用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮(或其他有機溶劑如乙醇或甲醇)儀器、耗材Eppendorf 管(小塑料離心管)Eppendorf 管離心機(小型臺式離心機)混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 樣品溶液,混勻。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型臺式離心機離心 5 min。4. 棄去上清液,使沉淀風干。5. 于 1~2 倍沉淀體積的緩沖液中再懸浮沉淀。注意事項1. 反復用丙酮洗滌和沉淀蛋白質 。2. 通過延長 -20℃ 的放置時間,達 2 h 以上,再用 27 000 × g 離心 10 min,可以定量沉淀小于 1 ug 蛋白質。3. 中性鹽提高蛋白質在有機溶劑中的溶解度,二價陽離子降低蛋白質在有機溶劑中的溶解度。......閱讀全文
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 鹽酸 丙酮 甲醇
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇實驗步驟 材料鹽酸(高純;如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)丙酮(高純;如 Aldrich 的金標級)甲醇(高純;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)操作程序本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecu
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通過將去垢劑溶于有機相而蛋白質產生沉淀以去除樣品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中,因此不會發生相分離。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒鹽酸丙酮甲醇實驗步驟材料鹽酸(高純;如 J,T
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇實驗步驟 材料鹽酸(高純;如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)丙酮(高純;如 Aldrich 的金標級)甲醇(高純;如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)操作程序本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecu
丙酮沉淀法具體怎么做
1、在4度下,1:1或相應比例向蛋白質中加入丙酮(一般用20%-50%的丙酮沉淀蛋白),在冰域中溫和的攪拌10-15分鐘;2、低溫10000g離心10分鐘,除去上清液,用以沉淀體積的2倍體積的冷緩沖液懸浮。丙酮沉淀應該注意的是:1、此過程容易使蛋白質變性,所以有很多情況下復溶的時候會出現沉淀不溶的現
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮(或其他有機溶劑如乙醇或甲醇)儀器、耗材Eppendorf 管(小塑料離心管)Eppendorf 管離心機(小型臺式離心機)混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 樣品溶液,混勻。2. -20℃: 放置 10 min。3. 小型臺式離
苯丙酮尿
苯丙酮尿為較常見的先天性常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝紊亂疾病。苯丙酮酸尿癥患者,由于肝內苯丙氨酸羥化酶缺乏或不足,不能使苯丙氨酸轉化為酪氨酸,只能在轉氨酶作用下生成苯丙酮酸。游離苯丙氨酸及苯丙酮酸在患者血液、腦脊液和體內蓄積,對神經系統造成損害并影響體內色素代謝。大量的苯丙酮酸可自尿內排出,有特殊鼠
分步沉淀法工藝
浸銅后渣經過硫酸化焙燒后,將酸化渣漿化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸鹽的形式存在于溶液中,要將這些硫酸鹽分離比較困難。浸銅后渣硫酸鹽分離沉淀過程是按銀、銅、鎳的先后順序進行析出的。因此要實現其分離,簡單可行的方法是將這些金屬離子轉化成鈉鹽或碳酸鹽的沉淀。因此本體系中所選擇的藥劑是碳酸鈉。而經酸化焙
