用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min （或在冷凍箱內放置 15 min ）；3. 10 000 ×g 離心 5 min；4. 棄去上清并用吸管吸凈殘留液；5. 將沉淀再懸浮于50～100％ 0.1N NaOH 溶液，混勻。展開 注意事項1. 用 TCA 沉淀蛋白質，所需最低的蛋白質濃度是 5 ug／ml。2. 有時需要用 10％ TCA 或乙醇-乙醚（1：1）洗滌 TCA 沉淀的蛋白質，以除去 TCA。3. 第 5 步不用 NaOH 溶液再懸浮 TCA 沉淀，而是用乙醇-乙醚（1：1 ）洗滌 TCA 沉淀 ，并用緩沖液再懸浮沉淀，可能更易操作。4. 脫氧膽酸鹽三氯醋酸（D......閱讀全文
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——三氯醋酸沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30 min （或在冷凍
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料含蛋白質的樣品試劑、試劑盒丙酮（或其他有機溶劑如乙醇或甲醇）儀器、耗材Eppendorf 管（小塑料離心管）Eppendorf 管離心機（小型臺式離心機）混旋器實驗步驟1. 加 1 ml冷丙酮（-20℃）至 200 ul 樣品溶液，混勻。2. -20℃： 放置 10 min。3. 小型臺式離
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
三氯醋酸沉淀法 丙酮沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 含蛋白質的樣品
用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 實驗材料?含蛋白質的樣品試劑、試劑盒?100％三氯醋酸（TCA）0.1N NaOH（400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸餾水）實驗步驟 1. 在 1ml 樣品中至少要含有 5mg 蛋白質。加 100 ul 100％ 的三氯醋酸（TCA），混勻；2. 將蛋白質在冰浴中沉淀 30
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定的金黃色葡萄球菌，以確保形成大量沉淀。這些細菌通過蛋白質 A 和抗體形成復合物，蛋白質 A 與免疫球蛋白的 Fe 部分有高度的親和性。或者說，純化的蛋白質
免疫沉淀法濃縮蛋白質實驗
免疫沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過免疫沉淀，用蛋白質特異性抗體能夠定量分離目的蛋白。免疫沉淀法由三個步驟組成。首先將特異性抗體加入細胞提取物，第二步加入經化學固定
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗——有機溶劑沉淀法
實驗方法原理將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑的濃度按體
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
有機溶劑沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左
有機溶劑沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 將有機溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白質溶液時，和高濃度鹽類似產生沉淀，這是因為它們能夠降低蛋白質的溶解度。在溫度為 10 ℃ 左右時蛋白質在有機溶劑中容易變性，所以在沉淀時必須特別注意冷卻溶液和離心轉頭（0 ℃～4 ℃ 為佳），建議離子強度為 0.05～0.2 mol/L。有機溶劑
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
硫酸銨沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低，形成沉淀的子衡時間短等特點，使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30％ 時，蛋白質就能夠達到最大量沉淀。實驗材料蛋
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
聚乙二醇法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散
聚乙二醇沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 聚乙二醇（PEG）是一個非離子水溶性多聚體，使用 PEG 沉淀蛋甶質時，只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低，形成沉淀的子衡時間短等特點，使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30％ 時，蛋白質就能夠達到最大量沉淀。
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗
實驗方法原理 當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、
硫酸銨沉淀法濃縮蛋白質實驗——硫酸銨沉淀法
實驗方法原理當高濃度鹽存在時，蛋白質往往凝聚并析出沉淀。這一技術稱為「鹽析」。不同的蛋白質在不同濃度的鹽中形成沉淀，所以鹽析常用于蛋白質的分離純化。幾種因素如 pH 、溫度、蛋白質純度在測定各種蛋白質的鹽析時起著重要作用。選擇硫酸銨是因為它具有一些優良性質，如鹽析的有效性、pH 范圍廣、溶解度高、溶
