體細胞融合實驗——懸浮培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG1000儀器、耗材離心管實驗步驟1. 從無血清培養基中沉淀雜交前體細胞。2. 倒盡上清。3. 用手指彈撥管底或雙手搓轉離心管，使細胞重新懸浮。4. 加入 1 ml PEG1000，待 2 分鐘。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培養基稀釋 PEG。于室溫，200 g 離心 5 分鐘沉淀細胞。6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培養基，輕輕轉動離心管重懸細胞，盡量不要打碎細胞，按步驟 5 重新沉淀細胞。7. 最后一次以適量生長培養基重懸細胞，24~48 小時后加入選擇培養基。8. 篩選細胞：融合 12~24 小時后就可以進行異核體分析。展開......閱讀全文
體細胞融合實驗——懸浮培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG1000儀器、耗材離心管實驗步驟1. 從無血清培養基中沉淀雜交前體細胞。2. 倒盡上清。3. 用手指彈撥管底或雙手搓轉離心管，使細胞重新懸浮。4. 加入 1 ml PEG1000，待 2 分鐘。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培養基稀釋 PEG。于室溫，20
體細胞融合實驗——單層培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG-1000儀器、耗材培養基實驗步驟1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度（80% 匯合率）。2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基，加 2 ml 50% PEG-1000，輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。3. 往培養皿或瓶中
體細胞融合實驗
單層培養細胞的融合 懸浮培養細胞的融合 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試
體細胞融合實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 PEG-1000儀器、耗材 培養基實驗步驟 1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度（80% 匯合率）。2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基，加 2 ml 50% PEG-1000，輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。3. 往培養
體細胞融合實驗
單層培養細胞的融合 懸浮培養細胞的融合 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試
體細胞雜交實驗——單層全細胞融合實驗
實驗材料匯合至一定程度的受體細胞試劑、試劑盒受體細胞適合生存的培養基合適的選擇性試劑含感興趣染色體及合適遺傳標記的供體細胞儀器、耗材10 cm 組織培養板25 cm 組織培養瓶倒置相差顯微鏡實驗步驟基本方案 單層全細胞融合1.倘若不知道細胞的選擇條件，通過以下方式來確定：將培養于 25 cm 培養瓶
單克隆抗體細胞融合的融合劑的介紹
細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如滅活的仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定，與許多化
單克隆抗體細胞融合
單克隆抗體細胞融合（一）融合劑?細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機
細胞融合實驗
實驗方法原理細胞融合的誘導物種類很多．常用的主要有滅活的仙臺病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和電脈沖。目前應用zui廣泛的是聚乙二醇，因為它易得、簡便，且融合效果穩定。PEG的促融機制尚不完全清楚，它可能引起細胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團發生結
細胞融合實驗
實驗概要掌握細胞融合原理、應用融合細胞的方法以及細胞融合率的計算。實驗原理細胞融合(Cell ?fusion)，即在自然條件下或用人工方法(生物的、物理的、化學的)使兩個或兩個以上的細胞合并形成一個細胞的過程。人工誘導的細胞融合，在六十年代作為一門新興技術而發展起來。由于它不僅能產生同種細胞融合，也
單克隆抗體細胞融合劑
細胞融合的方法有物理法，如電融合、激光融合，化學融合法和生物融合法，如仙臺病毒，此處例舉化學融合法中的一種即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇（PEG），在分子量為200～700時，呈無色、無臭的粘稠狀液體，分子量大于1 000時，呈乳白色蠟狀固體，能溶于水、乙醇及其他許多有機溶劑，對熱穩定，與許
細胞融合的融合過程
細胞膜有內外兩層，細胞融合首先發生在外層，然后再到內層，由此就出現了兩種融合通道，細胞體內物質通過這兩種通道轉移。病毒膜與目標細胞融合時，只出現一種融合通道，即導致融合的基因只能在病毒中找到，而在目標細胞中卻找不到。但是，通過EFF-1發生的細胞融合則是一個雙向融合過程，需要EFF-1出現在兩個
細胞融合實驗的實驗原理
根據Burnet的抗體選擇學說，一個B淋巴細胞只能產生一種針對它能夠識別的特異性抗原決定簇的抗體。從一個祖先B細胞分裂繁殖而形成的純細胞系稱為克隆。來自克隆系的細胞基因是完全相同的，產生的抗體也完全相同。這種從一株克隆系產生的性質相同的均一抗體稱為單克隆抗體。但這種具有分泌功能的B淋巴細胞難以在
細胞融合的融合過程簡述
細胞膜有內外兩層，細胞融合首先發生在外層，然后再到內層，由此就出現了兩種融合通道，細胞體內物質通過這兩種通道轉移。病毒膜與目標細胞融合時，只出現一種融合通道，即導致融合的基因只能在病毒中找到，而在目標細胞中卻找不到。但是，通過EFF-1發生的細胞融合則是一個雙向融合過程，需要EFF-1出現在兩個相互
細胞融合的融合過程介紹
