非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1．經典法（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H2 O混懸，用3%磷鎢酸(pH6.0)負染20Sec～30Sec，滴加于400目銅網Fomnvar膜上，用濾紙從銅網邊緣輕輕吸去多余的負染液。（6）在透射電鏡下4×104 倍觀察。2．快速法(瓊脂擴散法)（1）同經典法(1)、(2)步驟，制備免疫復合物。（2）以生理鹽水或pH 7.2巴比妥緩沖液制備1%瓊脂糖，趁熱澆注于潔凈的載玻片上，每片3ml，待冷卻凝固后，在凝膠面上等距離放置直徑4mm玻璃珠數粒，再于凝膠面上澆注1%瓊脂糖2ml～3ml，冷卻凝固后，取出玻璃珠，使凝膠形成凹孔。（3）將普通濾紙剪成2×3cm大小，......閱讀全文
非標記抗體免疫電鏡操作步驟
1．經典法（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H2?
非標記抗體免疫電鏡的操作步驟
1．經典法?（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫?血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃過夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min離心90min。（4）吸去上清，將離心管口倒置于濾紙上，吸去殘留液體。（5）沉淀物中加少量H
非標記抗體免疫電鏡
原理 ? 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對
非標記抗體免疫電鏡技術
（一）??原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應
非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗
實驗方法原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要 本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。 實驗原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
(一) 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
非標記抗體免疫電鏡技術原理、材料和操作方法
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗——經典法
不標記抗體法通過系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的抗原進行定位檢測。分為用標記物顯示和不同標記物顯示兩種方法。用于（1）抗體觀察（2）免疫學研究。實驗方法原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有
熒光素標記抗體的操作步驟
? ? ? ? ? ?FITC熒光素標記抗體的操作步驟??????www.runwelltac.com當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴
免疫學技術專題：非標記抗體免疫電鏡技術
一、原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的
FITC熒光素標記抗體的操作步驟
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下：F
免疫電鏡膠體金標記法操作大全
金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原?反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金
非標記抗體免疫電鏡實驗——快速法(瓊脂擴散法)
實驗方法原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
免疫電鏡相關技術實驗——酶標記免疫電鏡技術
實驗方法原理該技術是以酶為抗原—抗體反應的標記物，在不改變抗原抗體的免疫反應特異性，亦不降低酶活性條件下，與相應底物作用后形成不溶性的反應物。在電鏡下形成為電子散射力強的終末產物。用于免疫電鏡標記的酶有辣根過氧化物酶 (HRP)堿性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
斷裂標記免疫電鏡技術（2）
)超薄切片法步驟:①至⑤同臨界點干燥法。⑥1%鋨酸，室溫固定2h，系列酒精或丙酮脫水，常規電鏡包埋。⑦切半薄片，光鏡定位合適的斷裂部位，再切超薄切片，鈾鉛染色，透射電鏡觀察。斷裂標記法目前文獻報告應用較多的是植物凝集素-膠體金免疫標記技術，常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 膠體金免疫標記技術.C
斷裂標記免疫電鏡技術（1）
斷裂-標記免疫電鏡技術此法是先進行冷凍斷裂，再做免疫標記，從而可以對斷裂開的各種膜結構及胞漿斷面進行標記。(1)臨界點干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h，PBS沖洗3min×3。如為細胞懸液，可加入30%BSA后加入1%戊二醛，使BSA凝膠化，將凝膠切成2mm左右的小塊，用3
斷裂—標記免疫電鏡技術介紹
此法是先進行冷凍斷裂，再做免疫標記，從而可以對斷裂開的各種膜結構及胞漿斷面進行標記。（1）臨界點干燥法①固定：1.0%～2.5%戊二醛PBS液4℃1～2h，PBS沖洗3min×3。如為細胞懸液，可加入30%BSA后加入1%戊二醛，使BSA凝膠化，將凝膠切成2mm左右的小塊，用30%的甘油—PBS浸透
免疫電鏡相關技術實驗——膠體金標記免疫電鏡技術
實驗材料病毒試劑、試劑盒膠體金儀器、耗材電子顯微鏡實驗步驟免疫膠體金標記技術又稱免疫金染色技術 (immunogold staining technique), 是 Faulk 和Taylor 于 1971 年發現直徑為 5~50nm 的膠體金 (colloidal gold) 在電鏡下具有很高的電
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
鐵蛋白免疫電鏡技術原理和操作步驟
實驗概要本文介紹了鐵蛋白免疫電鏡技術的原理、材料試劑和操作方法等。實驗原理免疫鐵蛋白技術是以鐵蛋白標記抗體，再以鐵蛋白抗體與待檢抗原作用。通過電鏡檢查，觀察到鐵蛋白抗體所在的位置，即抗原所在。主要試劑1．馬脾鐵蛋白2．硫酸銨3．硫酸鎘4．雙異氰酸鎘二甲苯(Metaxylene dlisocyante
冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術
冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術(1)新鮮或固定的細胞進行直接法或間接法免疫標記。(2)PBS(pH7.5)沖洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸餾水洗洗3min×3，離心沉集細胞。(3)將細胞團置于小紙板上，入液氮冷卻的Freon中，取出入冷凍蝕刻儀中進行斷裂操作，再于-100℃蝕刻1mi
免疫電鏡膠體金標記法
第四節 免疫電鏡膠體金標記法 金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，
簡述酶標記抗體的方法步驟
1、HRP標記抗體的方法 酶與抗體交聯的方法有許多種,根據酶的結構不同可采用不同的方法。對于制備HRP結合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。 戊二醛二步法 原理 戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白
冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術介紹
（1）新鮮或固定的細胞進行直接法或間接法免疫標記。（2）PBS（pH7.5）沖洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸餾水洗洗3min×3，離心沉集細胞。（3）將細胞團置于小紙板上，入液氮冷卻的Freon中，取出入冷凍蝕刻儀中進行斷裂操作，再于-100℃蝕刻1min 。（4）制做斷裂面復型。
免疫電鏡膠體金標記法2
（4）膠體金與蛋白A的結合和純化，依上法測得所需的比例超過10%，即每30ml膠體中加入2mg蛋白A，5min后，加入0.3ml PEG作為穩定劑，然后以15000r/min離心45min（不同方法制備的金離心速度不同），略帶紅色的松散的復合物沉淀即為PAg復合物。小心棄去上清液，加入PBS沖洗
免疫電鏡膠體金標記法1
金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金標