原生質體培養的意義
①植物原生質體是細胞無性系變異和突變體篩選的重要來源;②植物原生質體是細胞融合工作的基礎;③植物原生質體是植物遺傳工程的理想受體和遺傳飾變的理想材料;④在細胞生物學與遺傳理論研究上的應用。......閱讀全文
原生質體培養的意義
①植物原生質體是細胞無性系變異和突變體篩選的重要來源;②植物原生質體是細胞融合工作的基礎;③植物原生質體是植物遺傳工程的理想受體和遺傳飾變的理想材料;④在細胞生物學與遺傳理論研究上的應用。
原生質體的培養
原生質體(Protoplast):指采用機械或酶解法去掉細胞壁的裸露細胞。一、原生質體的應用 由于沒有細胞壁,原生質體為作物遺傳改良和植物學研究提供了極為有利的試驗材料。原生質體可以用于下面幾種研究。1. ?用作細胞雜交服務于作物改良2. ?用作遺傳轉化的對象3. ?研究細胞壁的發生過程4. ?篩選
?原生質體培養技術的概念
原生質體(protoplast):脫去全部細胞壁的細胞叫原生質體,是一生物工程學概念。原生質體是由質膜所包圍的具有生活力的”裸露細胞“。原生質體培養:對離體植物的原生質體進行培養,形成完整植株的培養技術。
原生質體培養的方法介紹
主要有液體淺層培養法、液體懸滴培養、固體平板法、固液雙層培養法(應用最廣泛)、瓊脂糖珠培養法。
?原生質體培養技術的主要來源
主要來源:植物的葉片,根尖,花粉,愈傷組織細胞等。
?原生質體培養技術的定義和特征
定義是指用特殊方法脫去了植物細胞壁的、裸露的、 有生活力的原生質團。沒有細胞壁,但具有活細胞的一切特征。特征①無細胞壁障礙,可以方便地進行有關遺傳操作,并可以對膜,細胞器等進行基礎研究。②具有全能性,并能進行人工培養發育成完整植株。③原生質體適合進行誘導融合形成雜種細胞。
原生質體的概念
原生質體(Protoplast):指采用機械或酶解法去掉細胞壁的裸露細胞。
原生質體培養的植株再生是怎樣形成的
原生質體培養形成的愈傷組織轉移到分化培養基中,可形成不定芽和不定根或形成胚狀體結構后直接發育成植株。由植物器官形成的愈傷組織與由原生質體形成的愈傷組織的植株再生率是不同的。來自植物器官的愈傷組織常帶有已發育的芽或有組織的結構,而這樣的結構在起源于原生質體的愈傷組織中是沒有的。
組織培養之原生質體相關知識介紹
原生質體活力測定:1、形態識別:形態上完整,呈圓形,含有飽滿的細胞質,顏色鮮艷的即為存活的原生質體。2、染色識別:1)0.1%酚番紅或Evans藍染色:有活力的不被染色,死亡的被染上色。2)雙醋酸鹽熒光素(FDA)染色法:在熒光顯微鏡下有熒光的即為有活性的原生質體。原生質體培養方式:液體淺層培養;平
細菌原生質體融合
?一、目的要求:? ? 了解原生質體融合技術的原理.? ? 學習并掌握以細菌為材料的原生質體融合技術.?二、基本原理:? ? 原核微生物基因重組主要可通過轉化、轉導、接合等途徑,但有些微生物不適于采用這些途徑,從而使育種工作受到一定的限制.1978 年第三屆國際工業微生物遺傳學討論會上,有人提出
細菌原生質體融合
一、目的要求:? ? 了解原生質體融合技術的原理.? ? 學習并掌握以細菌為材料的原生質體融合技術.?二、基本原理:? ? 原核微生物基因重組主要可通過轉化、轉導、接合等途徑,但有些微生物不適于采用這些途徑,從而使育種工作受到一定的限制.1978 年第三屆國際工業微生物遺傳學討論會上,有人提出微
植物原生質體的制備
原生質體是指植物細胞去掉細胞壁的裸露部分。它在培養條件下,①具有再生細胞壁,進行連續的細胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有攝取外源大分子、細胞器,以及細菌,病毒的能力,因此是進行遺傳操作,基因轉移的好材料;③通過同種和異種植物的原生質體融合,可產生異核體,實現體細胞雜交,培育出新品種。 實驗原理
植物原生質體的制備
實驗材料 油菜或菠菜或煙草試劑、試劑盒 氯化鈣、蒸餾水、2蔗糖、酶解液儀器、耗材 顯微鏡、離心機、離心管、剪刀、鑷子、吸管、培養皿、載玻片、蓋玻片
原生質體的純化方法
原生質體的純化方法:沉降法、漂浮法、界面法。
植物原生質體的制備
植物原生質體的制備可以用于:(1)由于其具有再生細胞壁,進行連續的細胞分裂并再生成完整植株的能力;(2)具有攝取外源大分子、細胞器,以及細菌,病毒的能力,因此是進行遺傳操作,基因轉移的好材料;(3)通過同種和異種植物的原生質體融合,可產生異核體,實現體細胞雜交,培育出新品種。實驗方法原理去掉植物細胞
概述原生質體的制備
原生質體是植物或微生物細胞去掉壁以后的內含物。原生質體的制備主要是在高滲壓溶液中加入細胞壁分解酶,將細胞壁剝離,結果剩下由原生質膜包住的類似球狀的原生質體,它保持原細胞的一切活性。 制備原生質體首先需要選擇供融合的兩個親株。要求親株的性能穩定并帶有遺傳標記,一般以營養缺陷型和抗藥性等遺傳性狀為
原生質體的應用介紹
由于沒有細胞壁,原生質體為作物遺傳改良和植物學研究提供了極為有利的試驗材料。原生質體可以用于下面幾種研究。1. 用作細胞雜交服務于作物改良2. 用作遺傳轉化的對象3. 研究細胞壁的發生過程4. 篩選突變體5. 膜的結構、運輸、激素接受位點等的研究6. 用于分離細胞器和大分子7. 種質資源保存
原生質體融合的原理
定義:原生質體融合就是將兩個親株的細胞壁分別通過酶解作用加以剝除,使其在高滲環境中釋放出只有原生質膜包被著自球狀原生質體。然后將兩個親株的原生質體在高滲條件下混合,由聚乙二醇助融,使它們相互凝集,通過細胞質融合接著發生兩次基因組之間的接觸、交換、遺傳重組,在再生細胞中獲得重組體原生質體融合技術簡介.