細胞膜有內外兩層，細胞融合首先發生在外層，然后再到內層，由此就出現了兩種融合通道，細胞體內物質通過這兩種通道轉移。病毒膜與目標細胞融合時，只出現一種融合通道，即導致融合的基因只能在病毒中找到，而在目標細胞中卻找不到。但是，通過EFF-1發生的細胞融合則是一個雙向融合過程，需要EFF-1出現在兩個相互
細胞融合技術誘發融合
異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。
細胞融合技術自發融合
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合。
植物體細胞雜交的融合方法介紹
1．PEG誘導融合法? PEG誘導融合的特點：其優點是融合成本低，勿需特殊設備；融合子產生的異核率較高；融合過程不受物種限制。其缺點是融合過程繁瑣，PEG可能對細胞有毒害。? PEG的作用機理： Kao等認為，由于PEG分子具有輕微的負極性，故可以與具有正極性基團的水、蛋白質和碳水化合物等形成H鍵，
動物細胞融合實驗
一、實驗目的細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下，體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50年，現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫，腫瘤及細胞工程的重要手段。通過實驗，了解細胞融合的原理，掌握細胞融合的基本方法。二、實驗原理在誘導物
動物細胞融合實驗
細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下，體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年，現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫，腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物（如仙臺病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的細胞發生凝集，隨后在質膜接
細胞融合的融合方法有哪些？
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合；異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚；②在37℃中，病毒與細胞膜發生反應，細胞膜受到破環，此時需要Ca2+和Mg2+，最適PH為8.0
細胞融合技術的融合方法介紹
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合；異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝聚；②在37℃中，病毒與細胞膜發生反應，細胞膜受到破環，此時需要Ca2+和Mg2+，最適PH為8.0
細胞融合實驗的實驗原理簡介
根據Burnet的抗體選擇學說，一個B淋巴細胞只能產生一種針對它能夠識別的特異性抗原決定簇的抗體。從一個祖先B細胞分裂繁殖而形成的純細胞系稱為克隆。來自克隆系的細胞基因是完全相同的，產生的抗體也完全相同。這種從一株克隆系產生的性質相同的均一抗體稱為單克隆抗體。但這種具有分泌功能的B淋巴細胞難以在
細胞融合實驗的實驗步驟介紹
1. DMEM或1640基礎培養基、PEG溶液置于37℃水浴中預溫； 2. 將Balb/c小鼠摘眼球處死后，浸入75%灑精； 3. 無菌取免疫小鼠的脾臟； 4. 脾臟用PBS洗滌后，放入無菌過濾的網篩，再把網篩放在盛有完全培養基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器針管）輕輕研磨或擠壓，使其通過網
細胞融合技術電融合法
在直流電脈沖的誘導下，細胞膜表面的氧化還原電位發生改變，使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂，進而質膜開始連接，直到閉和成完整的膜，形成融合體。優點：融合率高、重復性強、對細胞傷害小；裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程；免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。
細胞融合技術電融合法
在直流電脈沖的誘導下，細胞膜表面的氧化還原電位發生改變，使異種細胞粘合并發生質膜瞬間破裂，進而質膜開始連接，直到閉和成完整的膜，形成融合體。優點：融合率高、重復性強、對細胞傷害小；裝置精巧、方法簡單、可在顯微鏡下觀察或錄像觀察融合過程；免去PEG誘導后的洗滌過程、誘導過程可控性強。
細胞融合技術的實驗操作
人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素（fluorescin）結合，人的抗體與發紅色熒光的羅丹明（rhodamine）結合；第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合；最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中，讓這些標記抗體同融合細
簡述細胞融合的實驗操作
人、鼠細胞融合實驗分三步進行∶首先用熒光染料標記抗體∶將小鼠的抗體與發綠色熒光的熒光素（fluorescin）結合，人的抗體與發紅色熒光的羅丹明（rhodamine）結合；第二步是將小鼠細胞和人細胞在滅活的仙臺病毒的誘導下進行融合；最后一步將標記的抗體加入到融合的人、鼠細胞中，讓這些標記抗體同融
關于單克隆抗體細胞融合的過程介紹
融合的方法很多，常用的有轉動法和離心法。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。 1．試劑與材料 (1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。 (2)1640培養液100ml。 (3)完全1640液100ml。 (4)2.5%FCS－1640液50ml。
細胞電融合
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將制備的游離細胞或原生質體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細胞被極化，成為偶極子，造成細胞之間相互連接，如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用時間過長，則細胞連接成串珠狀，應適當控制以上條件，盡量使兩細