沉淀法的原理
從液相中產生一個可分離的固相的過程,或是從過飽和溶液中析出的難溶物質。沉淀作用表示一個新的凝結相的形成過程,或由于加入沉淀劑使某些離子成為難溶化合物而沉積的過程。產生沉淀的化學反應稱為沉淀反應。物質的沉淀和溶解是一個平衡過程,通常用溶度積常數Ksp來判斷難溶鹽是沉淀還是溶解。溶度積常數是指在一定溫度
糞便檢測沉淀法
實驗方法原理?適用于大多數蠕蟲卵及部分原蟲包囊的檢測。可分為自然沉淀法、離心沉淀法及汞碘醛離心沉淀法。實驗步驟 1. 自然沉淀法(1)以玻棒挑取糞便20~30g,通過40~60目銅篩調勻濾入盛滿清水的錐形玻璃量杯中,靜置25分鐘;(2)傾去上層糞液,僅留沉淀物,再加滿清水,按每隔20分鐘換水1次,反
化學沉淀法簡介
向廢水中投加某些化學物質,使它和廢水中欲去除的污染物發生直接的化學反應,生成難溶于水的沉淀物而使污染物分離除去的方法。但由于化學法普遍要加入大量的化學藥劑,并成為沉淀物的形式沉淀出來。這就決定了化學法處理后會存在大量的二次污染,如大量廢渣的產生,而這些廢渣的處理目前尚無較好的處理處置方法,所以對
糞便檢測沉淀法
實驗方法原理適用于大多數蠕蟲卵及部分原蟲包囊的檢測。可分為自然沉淀法、離心沉淀法及汞碘醛離心沉淀法。實驗步驟1. 自然沉淀法(1)以玻棒挑取糞便20~30g,通過40~60目銅篩調勻濾入盛滿清水的錐形玻璃量杯中,靜置25分鐘;(2)傾去上層糞液,僅留沉淀物,再加滿清水,按每隔20分鐘換水1次,反復3
丙酮怎么測含量
氣相色譜法,外標測定。FID檢測器、氮氣為載氣、用非極性或者弱極性的色譜柱就能測出來。我查了一個方法是藥典的鹽酸氨溴索用(5%)二苯基-(95%)二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管柱。進樣口溫度120℃,檢測器溫度260 ℃。程序升溫:初始溫度50℃,保持5分鐘,以每分鐘8℃升至145℃,然后以每分鐘
丙酮怎么測含量
氣相色譜法,外標測定。FID檢測器、氮氣為載氣、用非極性或者弱極性的色譜柱就能測出來。我查了一個方法是藥典的鹽酸氨溴索用(5%)二苯基-(95%)二甲基硅烷共聚物為固定相的毛細管柱。進樣口溫度120℃,檢測器溫度260 ℃。程序升溫:初始溫度50℃,保持5分鐘,以每分鐘8℃升至145℃,然后以每分鐘
乙酰丙酮的簡介
乙酰丙酮(acetylacetone)是一種有機化合物,分子式為C5H8O2,具有無色或微黃易流動的透明液體,有酯的氣味,冷卻時凝成有光澤的晶體的性質。受光作用時,轉化成褐色液體,并且生成樹脂。用作醋酸纖維素的溶劑,有機合成中間體,金屬絡合劑,涂料干燥劑,潤滑劑、殺蟲劑。
簡述丙酮的用途
丙酮是重要的有機合成原料,用于生產環氧樹脂,聚碳酸酯,有機玻璃,醫藥,農藥等。亦是良好溶劑,用于涂料、黏結劑、鋼瓶乙炔等。也用作稀釋劑,清洗劑,萃取劑。還是制造醋酐、雙丙酮醇、氯仿、碘仿、環氧樹脂、聚異戊二烯橡膠、甲基丙烯酸甲酯等的重要原料。在無煙火藥、賽璐珞、醋酸纖維、噴漆等工業中用作溶劑。在
蛋白濃縮方法基本
蛋白濃縮方法基本有:?丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……?1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。?2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!?3,硫酸銨沉淀法:利用高濃
蛋白濃縮(protein-concentration)基本方法
蛋白濃縮方法基本有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法:得有特異性抗體! 3.硫酸銨沉淀法
簡述分步沉淀法工藝
浸銅后渣經過硫酸化焙燒后,將酸化渣漿化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸鹽的形式存在于溶液中,要將這些硫酸鹽分離比較困難。 浸銅后渣硫酸鹽分離沉淀過程是按銀、銅、鎳的先后順序進行析出的。因此要實現其分離,簡單可行的方法是將這些金屬離子轉化成鈉鹽或碳酸鹽的沉淀。因此本體系中所選擇的藥劑是碳酸鈉。而
分步沉淀法工藝介紹
