用hoechst染細胞核測細胞凋亡,怎么樣看結果
1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形胞核深染胞質濃縮染色質團塊狀細胞表面芽現象2、丫啶橙(AO)染色熒光顯微鏡觀察:細胞核呈黃綠色熒光胞質呈紅色熒光凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚核膜內側見細胞膜呈泡狀膨及凋亡體3、臺盼藍染色:細胞膜完整、破裂臺盼藍染料進入細胞細胞變藍即壞死細胞膜完整細胞臺盼藍染色則細胞或凋亡細胞反映細胞膜完整性區別壞死細胞定幫助4、透射電鏡觀察:見凋亡細胞表面微絨毛消失核染色質固縮、邊集呈新月形核膜皺褶胞質緊實細胞器集胞膜起泡或芽及凋亡體凋亡體臨近巨噬細胞吞噬現象......閱讀全文
Hoechst染色實驗
Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結合細胞的DNA ,經過紫外光激發后發出藍色熒光。試劑、試劑盒Hoechst染料二甲基亞砜染料二苯亞胺甲基水楊酸儀器、耗材熒光顯微鏡水浴鍋烘箱培養箱實驗步驟1. ?用水按1:500稀釋1 mg/ml 的Hoechst 染液至終濃度2 μg/ml。將稀釋染
Hoechst染色實驗
試劑、試劑盒 Hoechst染料二甲基亞砜染料二苯亞胺甲基水楊酸儀器、耗材 熒光顯微鏡水浴鍋烘箱培養箱實驗步驟 1. ?用水按1:500稀釋1 mg/ml 的Hoechst 染液至終濃度2 μg/ml。將稀釋染液加于切片上或將玻片浸于染液中,置室溫2 min。2. ?室溫下,在水中洗2 min,晾干
Hoechst染色實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Hoechst染料 二甲基亞砜染料 二苯亞胺 甲基
Hoechst染色方法
實驗概要Hoechst可穿過細胞膜,可結合于活細胞或固定過的細胞。因此可用于活細胞標記。Hoechst染料溶于水和有機溶劑,如二甲基甲酰胺或二甲基亞砜。濃度可高達10mg/mL。水溶液可在4℃避光保存至少6個月。長期儲存于≤-20 ?℃。Hoechst與DNA雙鏈中的小溝(minor ?groove
Hoechst-33258與Hoechst-33342都能染核,二者區別是什么?
Hoechst 33342,也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式為C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量為615.99。Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式為C25H24N6O·3HCl,分子
用-Hoechst33258-測定DNA實驗
實驗方法原理在緩沖液中勻漿細胞或組織,繼用超聲處理。以一定量的細胞懸液與Hoechst33258混勻,測定其熒光。實驗步驟材料非無菌:緩沖液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。Hoechst33258;緩沖液中,1
用-Hoechst33258-測定DNA實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在緩沖液中勻漿細胞或組織,繼用超聲處理。以一定量的細胞懸液與Hoechst33258混勻,測定其熒光。 實驗步驟 材料非無菌:緩沖液:0.05
怎樣將懸浮細胞進行hoechst-染色
將懸浮細胞液體滴在載玻片上,在酒精燈火焰上快速過三遍,使細胞固定。在將載玻片放到含有染液的容器中,染色適當時間,我們做實驗時是一小時,再用酒精脫色兩至三遍。顯微鏡下觀察有凋亡小體即可證明。
Testing-for-Mycoplasma-by-Indirect-DNA-Stain-(Hoechst-33258-stain)
AimDNA staining methods such as Hoechst staining techniques are quick with results available within 24 hours, which compares favorably with 4 weeks fo
方案-21.3-用-Hoechst33258-測定DNA實驗
實驗方法原理在緩沖液中勻漿細胞或組織,繼用超聲處理。以一定量的細胞懸液與Hoechst33258混勻,測定其熒光。實驗步驟材料非無菌:緩沖液:0.05mol/LNaPO4;2.0mol/L NaCl,pH7.4 , 含 2 X l0-3?mol/L EDTA 。Hoechst33258;緩沖液中,1
脂肪干細胞的Hoechst/PI-死活染色介紹
棄掉舊培養基,用D-Hanks 沖洗除去殘留培養基然后向每個Transwell 孔中加入質量濃度為1 mg/mL 的Hoechst 33342 大約10 μL,使其終質量濃度為10 μg/mL,37℃下避光反應10 min。待Hoechst 染色完成后,用D-Hanks 沖洗除凈殘余的Hoech
hoechst-和tunel法檢測細胞凋亡的區別
hoechst法看凋亡,主要是看sub-G1期的細胞數量。原理就是凋亡的細胞,由于DNA正在降解,所以含量比正常細胞要少。在以PI熒光強度(代表DNA量)為橫坐標的柱狀圖上,一般會有2個峰,G1和G2,G1就是正常細胞,G2是正在分裂的2倍體。2者間是S期細胞。如果有凋亡的細胞,在G1前會有細胞出現
利用Hoechst-33342外流性質分選原代角膜間質干細胞
利用Hoechst 33342外流性質分選原代角膜間質干細胞試劑和材料:1.?2—4代的間質細胞;2.?HBSS/2FB;3.?Hoechst 33342染料,1mg/ml水溶;4.?碘化丙啶(PI),2mg/ml水溶;5.?維拉帕米,500μg/ml水溶;6.?DEME/2FB;7.?胰蛋白酶/T
利用Hoechst-33342外流性質分選原代角膜間質干細胞
利用Hoechst 33342外流性質分選原代角膜間質干細胞 試劑和材料: 1.2—4代的間質細胞; 2.H/2FB; 3.Hoechst 33342染料,1mg/ml水溶; 4.碘化丙啶(PI),2mg/ml水溶; 5.維拉帕米,500μg/ml水溶; 6.DEME
貼壁/懸浮細胞及組織切片進行Hoechst染色的方法步驟
