使用熒光底物的直接ELISA實驗
實驗概要使用熒光偶聯一抗的直接 ELISA 測定的程序。實驗步驟第 1 天：1. 在濾過的 PBS 中稀釋包被抗體后，在每孔中加入 100 μl 進行包被。用封板膜覆蓋酶標板，將酶標板在 4℃下孵育過夜。 第 2 天：2. 將 4 g Block ACE 粉末稀釋于 100 ml 去離子水中，使用其 1:4 稀釋液在每孔中加入 200 μl，在室溫下封閉酶標板 3 小時，封閉期間用封板膜覆蓋酶標板。3. 洗滌酶標板：PBS-T (0.05% Tween20) 250 μl/孔；3x 30 s。在洗滌或抽吸后，將酶標板翻轉置于工作臺的無塵紙上以除去多余的液體。4. 取 100 μl 剛剛在 10% BlockACE 的 PBS-T 溶液中稀釋的標準品或樣品，上樣到酶標板，并在 4℃下孵育過夜，孵育期間用封板膜覆蓋酶標板。提前制備標準品。 在將標準品上樣到酶標板的當天（第二天），現將標準品在例......閱讀全文
使用熒光底物的直接－ELISA－實驗
實驗概要使用熒光偶聯一抗的直接 ELISA 測定的程序。實驗步驟第 1 天：1.?在濾過的 PBS 中稀釋包被抗體后，在每孔中加入 100 μl 進行包被。用封板膜覆蓋酶標板，將酶標板在 4℃下孵育過夜。 第 2 天：2.?將 4 g Block ACE 粉末稀釋于 100 ml 去離子水中，使用其
使用熒光底物的直接－ELISA－實驗方案
實驗概要使用熒光偶聯一抗的直接 ELISA 測定的程序。實驗步驟第 1 天：1.?在濾過的 PBS 中稀釋包被抗體后，在每孔中加入 100 μl 進行包被。用封板膜覆蓋酶標板，將酶標板在 4℃下孵育過夜。 第 2 天：2.?將 4 g Block ACE 粉末稀釋于 100 ml 去離子水中，使用其
使用一抗的直接－ELISA－實驗方案
實驗概要本實驗提供了一個使用一抗的直接 ELISA 實驗方案。主要試劑1. 碳酸氫鹽/碳酸鹽包被緩沖液 (100 mM) 應將抗原或抗體在包被緩沖液中稀釋，從而將它們固定到孔上： 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸餾水 pH 9.62. PBS: 1.16 g
使用一抗的直接－ELISA－實驗方案
實驗概要本實驗提供了一個使用一抗的直接 ELISA 實驗方案。主要試劑1. 碳酸氫鹽/碳酸鹽包被緩沖液 (100 mM) 應將抗原或抗體在包被緩沖液中稀釋，從而將它們固定到孔上： 3.03 g Na2CO3 6.0 g NaHCO3 1000 ml 蒸餾水 pH 9.62. PBS: 1.16 g
熒光底物有哪些
（一）熒光色素 許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素.只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料.常用的熒光色素有： 異硫氰酸熒光素2.四乙基羅丹明 3.四甲基異硫氰酸羅丹明4.藻紅蛋白（二）其他熒光物質 1.酶作用后產生熒光的物質：某
直接－ELISA法
實驗概要ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的
直接ELISA法
實驗概要ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的
ELISA中的試劑（3）－酶的底物
3.3 酶的底物?3.3.1 HRP的底物?HRP催化過氧化物的氧化反應，最具代表性的過氧化物為H2O2，其反應式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無色化合物，經酶作用后成為有色的產物，以便作比色測定。常用的供氫體有鄰苯二
ELISA標本處理不當直接影響實驗操作
一、標本的影響 ? ?溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質（紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以完全洗脫，它可使H2O2釋放出原生態氧（O），從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質，即顯藍色，產生假陽性。所以嚴重溶血標本
直接免疫熒光
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
免疫熒光技術直接法測抗原實驗步驟
直接法測抗原⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01m
ELISA實驗中酶標儀的使用要求
第一、溫度條件的要求1.為延緩光學部件的老化，應避免陽光直射。2.操作環境溫度應在15℃至40℃之間，環境濕度在15%~85%之間。3.操作時電壓應保持穩定。4.操作環境空氣清潔，避免水汽、煙塵。5.保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。6.儀器應放置在噪音低于40分貝的環境下。7.儀
免疫熒光技術直接法測抗原的實驗步驟介紹
① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，10min后棄去，使標本保持一定濕度。 ② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間（參考：30min）。 ③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按
ELISA實驗必看；ELISA試劑盒使用操作要點
酶聯免疫吸附試驗（ELISA）?因其操作簡單，靈敏度高，特異性好，經濟安全等特點而在臨床上廣泛應用，但是由于其操作步驟復雜，一般包括試劑準備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結果判定等，其中任何一項操作不當都會對檢測結果產生很大影響。因此，必須加強ELISA檢測的全面質量控制，保證其結果的準