浸銅后渣經過硫酸化焙燒后,將酸化渣漿化后cu、Ni、Fe、Ag均以硫酸鹽的形式存在于溶液中,要將這些硫酸鹽分離比較困難。浸銅后渣硫酸鹽分離沉淀過程是按銀、銅、鎳的先后順序進行析出的。因此要實現其分離,簡單可行的方法是將這些金屬離子轉化成鈉鹽或碳酸鹽的沉淀。因此本體系中所選擇的藥劑是碳酸鈉。而經酸化焙
絮凝沉淀法的概述
即選用無機絮凝劑和有機陰離子配制成水溶液加入廢水中,便會產生壓縮雙電層,使廢水中的懸浮微粒失去穩定性,膠粒物相互凝聚使微粒增大,形成絮凝體、礬花。絮凝體長大到一定體積后即在重力作用下脫離水相沉淀,從而去除廢水中的大量懸浮物,從而達到水處理的效果。為提高分離效果,可適時、適量加入助凝劑。
TCA沉淀法定量DNA
1. Dilute radioactive sample to a 100 ml volume2. Spot 5 ml of the sample onto the center of a 2.4 cm Whatman GF/C glass-fiber disc.3. Mix 5 ml of the
什么是化學沉淀法
1、概念化學沉淀法是指向廢水中投加某些化學藥劑(沉淀劑),使之與廢水中溶解態的污染物直接發生化學反應,形成難溶的固體生成物,然后進行固液分離,從而除去水中污染物的一種處理方法。2、去除對象廢水中的重金屬離子(如汞、鎘、鉛、鋅、鎳、鉻、鐵、銅等)、堿土金屬(如鈣和鎂)及某些非金屬(如砷、氟、硫、硼)均
分步沉淀法除鐵
鐵無論在鎳系統還是在銅系統都是一種不易除去的雜質,鐵量越高,則電效越低,還影響鎳和銅的化學品級率,因此將金屬回收工段作為銅和鎳系統的主要排雜工序。然而要想用中和承解法將含鐵30g/L的漿化浸出液中的鐵除去,不但不好過濾,且鎳、銅損失較大。因此冶煉廠采用的除鐵工藝是黃鈉鐵礬除鐵法工藝。(1)溫度:從黃
蛋白濃縮方法
蛋白濃縮方法基本有:?丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……?1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法?試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。?2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!?3,硫酸銨沉淀法:利用高濃
蛋白的濃縮方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸銨沉淀法;(低溫)有機溶劑沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。2,免疫沉淀法:得有特異性抗體!3,硫酸銨沉淀法:利用高濃度鹽將蛋白質析出(鹽析)選擇
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100%三氯醋酸(TCA)0.1N NaOH(400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水)實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100% 的三氯醋酸(TCA),混勻;2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min (或在冷凍
丙酮的計算化學數據
疏水參數計算參考值(XlogP):-0.1氫鍵供體數量:0氫鍵受體數量:1可旋轉化學鍵數量:0互變異構體數量:2拓撲分子極性表面積:17.1重原子數量:4表面電荷:0復雜度:26.3同位素原子數量:0確定原子立構中心數量:0不確定原子立構中心數量:0確定化學鍵立構中心數量:0不確定化學鍵立構中心數量
丙酮酸鹽利用試驗
酵母浸出粉? 5g 磷酸氫二鉀? 5g 氯化鈉? 5g 丙酮酸鈉? 10g 麝香草酚藍? 104mg 蒸餾水? 1000ml 除指示劑外,上述試劑加熱溶解,調整?pH7.1~7.4后,再加指示劑,用13mm×l00mm試管分裝,高壓121℃?15min。 方法:接種被檢菌株于上述培養基中,孵育35℃
丙酮流量表簡介
LWGY系列丙酮流量表是吸取了國內外流量儀表先進技術經過優化設計,具有結構簡單、輕巧、精度高、復現性好、反應靈敏,安裝維護使用方便等特點的新一代丙酮流量表,廣泛用于測量封閉管道中與不銹鋼1Cr18Ni9Ti、2Cr13及剛玉Al2O3、硬質合金不起腐蝕作用,且無纖維、顆粒等雜質,工作溫度下運動粘度小