Hoechst染色方法1.貼壁細胞1) ? 取普通潔凈蓋玻片于70%乙醇中浸泡5分鐘或更長時間,無菌超凈臺內吹干或用細胞培養PBS或0.9%NaCl等溶液洗滌三遍,再用細胞培養液洗滌一遍。將蓋玻片置于六孔板內,種入細胞培養過夜,使約為50%-80%滿。2) ? 刺激細胞發生凋亡后,吸盡培養液,加入0
用hoechst染細胞核測細胞凋亡,怎么樣看結果
1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形胞核深染胞質濃縮染色質團塊狀細胞表面芽現象2、丫啶橙(AO)染色熒光顯微鏡觀察:細胞核呈黃綠色熒光胞質呈紅色熒光凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚核膜內側見細胞膜呈泡狀膨及凋亡體3、臺盼藍染色:細胞膜完整、破裂臺盼藍染料進入細胞細胞變藍即壞死細胞膜完整細胞臺盼藍染色則
細胞膜完整性及膜轉運功能檢測實驗——HoechstPI-染色法
實驗步驟1. 主要試劑的配制碘化丙錠貯存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。Hoechst 33258 貯存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常規制備單細胞懸液(方法同 PI 染色法),加入 Hoechst 33258 溶液,使其終濃度為 1 μg/ml,37℃ 孵育
側群干細胞(sp細胞)的分離與分選2
這是我收集的SP分選的方法:與大家共享。?一?Hoechst染色方案?1.?在37℃循環水浴箱中預熱DMEM+培養基。確保溫度為37℃。?2.?重懸細胞于預熱的DMEM+培養基中,濃度為106/ml,為了避免細胞留在試管中,所以在Hoechst染色時必須用聚丙烯試管。當要染大量細胞時,在250ml聚
側群干細胞(sp細胞)的分離與分選
準備工作:?DF12?加入0.1%BSA,100ml,取10ml冰浴,40ml放入孵箱;其余的放入4度;?DNase?I?100*;?PI:50ug/ml;?Hoechst33342:?1000ug/ml(all?from?Sigma)?計數板,冰盒;各種離心管,無菌流式管(BD),400濾網(BD
Measurement-of-Green-Fluorescent-Protein-Expression
? Reagents Cells to be studied expressing green fluorescent protein (GFP). Note that the same cell type without GFP is needed as control. Hoechst
活細胞的標記步驟以及注意事項
活細胞的標記步驟以及注意事項是什么耐心看完下文你就會有了答案。用蒸餾水配制貯存液,4攝氏度避光保存。標記時用蒸餾水稀釋100倍。2.吸去細胞培養基。3.用PBS(+)沖洗細胞3次。4.將細胞于Hoechst標記液中室溫下孵育10一30分鐘。S.吸去標記液,并用PBS(+)沖洗3次,然后固定蓋玻片:注
關于細胞凋亡的討論
細胞調亡與壞死鑒別的簡便方法 midas1、PI和Hoechst33342雙標:PI、Hoechst33342均可與細胞核DNA(或RNA)結合。但是PI不能通過正常的細胞膜,Hoechst則為膜通透性的熒光染料,故細胞在處于壞死或晚期調亡時細胞膜被破壞,這時可為PI著紅色。正常細胞和中早期調亡細胞
細胞凋亡與壞死的區別和實驗觀測(二)
細胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹常用的形態學檢測方法。1.光學顯微鏡和倒置顯微鏡凋亡細胞的主要特征為核染色質致密深染,形成致密質塊,有時可碎裂。在HE染色的組織切片中細胞體積縮小,胞質致密、嗜酸性染色增強,并可形成凋亡小體。在組織中凋亡細胞常以分散單個形式存在,凋亡細胞與周圍細胞分離,不引起炎癥反
熒光顯微鏡檢測支原體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 檢測支原體有兩種不同的策略:第一種方法將在下述方案中述及,利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍(在細胞表面或胞質中)的特殊物質進行染色,可顯示支原體污染;第二種方法是利用 DNA 探針
熒光顯微鏡檢測支原體
實驗方法原理 檢測支原體有兩種不同的策略:第一種方法將在下述方案中述及,利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍(在細胞表面或胞質中)的特殊物質進行染色,可顯示支原體污染;第二種方法是利用 DNA 探針識別細胞提取物中的 DNA 支原體特異序列,進行支
熒光顯微鏡檢測支原體
實驗方法原理檢測支原體有兩種不同的策略:第一種方法將在下述方案中述及,利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍(在細胞表面或胞質中)的特殊物質進行染色,可顯示支原體污染;第二種方法是利用 DNA 探針識別細胞提取物中的 DNA 支原體特異序列,進行支原體污染的檢測
熒光顯微鏡檢測支原體
熒光顯微鏡檢測支原體實驗方法原理檢測支原體有兩種不同的策略:第一種方法將在下述方案中述及,利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍(在細胞表面或胞質中)的特殊物質進行染色,可顯示支原體污染;第二種方法是利用 DNA 探針識別細胞提取物中的 DNA 支原體特
流式細胞儀檢測細胞凋亡(雙染色法)實驗步驟注意事項
一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜?的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根
流式細胞儀檢測細胞凋亡——Heochst-33342/PI雙染色
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
流式細胞儀檢測細胞凋亡――Heochst-33342/PI雙染色法
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據