關于克隆實驗的過程介紹
先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細胞分裂繁殖發育成胚胎,當胚胎發育到一定程度后,再被植入動物子宮中使動物懷孕,便可產下與提供細胞者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造,那么無性繁殖的動物后代基因就會發生相同的變化。 克隆技術不需要雌雄交配,不需要精子和卵子的結合,只需從動物身上提取一個單細胞,用人工的方法將其培養成胚胎,再將胚胎植入雌性動物體內,就可孕育出新的個體。這種以單細胞培養出來的克隆動物,具有與單細胞供體完全相同的特征,是單細胞供體的“復制品”。英國英格蘭科學家和美國俄勒岡科學家先后培養出了“克隆羊”和“克隆猴” 。克隆技術的成功,被人們稱為“歷史性的事件,科學的創舉”。有人甚至認為,克隆技術可以同當年原子彈的問世相提并論。 克隆技術可以用來生產“克隆人”,可以用來“復制”人,因而引起了全世界的廣泛關注。對人類來說,克隆......閱讀全文
關于克隆實驗的過程介紹
先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細胞分裂繁殖發育成胚胎,當胚胎發育到一定程度后,再被植入動物子宮中使動物懷孕,便可產下與提供細胞者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造,那么無性繁殖的動物后代基因就會發生相
關于克隆實驗的過程相關介紹
先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細胞分裂繁殖發育成胚胎,當胚胎發育到一定程度后,再被植入動物子宮中使動物懷孕,便可產下與提供細胞者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造,那么無性繁殖的動物后代基因就會發生相
關于細胞克隆的取材過程介紹
在無菌環境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養器皿中,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首次培養稱為原代培養。理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養,實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成
關于單克隆抗體的制備過程介紹
1.免疫動物 免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產生致敏B淋巴細胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫器官,刺激相應B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細胞。 2.細胞融合 采用二
關于克隆實驗的基本內容介紹
克隆實驗中克隆是英文"clone"或"cloning"的音譯,而英文"clone"則起源于希臘文"Klone",原意是指幼苗或嫩枝,以無性繁殖或營養繁殖的方式培育植物,如扦插和嫁接。在大陸譯為“無性繁殖”在臺灣與港澳一般意譯為復制或轉殖或群殖。中文也有更加確切的詞表達克隆,“無性繁殖”、“無性系
關于克隆實驗的基本信息介紹
克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖,以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體組成的種群。通常是利用生物技術由無性生殖產生與原個體有完全相同基因組織后代的過程。科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫克隆,這門生物技術叫克隆技術,其本身的含義是無性繁殖,即由同一個祖先細胞分裂繁殖而形成的純細胞
細胞克隆實驗的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌
單克隆抗體的提純實驗過程
1.材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液20mMol/LNaCl(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液40mMol/LNaCl(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液80mMol/LNaCl(4)20mMol/LpH7.8~
關于單克隆抗體細胞融合的過程介紹
融合的方法很多,常用的有轉動法和離心法。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。 1.試劑與材料 (1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。 (2)1640培養液100ml。 (3)完全1640液100ml。 (4)2.5%FCS-1640液50ml。
關于植物克隆實驗的簡介
許多植物都有先天克隆的本領。例如,從一棵大柳樹上剪下幾根枝條插進土里,枝條就會長成一株株活潑可愛的小柳樹;把馬鈴薯切成許多小塊種進地里,就能收獲許多新鮮的馬鈴薯;把仙人掌切成幾塊,每塊落地不久就會生根,長成新的仙人掌……此外,一些植物可以通過壓條或嫁接培育后代。凡此種種,都是植物的克隆。
關于克隆PCR產物的對照實驗相關介紹
A)涂布未轉化的感受態細胞。 如有菌落,表明氨芐失效,或污染上帶有氨芐抗型的質粒,或產生氨芐抗型的菌落。 B)轉化完整質粒,計算菌落生長數,測定轉化效率。 例如,將1ug/ul質粒1:100稀釋,1ul用于100ul感受態細胞轉化。用SOC稀釋到1000ul后,用100ul鋪板。培養過夜,
克隆的基本過程
先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中,利用微電流刺激等使兩者融合為一體,然后促使這一新細胞分裂繁殖發育成胚胎,當胚胎發育到一定程度后,再被植入動物子宮中使動物懷孕,便可產下與提供細胞核者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造,那么無性繁殖的動物后代基因就會發生相同
單克隆抗體的融合過程介紹
1.試劑與材料(1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。(2)1640培養液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(5)HAT培養液100ml。(6)50%PEG:取分子量4000,高純度的(日本進口或Serva)PEG10g放入25ml瓶中高壓滅菌,使用前
有限稀釋法克隆抗體的過程介紹
1.材料(1)微量培養盤,盤內各孔于克隆化前一天培養小鼠腹腔細胞(即飼養細胞)每孔2萬~4萬。(2)HT培養基2.操作方法(1)取出抗體陽性孔細胞,用HT培養液制成細胞懸液。并取樣進行臺盼蘭染色,計數。(2)用HT培養液將細胞稀釋成200個/ml、40個/ml、20個/ml和的懸液。(3)用吸管將細
關于單克隆抗體的克隆方法介紹
1.配2.5%的瓊脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。 2.將117ml完全DMEM液和3ml10倍濃度的DMEM液混合,置45℃水浴預熱。 3.將瓊脂糖與DMEM液混合,即為含0.5%瓊脂糖的完全DMEM液,并加75×108脾細胞。 4.每塊平皿加10ml,于室溫中凝固。 5.
