病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織，特別是腫瘤組織，經多次傳代可建立傳代細胞系，這種細胞能無限地傳代，某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣，可用作病毒的分離鑒定，如HeLa 細胞，Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞，HeLa 細胞來自子宮頸癌，Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上顎癌。由于這幾種傳代細胞有致腫瘤作用，目前僅用做病毒的分離鑒定及一些病毒學研究，不能用于疫苗的生產。實驗步驟將成片細胞的生長液倒掉，用Hank's 液洗一次。加入適量的0.1～0.25% 胰蛋白酶，37 ℃孵育1 分鐘。將細胞倒放，細胞在上，胰酶在下，繼續孵育37 ℃5～10 分鐘。將胰蛋白酶倒掉，再加入原量的生長液，用10 毫升吸管吹打分散細胞。用生長液按原量3-4 倍稀釋，即一瓶細胞能傳3-4 瓶。病毒接種及CPE 觀察：①取已長成單層細胞的培養瓶二只，用無菌毛細滴管吸去管中液體。②用無菌的1 毫升吸管吸稀釋的腺病毒液0.......閱讀全文
病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織，特別是腫瘤組織，經多次傳代可建立傳代細胞系，這種細胞能無限地傳代，某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣，可用作病毒的分離鑒定，如HeLa 細胞，Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞，HeLa 細胞來自子宮頸癌，Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功，細胞生長增殖形成單層細胞后，進而擴展匯合，占滿一切空間，此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代，細胞會因增殖過度，培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿（瓶）內進行
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡
細胞培養傳代培養的實驗方法
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。為了保持細胞正常的二倍體核型，傳代培養一般
細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于：（1）醫學研究；（2）提供細胞種。（3）進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、
細胞培養傳代培養的方法
1．懸浮生長細胞傳代多采用離心法傳代。1000轉/分,20-30秒后去上清。沉淀細胞加新培養液后再混勻傳代。亦有直接傳代法，即懸浮細胞沉淀在瓶壁時，將上清培養液去除1/2-1/3，然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代.2．半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但貼壁不牢，可
細胞培養傳代培養的實驗原理
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。
細胞培養傳代培養的實驗步驟
實驗步驟1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去
原代細胞培養和傳代培養的方法
原代培養 原理 將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用 EDTA 或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖這一過程稱原代培養。 儀器、材料及試劑 儀器：培養箱（調整至 37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸
傳代細胞培養與觀察
實驗概要了解傳代細胞的傳代方法及操作過程，學習觀察體外培養細胞的形態及生長狀況。實驗原理傳代培養是指細胞從一個培養瓶以1：2或1：2以上的比例轉移，接種到另一培養瓶的培養。這種培養，第一步也是制備細胞懸液，當細胞長成致密單層時，它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破壞。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(
細胞培養傳代培養的培養步驟
1、附著型胞(adherentcell)（1）吸掉舊培養液。（2）用D-PBS洗滌細胞一至二次。（3）加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2)，37℃作用數分鐘，于倒立顯微鏡下觀察，當細胞將要分離而呈現圓粒狀時，吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去tryps
細胞培養傳代培養的定義
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養的過程。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養（subculture），當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速
病毒的培養方法實驗——雞胚培養法
病毒必須在易感的活細胞內才能增殖，因此，根據不同病毒選擇敏感動物，離體組織細胞和雞胚進行分離培養。實驗方法原理雞胚培養方法操作簡便，適用于流感病毒，痘病毒，皰疹病毒和腦炎病毒等的培養。最常用的雞胚接種方法有四種，即絨毛尿囊膜接種法，羊膜腔（羊水囊）接種法，尿囊腔接種法和卵黃囊接種法。根據不同病毒和不
常規細胞培養方法（原代培養和傳代培養）
原理將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。儀器、材料及試劑儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血
其它源細胞培養傳代及凍存方法
其它源細胞培養傳代及凍存：???細胞的復蘇培養:從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時不斷搖動使之迅速融化，然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接
細胞培養傳代培養的實驗步驟和注意事項
實驗步驟1．入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3．超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去
關于細胞培養的細胞傳代介紹
細胞密度達到80%~90%時．去培養基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放入細胞培養箱3min。加人1ml DMEM完全培養基終止胰酶消化，轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養盤，轉移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。再加
病毒的培養方法實驗——動物接種法
實驗方法原理注意選擇動物種類，年齡。按病毒侵襲部位的不同，選擇適宜的接種途徑，例如腦炎病毒以注射腦內最敏感。接種后經一定潛伏期，動物發病或死亡即進行解剖。根據動物的癥狀表現，器官病理改變，受染臟器組織懸液能在同種動物進行連續傳代，并排除其他微生物污染的可能性等，即可證明有病毒的增殖。實驗材料小白鼠實
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型，則無須做任何處理，在傳代時先做離心處理去除舊培養液，添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時，因其有貼附性，必須進行干擾使細胞不能貼附，才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
細胞培養傳代培養所需材料
1、無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’sphosphate-bufferedsaline,Ca++/Mg++free,D-PBS, GibcoBRL21600-010)2、trypsin-EDTAsolution(0.05%trypsin-0.53mMEDTA-4Na,GibcoBRL25300
細胞培養傳代培養的材料和器材
材料和器材材料：培養瓶，試管，移液管，巴斯德吸管，廢液缸，75%酒精棉球，酒精燈，培養細胞。藥品：培養基(RPMI1640或DMEM)，小牛血清或胎牛血清，0.25%胰蛋白酶，Hank's液。儀器：CO?培養箱，倒置顯微鏡，超凈臺。
初代細胞培養實驗——消化培養法
初代培養或原代培養，可以用于：（1）從供體獲取組織后的首次培養；（2）組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理合成培養基胰蛋白酶消化培養法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細
脂肪干細胞培養和擴增實驗_脂肪干細胞的傳代培養
分離獲得ASC后，可以通過連續傳代使其生長和擴增。原代培養后，傳代2?3次，ASCs呈現單層，大而扁的細胞形態，其直徑在25?30μm。待細胞達到匯合時，它們形態上呈紡錘體形，類似于成纖維細胞。來源：《人干細胞培養》實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒ASC培養基PBSA胰蛋白酶儀器、耗材組織培養瓶 25
病毒的培養方法實驗—組織培養法原代細胞單層培養
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法，其優點是①經濟適用，結果正確且敏感；②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法，是指動物（包括脊椎動物和無脊椎動物）的組織自機體取出后，經胰酶或其他細胞分散劑消化處理，得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中，加入細胞生長所必需的營養液，置合
細胞傳代、培養的方法
實驗原理：將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時 也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養
單細胞培養培養方法介紹平板培養法
將制備好的單細胞懸浮液，按照一定的細胞密度，接種于適當厚度的薄層固體培養基上進行培養的方法，稱為平板培養。等量的單細胞培養液與等量熔化(30～50℃)的瓊脂培養基(0．6%～1%)混合，迅速鋪板于培養皿中，瓊脂冷卻凝固后，細胞分布均勻地被固定在薄層(厚度大約1mm)培養基中。培養皿用石蠟膜封閉，在2
單細胞培養培養方法介紹看護培養法
有些植物細胞，一旦分離出來，不僅不能分裂、增殖，還可能死亡。看護培養法是用一塊愈傷組織來哺育單細胞，使其正常分裂和增殖的培養方法。用微量移液管或小勺，將來自懸浮培養物或愈傷組織的單細胞轉移到漂浮的定量濾紙上，濾紙下是旺盛生長的愈傷組織。幾天之后，在愈傷組織看護影響下，在一般培養基中沉寂的細胞開始分裂
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排