原生質體的活力測定
檢驗原生質體是活細胞還是死細胞染色法:①二乙酸熒光素(FDA)法:FDA本來沒有熒光,當其進入細胞后被脂酶分解為具有熒光的極性物,不能透過質膜,而是留在細胞內發出熒光。因此能發出熒光的是具有活性的原生質體。②酚藏花紅染料法:具有活性的原生質體均不著色,而死去的原生質體立即染成紅色。③伊文思藍染色法:
原生質體融合的原理
兩個具有不同遺傳性狀的細胞,采用適宜的水解酶溶解細胞壁后,在自發情況或融合劑作用下,兩個原生質體接觸,融合成為異核體,經過繁殖復制進一步核融合,形成雜合二倍體,再經過染色體交換產生重組體,達到基因重組的目的,并在適宜的條件下再生出細胞壁,對重組體進行生產性能、生理生化和遺傳特性分析獲得所需重組子。其
怎樣利用原生質體融合與培養技術制造新物種
首先,用酶解或其它方法,制作不同植物的原生質體,然后采用特定的技術將這兩種(或更多種)原生質體融合,再利用細胞培養技術使其增值、分化為小苗,然后移栽,成為健壯的正常植株。這樣,這個植株就是一個新物種。舉例嘛,由于沒有見過,就隨便說說啦,不要當真哈。采用馬鈴薯和番茄的細胞制作原生質體,融合,細胞培養、
酵母原生質體制備
實驗材料?酵母試劑、試劑盒?YPD酵母消解緩沖液山梨醇抽提緩沖液貯存緩沖液液氮儀器、耗材?搖床水浴鍋轉子離心機培養箱實驗步驟 ? 將酵母菌接種于YPD培養基(100 ml 到20 L),劇烈搖動或強制通氣條件下培養至對數中期(OD600≈1~5)。培養物在預稱重的離心瓶中于4℃, 1 500 g 離
什么叫原生質體融合
原生質體是去掉細胞壁的植物細胞,原生質體融合就是植物細胞的融合。常用的方法有振動,電擊,離心,聚乙二醇(PEG)處理等。先用纖維素酶和果膠酶處理原植物細胞,得到原生質體再在培養液中使用上述方法進行融合。這種方法的原理是細胞的流動性。當細胞核完成融合,并且重組細胞重生出細胞壁后,就表明雜種細胞已成功得
原生質體融合的基本介紹
植物體細胞雜交(plant somatic hybridization),又稱原生質體融合(Protoplast fusion )是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有
原生質體分離的分離方法
(1)機械法分離:缺點:產量極低;應用的材料受限制;操作極費力(2)酶法分離:Cocking最早開展這方面研究,克服了機械法分離的缺陷,可分為直接法和順序法兩種。酶法可在短時間內獲得大量原生質體,缺點是:不純的酶制劑所含雜質對原生質體可能有不同程度的毒害作用。
植物原生質體的特點介紹
植物原生質體具有以下的特點: ①無細胞壁的物理障礙; ②能獲得遺傳性狀和生理性狀較一致的細胞群體; ③植物原生質體同樣具有全能性; ④用組織培養方法可進行大量繁殖。 這些有利的特征決定了原生質體是一個極好的實驗體系,在植物育種上有廣泛用途。
簡述原生質體融合的過程
將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理,得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B,運用物理方法或是化學方法誘導融合,形成雜種細胞,再利用植物細胞培養技術將雜種細胞培養成雜種植物體。 雜交時間:植物細胞雜交是從細胞融合開始,到培育成的新植物體結束。 a.原生質體制備:用酶解法去除細胞壁(
?原生質體的分離方法介紹
機械分離法 :常用于分離藻類原生質體,采用滲透方法使細胞發生質壁分離,用刀把細胞壁切破,使原生質體流出。(手工操作難度大,得率低,費時費力)酶解分離法:用酶(瓊脂酶,果膠酶,纖維素酶等)將細胞壁分解。(條件溫和,原生質體完整性好,活力高,得率高) 因此原生質體制備多采用酶解法,此法操作過程分為:取材
原生質體發生融合的介紹
由于在自然條件下,原生質體發生融合的頻率非常低,因此在實際育種過程中要采用一定方法進行人為誘導融合。兩株出發菌株制備好的原生質體可以通過化學因子或電場誘導的方法進行融合。 [3] 化學因子誘導是把兩個親株的原生質體混合在一起,加入融合劑聚乙二醇( polyethylene glycol,PEG
簡述原生質體融合的原理
植物體細胞雜交(plant somatic hybridization),又稱原生質體融合(Protoplast fusion )是指將植物不同種、屬,甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合,然后進行離體培養,使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁,未脫壁的兩個細胞是很難融合的,植物細胞只有