關于免疫共沉淀的實驗過程介紹
(1)轉染后24-48 h 可收獲細胞,加入適量細胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C, 最大轉速離心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜;(3)取10μl
關于細胞克隆的基本介紹
細胞培養(cell culture)是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個必不可
亞克隆的基本過程
亞克隆的基本過程包括:(1)目的DNA片段和載體的制備;(2)目的DNA片段和載體的連接;(3)連接產物的轉化;(4)重組子篩選。
DNA的克隆過程概述
DNA的克隆是指在體外將含有目的基因或其它有意義的DNA片段同能夠自我復制的載體DNA連接,然后將其轉入宿主細胞或受體生物進行表達或進一步研究的分子操作的過程,因此DNA克隆又稱分子克隆,基因操作或重組DNA技術。DNA克隆涉及一系列的分子生物學技術,如目的DNA片段的獲得、載體的選擇、各種工具酶的
關于耐輻射球菌的實驗過程介紹
據了解,科學家通過電鏡對耐輻射球菌觀察時,發現致密有序的雙鏈斷裂碎片的環狀堆積結構在DNA的重組修復起著十分重要的作用。此外,大量未知功能的特殊基因或修復酶也可能極大貢獻于這種極端抗性。 在耐輻射球菌的一個天然突變中,華躍進等研究人員發現了一個重要的功能基因被一個轉座子插入失活,導致了這個突變
關于復制型基因的克隆介紹
將目的基因仍保留在染色體以外的克隆系統稱為復制型基因克隆系統,以區別整合到染色體上的整合型克隆系統。盡管有大量不同的噬菌體,但所有已知的乳球菌復制型克隆系統都是由質粒構建的。 乳球菌遺傳學研究證明,乳球菌含有數量不等的質粒,多則十幾個。它們當中一些編碼重要的代謝物質,為了分析和克隆這些基因,以
關于多克隆抗體的基本介紹
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除
關于分子克隆化的基本介紹
分子克隆技術是70年代才發展起來的,它的出現和應用開辟了分子遺傳學研究的新領域,打開了人類了解、識別、分離和改造基因,創造新物種的大門。它的成就對于工業、農牧業和醫學產生深遠影響,并將為解決世界面臨的能源、食品和環保三大危機開拓一條新的出路。
關于細胞克隆的所需環境介紹
1.無菌環境 無毒和無菌是體外培養細胞的首要條件。細胞在活體內,解毒系統和免疫系統可抵抗微生物或其他有害物質的入侵,但細胞在體外培養的過程中,缺乏機體免疫系統的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質的解毒能力。為保證細胞能在體外環境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區域、良好的個人衛生、無菌試劑
簡述細胞克隆的培養過程
將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養,則直接將組織塊接入培養器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養基。如系細胞培養,一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數,按要求以一定的量(以每毫升細胞數表示)接入培養器皿并直接加入培養基。細胞進入培養器皿后,立即放入培養
關于細胞克隆的營養條件的介紹
1.培養基 細胞培養基包含細胞生長所需的各種營養物質,包括碳水化合物、氨基酸、無機鹽、維生素等。針對不同細胞的營養需求,有多種合成培養基可供選擇,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。 2.其他添加成分 在各種合成培養基提供基礎營養物質之外,還需根據不同細胞和不同的
關于單克隆抗體有限稀釋法克隆法介紹
1.材料 (1)微量培養盤,盤內各孔于克隆化前一天培養小鼠腹腔細胞(即飼養細胞)每孔2萬~4萬。 (2)HT培養基 2.操作方法 (1)取出抗體陽性孔細胞,用HT培養液制成細胞懸液。并取樣進行臺盼蘭染色,計數。 (2)用HT培養液將細胞稀釋成200個/ml、40個/ml、20個/ml和
關于單克隆抗體技術的介紹
一種免疫學技術,將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞進行細胞融合, 獲得既能產生抗體, 又能無限增殖的雜種細胞,并以此生產抗體。是僅由一種類型的細胞制造出來的抗體,對應于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細胞制造出來的一種抗體。 單克隆抗體技術(monoclonal antibody t
關于單克隆抗體的定義介紹
單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細胞生產的,雜交瘤細胞是由一個經抗原激活后的B細胞與一個骨髓瘤細胞融合形成。單克隆抗體優點:純度高,靈敏度高,特異性強,交叉反應少,制備的成本低。缺點:對技術有一定的要求,而且通過抗原的化學處理很容易丟失表位 [1] ?。
關于單克隆抗體的基本介紹
單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。 用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,