免疫熒光直接法測抗原法的原理和實驗步驟
⑴基本原理將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低；而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）：0.01mol/L，p
直接免疫熒光的技術特點
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
用于酶聯免疫測定（ELISA）酶的色原底物
辣根過氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD)、2，2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2，2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6)，ABTS](雜環吖嗪)、四甲基聯苯胺(TMB)和4—氨基安替比林：苯酚耦聯底
免疫熒光技術——直接法
免疫熒光技術可應用于：（1）研究特異蛋白抗原在細胞內分布；（2）對抗原進行細胞定位；（3）對特定抗原進行定量檢測。內容來源：組織培養和分子細胞學技術。（北京出版社）實驗方法原理直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應，形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度，確定相應抗原的存
酶聯免疫吸附實驗—直接細胞ELISA法檢測細胞表面抗原
實驗步驟直 接 細 胞 ELISA 法檢測細胞表面抗原在測定單一細胞群體的抗原表達水平時，該 檢 測 過 程（圖 1.1. 5 ) 與流式細胞分析一 樣 靈 敏（單 元 4.1、單 元 4. 2)。但在檢測混合細胞時，敏感性不及流式細胞分析。用生物素化的抗體替代酶標抗體，就可轉化為間接方法，而后加入
直接免疫熒光抗體法的定義
中文名稱直接免疫熒光抗體法英文名稱direct immunofluorescence antibody method定 義直接用熒光素標記的抗體檢測抗原的一種免疫標記技術。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
直接免疫熒光抗體法的定義
中文名稱直接免疫熒光抗體法英文名稱direct immunofluorescence antibody method定 義直接用熒光素標記的抗體檢測抗原的一種免疫標記技術。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
酶的特性實驗—底物專一性
實驗原理 酶的專一性是指一種酶只能對一種底物或一類底物（此類底物在結構上通常具有相同的化學鍵）起催化作用，對其他底物無催化反應。如淀粉酶只能催化淀粉水解，對蔗糖的水解并無催化作用。淀粉水解產物為葡萄糖，蔗糖水解產物為果糖及葡萄糖，這兩種己糖的半縮醛基可與 Benedict試劑反應，生成氧化亞
ELISA直接法和間接法優缺點
直接法（direct ELISA）將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優勢：操作手續簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。缺點：試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。間接法（indirect ELISA）此測定方
凝膠中激酶直接分析實驗——－直接分析
蛋白激酶的分析是使用標記的供體底物，當酶樣品中含有磷酸轉移酶活性時，蛋白 質或多肽受體底物中標記物的積累就很容易被檢出。實驗方法原理鹽酸胍或脲都能使蛋白質變性，選用哪一種取決于不同的激酶，但一般首選鹽酸胍，因為對大多數激酶而言它的變性效果更好。實驗材料10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶樣品試
底物化學發光使用方法
1. 印跡膜制備 按常規方法完成SDS-PAGE和電轉膜操作,適當的封閉非常重要。可以通過標記一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交聯物。仔細地淋洗對于降低背景非常重要,在與HRP交聯物溫育后,膜片更需仔細洗滌,所有步驟均在室溫下完成。2. 化學發光試劑的配置 在使用前等量混合a液和
ELISA三種常見測定方法及原理分析
酶聯免疫吸附測定法（ELISA）是一種使用酶標儀進行測定的免疫測定法，用于檢測和定量生物分子，例如抗體、蛋白質、激素或肽，以及表征蛋白質-蛋白質和蛋白質-核酸相互作用。在ELISA中，將用于實驗的靶標（通常是抗原）固定在固體表面上，然后用辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）的酶綴合抗體進行檢
在定量測定抗原時，直接elisa與間接elisa有何區別
直接競爭ELISA和間接競爭ELISA區別 1、直接競爭，標記抗原，與檢測樣品中的抗原競爭抗體。 2、間接競爭，標記抗體，固相抗原與液相抗原（樣品）競爭標記抗體。 3、定義 間接競爭法的模型：包被抗原，用HRP-抗體與樣本一起加入。樣本中的Ag與Solid-Ag競爭HRP-Ab，固相吸附的H
用肉眼可直接觀察的新型Elisa技術介紹
由于考慮有些老師們沒有時間或沒有實驗設備，上海勁馬公司提供elisa試劑盒的專業代測服務，可緩解有些實驗室的資金問題。而根據*新資訊與發現，研究人員開發了新型Elisa酶聯免疫吸附技術，當抗體識別目標分子時這種酶就會生成有色物質，用肉眼可直接觀察，下面是這種新型的Elisa技術介紹：[新型Elisa
底物的定義
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。
底物的定義
底物為參與生化反應的物質，可為化學元素、分子或化合物，作用可形成產物。一個生化反應的底物往往同時也是另一個化學反應的產物。