特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排出自己的代謝產物和其它一些物質，其中有排泄物，也有促細胞生長物質。有人稱之為化學信使，具有促克隆細胞生長作用，實則為生長因子類物質。單細胞同化營養液能力不如群體細胞強；初代培養細胞、有限細胞系（二倍體細胞）不如無限細胞系、轉化細胞和腫瘤細胞強。轉化細胞和腫瘤細胞強的原因，可能與它們有自泌（ Autocrine）和內泌（Endocrine），即自己合成生長因子能力有關。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材離心機濾膜實驗步驟一、適應性培養基1. 培養同源細胞（未克隆前時的同一細胞）至半匯合狀態時，更換一次......閱讀全文
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排
特殊細胞培養實驗_多孔塑料培養板單細胞克隆法
實驗方法原理多孔塑料培養板克隆細胞的主要過程是1. ?制備出1~2 細胞/毫升低密度的細胞懸懸液；2. ?向多孔塑料培養板各孔中分別接種細胞懸液0.5~1 ml，則每孔平均含1 個細胞。3. ?鏡下檢測每孔所含細胞數，標記下含單細胞的孔，置溫箱培養，數日后凡在已標記的孔中有生長增殖的細胞群即為克隆細
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型，則無須做任何處理，在傳代時先做離心處理去除舊培養液，添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時，因其有貼附性，必須進行干擾使細胞不能貼附，才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
特殊細胞培養實驗
一、二倍體細胞培養法 加支持物培養法 單細胞分離培養法 多孔塑料培養板單細胞克隆法 球體細胞培養實驗 微載體細胞培養法 懸浮培養法
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲
特殊細胞培養實驗_加支持物培養法
實驗方法原理加支持物培養法是預先向培養容器中加入各種可使細胞貼附的支持物，進行培養的方法。待細胞貼附于支持物生長增殖后，可進行各種實驗和觀察。觀察時可把支持物從瓶中抽出，能做各種技術處理，是研究工作中常用的方法之一。各種對細胞無毒性的如玻璃、塑料、雞卵殼膜、膠原、硅橡膠、袋泡茶包裝紙等，均可做支持物
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
特殊細胞培養實驗_一、二倍體細胞培養法
實驗方法原理二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲得
單細胞培養培養方法介紹看護培養法
有些植物細胞，一旦分離出來，不僅不能分裂、增殖，還可能死亡。看護培養法是用一塊愈傷組織來哺育單細胞，使其正常分裂和增殖的培養方法。用微量移液管或小勺，將來自懸浮培養物或愈傷組織的單細胞轉移到漂浮的定量濾紙上，濾紙下是旺盛生長的愈傷組織。幾天之后，在愈傷組織看護影響下，在一般培養基中沉寂的細胞開始分裂
單細胞培養培養方法介紹平板培養法
將制備好的單細胞懸浮液，按照一定的細胞密度，接種于適當厚度的薄層固體培養基上進行培養的方法，稱為平板培養。等量的單細胞培養液與等量熔化(30～50℃)的瓊脂培養基(0．6%～1%)混合，迅速鋪板于培養皿中，瓊脂冷卻凝固后，細胞分布均勻地被固定在薄層(厚度大約1mm)培養基中。培養皿用石蠟膜封閉，在2
單細胞培養培養方法介紹微室培養法
人工制造一個小室，將單細胞培養在小室中的少量培養基上，使其分裂、增殖形成細胞團的方法，稱為微室培養法，亦稱為雙層蓋玻片法。其操作是將攜帶1個細胞的1滴培養基置于無菌載玻片上，并用無菌礦物油包圍培養基液滴。再分別在培養基液滴的兩側滴1滴礦物油，在每一礦物油滴上放一張蓋玻片。然后，把第三張蓋玻片放在培養
單細胞培養培養方法介紹細胞懸浮培養法
用液體培養基對保持良好的分散狀態的單個細胞或小的細胞聚集體于搖床上進行培養的方法，稱為細胞懸浮培養法(cell suspension culture)。依據培養目的不同，可分為淺層培養和深層培養。淺層培養是指使培養材料的一部分裸露于液體培養基表面，采用靜止培養的方式，適用于各種器官和組織的培養。深層
細胞培養實驗室的特殊設備簡介
細胞培養實驗室除了應配備上述的常用基本設備以外，如有條件，可添置一些特殊或先進的設備儀器，以便更有效、更精確、更深入地進行實驗室工作。例如： （1）酶聯免疫檢測儀——可用于進行免疫學測定及細胞毒性、藥物敏感性檢測等。 （2） 超低溫冰箱（-80℃）——便于儲存某些試劑及標本。 （3）旋轉培
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于：（1）分子生物學；（2）細胞生物學；（3）遺傳學；（4）免疫學；（5）腫瘤學；（6）病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經胰酶消化，
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養，是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官，在體外培養，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長
初代細胞培養實驗——消化培養法
初代培養或原代培養，可以用于：（1）從供體獲取組織后的首次培養；（2）組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理合成培養基胰蛋白酶消化培養法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細
單細胞培養的基本介紹
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞，在無菌條件下，進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早，但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現
單細胞培養技術的概念
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞，在無菌條件下，進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早，但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現的。
病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織，特別是腫瘤組織，經多次傳代可建立傳代細胞系，這種細胞能無限地傳代，某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣，可用作病毒的分離鑒定，如HeLa 細胞，Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞，HeLa 細胞來自子宮頸癌，Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊（1cm3）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止；2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養
單細胞培養的定義及介紹
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞，在無菌條件下，進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早，但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現
單細胞培養有哪些注意要點？
單細胞培養從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞，在無菌條件下，進行體外生長、發育的技術，人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早，但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現的。 細胞間實現信號傳遞交流，采用三明治方式將P
單細胞培養的方法有哪些
1.轉瓶培養這個比較老的工藝，在逐步淘汰，不過投資少，技術含量低，人員經少量培訓就可以操作。2.懸浮培養非貼壁依賴性細胞的一種培養方式。細胞懸浮于培養基中生長或維持。某些貼壁依賴性細胞經過適應和選擇也可用此方法培養。增加懸浮培養規模相對比較簡單，只要增加體積就可以子。深度超過5mm，需要攪動培養基，
細菌平板劃線分離培養法實驗
（1）曲線劃線分離法：此法多用于含菌量不多的標本或培養咽拭、棉拭所取的培養物，將標本或咽拭、棉拭培養物直接涂布于培養基的 1/5 處，然后用接種環或直接用咽拭（棉拭）作曲線連續劃線接種。（2）分區劃線分離法：此法多用于含菌量較多的糞便等標本的細菌分離培養。先用接種環取糞便標本，將其涂布在培養基的
細菌平板劃線分離培養法實驗
實驗步驟（1）曲線劃線分離法：此法多用于含菌量不多的標本或培養咽拭、棉拭所取的培養物，將標本或咽拭、棉拭培養物直接涂布于培養基的 1/5 處，然后用接種環或直接用咽拭（棉拭）作曲線連續劃線接種。（2）分區劃線分離法：此法多用于含菌量較多的糞便等標本的細菌分離培養。先用接種環取糞便標本，將其涂布在培養
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神