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  • 溶解受體的凝集素親和層析實驗

    本實驗介紹關于溶解受體的凝集素親和層析過程。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素(受體級)豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材一次性小型塑料柱實驗步驟材料與設備麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖(~2.5 ml 沉積的微球)(Vector Laboratories,Inc.ALI023 或 EY Laboratories,Inc.A2101)溶解的胰島素受體(得自實驗 2)一次性小型塑料柱(Bio-Rad Laboratories)牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰島素(受體級)(DuPont NEN NEX 196)豬胰島素〔17.5umol/L(0.1 mg/ml),于 0.001mol/L HCl 中〕(Sigma Chemical Co.I3505)牛γ-球蛋白(0.4%, 于......閱讀全文

    溶解受體的凝集素親和層析實驗

    試劑、試劑盒 麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素(受體級)豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材 一次性小型塑料柱實驗步驟 材料與設備麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖(~2.5 ml 沉積的微球)(Vector Laborat

    溶解受體的凝集素親和層析實驗

    本實驗介紹關于溶解受體的凝集素親和層析過程。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素(受體級)豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材一次性小型塑料柱實驗步驟材料與設

    溶解受體的凝集素親和層析實驗

    溶解受體的凝集素親和層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖 溶解的胰島素受體

    凝集素親和層析的應用

    免疫親和層析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫親和色譜,是利用生物體內存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進行分離的方法。 親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。

    凝集素親和層析的原理

    簡單來說,親和層析利用流動相和固定相內不同生物分子之間相互作用強度的差異來分離物質。通常,在開始親和層析前需要預先進行全細胞提取物的粗制,例如細胞裂解液,生長培養基或血清。首先將固定相裝入帶有流動相的色譜柱中,其中含有某類特定的生物大分子(從DNA到蛋白質,取決于實驗需求)。等待一段時間使兩相充分混

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    刀豆素 A 親和柱純化蛋白質 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如,刀豆素 A(Con A)與糖蛋白含有的葡萄糖

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    實驗方法原理 用于親和層析的凝集素應根據它們結合的特異性和緊密度加以選擇。例如,刀豆素 A(Con A)與糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖結合,而麥芽凝集素只與具 N-乙酰葡糖胺的蛋白質結合。胞膜糖蛋白常與麥芽凝集素結合,而可溶性糖蛋白卻通常用 Con A 或扁豆凝集素親和柱純化。由于在許多情

    凝集素親和層析法純化蛋白質實驗

    凝集素是能可逆性結合碳水化合物的蛋白質。因為絕大多數凝集素至少每個分子有兩個碳水化合物結合部位,所以它們可以沉淀糖蛋白和凝集細胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的親和配基,具有單糖的糖蛋白可用溫和的蛋白質冼脫條件分離。雖然凝集素親和層折沒有很高的選擇性,但是無疑它已成為蛋白質純化的一種常用方法。它通常作為

    凝集素親和層析的原理和應用

    中文名稱凝集素親和層析英文名稱lectin affinity chromatography定  義將凝集素以共價形式與不溶性載體相連接作為親和吸附劑的層析技術。可用于從混合物中分離或分析糖類及糖復合物,如多糖、糖蛋白、細胞膜碎片、酶、抗體復合物等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術

    細胞膜受體的凝集素受體的介紹

      凝集素是從各種植物或低等動物組織中分離而得到的一類特殊蛋白質,能與動植物細胞表面的受體發生特異性結合產生一系列的生理效應。它們通過與細胞表面寡糖結構決定簇的交互作用導致細胞發生凝集,因而又稱凝集素。最早發現它們能誘導紅細胞發生凝集而用于臨床血型分類,故又有植物血凝素之稱。已報道的凝集素多達500

    蛋白質糖基化的檢測實驗——植物凝集素親和層析

    試劑、試劑盒TBS儀器、耗材植物凝集素柱實驗步驟1. 在含有 Ca2+、Mg2+?的 TBS 中平衡植物凝集素親和介質,用至少 20 個柱體積清洗。2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制備 1 ml 植物凝集素柱。3. 以緩慢流速(小于 0.25 ml/min)將蛋白樣本上柱,回收所有過柱子

    胰島素受體的溶解及活性測定實驗

    試劑、試劑盒 純化的鼠肝質膜牛血清白蛋白 [125I] 胰島素豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 結合緩沖液儀器、耗材 Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管實驗步驟 材料與設備純化的鼠肝質膜(得自實驗 1)Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125

    胰島素受體的溶解及活性測定實驗

    胰島素受體的溶解及活性測定實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 純化的鼠肝質膜 牛血清白蛋白 [125I]

    胰島素受體的溶解及活性測定實驗

    試劑、試劑盒純化的鼠肝質膜牛血清白蛋白[125I] 胰島素豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C結合緩沖液儀器、耗材Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管實驗步驟材料與設備純化的鼠肝質膜(得自實驗 1)Ti 70 轉頭和帶蓋的聚丙烯離心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰島素

