenow片段實驗——修復突出的3’或5‘末端
Klenow酶是大腸桿菌八聚合酶I的羧基端片段，它具有DNA聚合酶和3’到5’方向的外切酶活性，不含5’到3”方向的外切酶活性。實驗材料DNA試劑、試劑盒限制性內切酶EDTA儀器、耗材水浴鍋實驗步驟1. ?在20 μl 反應體積中，用限制性內切酶消化0.1~4 μg DNA。2. ?加入1 μl 0
末端標記的定義
定義1：如借助多核苷酸激酶將ATP的γ位32PO4基團或克列諾酶將生物素標記的單核苷酸加到核酸的末端，以供作示蹤檢測等。定義2：在DNA或RNA鏈末端(3'或5'端)添加放射性或其他可檢測的標記。
末端開口的采樣探子
符合GB/T 6679-2003《固體化工產品采樣通則》國家標準。 適用于粉末、小顆粒、小晶體等固體化工產品采樣。 材質是不銹鋼、黃銅、鋁合金等。除末端開口的采樣探子外還可根據用戶要求生產各種規格的采樣探子，如：末端封閉的采樣探子，可封閉的采樣探子和窗口關閉式采樣探子。 符合G
末端酶的定義
中文名稱末端酶英文名稱terminase定 義在病毒DNA包裝過程中，催化特異性地切割病毒DNA連環體，產生單位長度的基因組，并參與基因組包裝的酶類。DNA病毒(如皰疹病毒)、雙鏈DNA噬菌體均有相應的末端酶。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），酶（二級學科）
細胞化學詞匯末端缺失
在染色體的長臂或短臂接近末端的一個節段發生一次斷裂，造成該染色體遠側節段缺失的現象。如果同一染色體的兩臂同時發生斷裂，而余下的兩臂斷裂端重接，便可形成環狀染色體，又稱著絲粒環，在腫瘤細胞中比較常見。