蛋白濃縮方法基本
蛋白濃縮方法基本有：?丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……?1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。?2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！?3，硫酸銨沉淀法：利用高濃
蛋白濃縮（protein－concentration）基本方法
蛋白濃縮方法基本有：丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法：得有特異性抗體！ 3.硫酸銨沉淀法
醋酸鈉乙醇沉淀法核酸純化實驗
實驗方法原理 核酸是多聚陰離子的水溶性化合物，可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類，后者在有機溶劑中不溶解也不變性．在較低溫度下形成沉淀．實驗材料 待純化樣本試劑、試劑盒 醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟 實驗試劑：1. 3mol／L醋酸鈉緩沖液，pH5.2：稱取醋酸鈉（NaAC·3H20）4
醋酸鈉乙醇沉淀法核酸純化實驗
實驗方法原理核酸是多聚陰離子的水溶性化合物，可以與許多1價、2價離子結合形成鹽類，后者在有機溶劑中不溶解也不變性．在較低溫度下形成沉淀．實驗材料待純化樣本試劑、試劑盒醋酸鈉緩沖液無水乙醇70%乙醇實驗步驟實驗試劑：1. 3mol／L醋酸鈉緩沖液，pH5.2：稱取醋酸鈉（NaAC·3H20）408.1
蛋白濃縮方法
蛋白濃縮方法基本有：?丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……?1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法?試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。?2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！?3，硫酸銨沉淀法：利用高濃
蛋白的濃縮方法
丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！3，硫酸銨沉淀法：利用高濃度鹽將蛋白質析出（鹽析）選擇
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 鹽酸 丙酮 甲醇
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇實驗步驟 材料鹽酸（高純；如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)丙酮（高純；如 Aldrich 的金標級)甲醇（高純；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)操作程序本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecu
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
TCA 沉淀的另一有用的替代方法是使用酸化的丙酮-甲醇混合液。酸化有助于通過將去垢劑溶于有機相而蛋白質產生沉淀以去除樣品中的 SDS。丙酮和甲醇都能以任何比例溶解于水中，因此不會發生相分離。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒鹽酸丙酮甲醇實驗步驟材料鹽酸（高純；如 J,T
酸化丙酮/甲醇沉淀法實驗
試劑、試劑盒 鹽酸丙酮甲醇實驗步驟 材料鹽酸（高純；如 J,T-Baker 的 Ultrex 級)丙酮（高純；如 Aldrich 的金標級)甲醇（高純；如 Aldrich 或 Burdick&Jackson 的最同市售級)操作程序本操作程序是根據 Current Protocolsin Molecu
有機沉淀法總蛋白提取實用小教程
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質，而且是具有潛力的新一代營養保健食品，因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要，讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 ? 一、實驗目的 ? 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法，了解其意義及其應用價值。 ? 二
慢病毒的濃縮與純化——超速離心沉淀法
實驗概要本實驗介紹了用超速離心沉淀法濃縮與純化慢病毒的操作步驟。主要試劑1. 70%乙醇2. 20%的蔗糖溶液3. PBS緩沖液主要設備1. Ultra-clear SW28離心管2. 超凈工作臺3. 紫外燈4. 10ml移液管5. Beckman SW28 超速離心轉頭6. 高速離心機7. 50m
有機沉淀法總蛋白提取
從植物葉片提取的植物總蛋白不但是家養類動物生長發育的重要營養物質，而且是具有潛力的新一代營養保健食品，因而掌握植物葉蛋白的提取方法至關重要，讓我們一起了解這整個實驗原理和過程吧。 一、實驗目的 熟悉植物葉蛋白的幾種提取原理和方法，了解其意義及其應用價值。 二、實驗原理 植
蛋白質含量測定法凱氏定氮法
本法系依據蛋白質為含氮的有機化合物，當與硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化時使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定，根據酸的消耗量算出含氮量，再將含氮量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。 本法靈敏度較低，適用于0.2～2.0mg氮的測定。氮