    凝集素受體的基本信息介紹

      凝集素是從各種植物或低等動物組織中分離而得到的一類特殊蛋白質,能與動植物細胞表面的受體發生特異性結合產生一系列的生理效應。它們通過與細胞表面寡糖結構決定簇的交互作用導致細胞發生凝集,因而又稱凝集素。最早發現它們能誘導紅細胞發生凝集而用于臨床血型分類,故又有植物血凝素之稱。已報道的凝集素多達500

    凝集素親和層析法在免疫層析測試的應用

    一種基于免疫層析測試(ICT)試紙的親和層析測試。有別于普通臨床檢測,該試紙提供了快速的診斷手段。使用ICT,技術人員無需使用實驗室,即可在患者的床邊進行測定。 ICT檢測對引起感染的微生物高度特異。

    膜蛋白的純化實驗(二)

    三、膜蛋白的純化一 旦 使 用 了 合 適 的 去 污 劑 將 膜 蛋 白 從 細 胞 膜 中 増 溶 出 來 ,就 可 以 分 離 目 標 蛋 白 質 了 。傳 統 色 譜 層 析 技 術 ,如 凝 膠 過 濾 、親 和 、離 子 交 換 和 層 析 聚 焦 (chromatofocusi

    親和層析實驗

    可溶性抗原或膜結合抗原的分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒

    親和層析實驗

    實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 TrisTSA裂解緩沖液脫氧膽酸鈉洗滌緩沖液三乙醇氨緩沖液儀器、耗材 層析柱離心管離心機實驗步驟 1. ?準備一支活化后被淬滅的Sepharose預柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫親和層析柱,并將它們串聯起來。2. ?以冰冷TSA溶液重懸50 g 細

    親和層析(affinity-chromatography)的應用

    親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。1.抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合于親和層析基質上,就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白質的濃度通常較低,用離

    關于非經典C-型凝集素受體的簡介

      與經典的 C 型凝集素受體相比,非經典C 型凝集素受體具有類似的CTLD 結構,但該結構域中缺少與Ca2+ 結合的保守基序,識別配體是Ca2+非依賴的。非經典 C 型凝集素樣受體編碼基因主要定位于 NK 基因復合物 (natural killer gene complex,NKC),人的定位于

    生化實驗講義(理論部分)——層析技術(十一)

    3.4.5 親和層析的應用親和層析的應用主要是生物大分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用于純化各種生物大分子的情況。抗原和抗體利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合于親和層析基質上,就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白

    親和層析的操作實驗

    試劑、試劑盒 非特異性競爭 DNA液氮緩沖液 Z緩沖液 Ze 柱再生緩沖液 柱保存緩沖液儀器、耗材 EconoCoIumn 柱實驗步驟 材料與設備EconoCoIumn 柱。(Bio Rad Laboratories731-1550)非特異性競爭 DNA液氮試劑緩沖液 Z緩沖液 Ze柱再生緩沖液柱保

    親和層析的操作實驗

    親和層析的操作實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 非特異性競爭 DNA 液氮 緩沖液 Z

    親和層析的操作實驗

    試劑、試劑盒非特異性競爭 DNA液氮緩沖液 Z緩沖液 Ze柱再生緩沖液柱保存緩沖液儀器、耗材EconoCoIumn 柱實驗步驟材料與設備EconoCoIumn 柱。(Bio Rad Laboratories731-1550)非特異性競爭 DNA液氮試劑緩沖液 Z緩沖液 Ze柱再生緩沖液柱保存緩沖液(

    免疫親和層析實驗

    試劑、試劑盒 免疫親和介質溴化氰(CNBr) 活化的 Sepharose 4BHCl55% 飽和 AMS 沉淀物偶聯緩沖液乙醇胺緩沖液 BLAC 洗脫緩沖液二硫蘇糖醇硫氰酸鉀疊氮鈉儀器、耗材 Econo-柱SDS-PAGE 電泳裝置實驗步驟 材料與設備免疫親和介質(帶固定化的 MAb NT73; 見

    免疫親和層析實驗

    試劑、試劑盒免疫親和介質溴化氰(CNBr)活化的 Sepharose 4BHCl55% 飽和 AMS 沉淀物偶聯緩沖液乙醇胺緩沖液 BLAC 洗脫緩沖液二硫蘇糖醇硫氰酸鉀疊氮鈉儀器、耗材Econo-柱SDS-PAGE 電泳裝置實驗步驟材料與設備免疫親和介質(帶固定化的 MAb NT73; 見下文)溴

    免疫親和層析實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 免疫親和介質 溴化氰(CNBr) 活化的 Sepharose 4B HCl 55% 飽和 AMS 沉淀物 偶聯緩沖液

    親和層析實驗技術方法

    INTRODUCTIONThis protocol describes a method for removing antibodies that react with bacterially encoded proteins by passing a crude preparation of im

    親和層析實驗:常規方法

    實驗步驟一、親和介質的選擇親和純化的成功取決于是否選擇了合適的固相載體和配基。理想的親和介質 (如吸附配基的固相載體)應該具備孔隙大、理化性質高度穩定的特征。親和介質可以選擇性的捕獲相應耙標,既保證較弱的非特異性吸附,又可以在整個過程中維持良好的流動特征。優選介質應具備便宜、易獲取和使用簡便的特點。

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