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    胚胎干細胞的分離與培養

    分離囊胚的內細胞群(ICM)細胞,再進行體外培養即可取得胚胎干細胞。目前,取得胚胎干細胞的方法已有一定改進,但仍無可避免地會殺死胚胎。囊胚由兩大部分構成:處于外圍的滋養層以及處于內部的內細胞群。滋養層細胞會分化為胚胎外的組織(胎盤等),而內細胞群則會分化為胚胎的各種結構。最早期分離胚胎干細胞的方法是先用蛋白酶分解透明帶的蛋白質(囊胚外圍的一層細胞外基質),再利用免疫手術(immunosurgery)專一地使滋養層細胞裂解,從而取得內部的內細胞群細胞,之后體外培養和繁殖取得的內細胞群細胞,即可建立胚胎干細胞系。目前胚胎干細胞的分離方法已有了一定的改進,比如現在已有使用激光去除透明帶的技術。獲取胚胎干細胞的成功率相當低,即使成功取得胚胎干細胞,維持其不分化的狀態也十分困難。為了阻止胚胎干細胞在培養過程中分化,培養基需加入如白血病抑制因子(LIF)等因子。最初,胚胎干細胞需要在含有喂養層細胞的培養基上培養。喂養層細胞能為胚胎干細胞提供......閱讀全文

    胚胎干細胞的分離與培養

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    細菌的分離與培養

    實驗目的: 掌握在各種培養基上的接種方法并觀察生長現象。 實驗材料: 菌種、普通瓊脂 ?平板、肉湯培養基、半固體培養基、斜面培養基、接種環、接種針、酒精燈。 實驗內容: 一、平板劃線接種法(分離培養法) 原理:通過在平板上劃線,將混雜的細菌 ?在瓊脂平板表面充分的分散開,使單個細菌能固定在一點上生長

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    分離囊胚的內細胞群(ICM)細胞,再進行體外培養即可取得胚胎干細胞。目前,取得胚胎干細胞的方法已有一定改進,但仍無可避免地會殺死胚胎。囊胚由兩大部分構成:處于外圍的滋養層以及處于內部的內細胞群。滋養層細胞會分化為胚胎外的組織(胎盤等),而內細胞群則會分化為胚胎的各種結構。最早期分離胚胎干細胞的方法是

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    實驗概要學習培養和分離酵母菌的技術和方法。實驗原理大多數酵母菌為腐生,其生活最適pH為4.5-6,常見于含糖分較高的環境中,例如果園土、菜地土及果皮等植物表面。酵母菌生長迅速,易于分離培養,在液體培養基中,酵母菌比霉菌生長得快。利用酵母菌喜歡酸性環境的特點,常用酸性液體培養基獲得酵母菌的培養液(這樣

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    小鼠胚胎干細胞的培養

    完全培養基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巰基乙醇(GIBCO 21985); 1

    小鼠胚胎干細胞的培養

    實驗概要了解小鼠胚胎干細胞的培養方法。主要試劑1. 貯存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巰基乙醇(55Mm) 轉鐵蛋白50mg/ml 胰島素5mg/ml 亞硒酸鈉300μM 黃體酮(20μM) 腐

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