流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗2
活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光）實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS 溶液疊氮化鈉實驗步驟1. 在培養皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收獲細胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化時間長。4℃ 1000 g 離心 5 分鐘。操作始終在冰上進行。2. 用 4 ml PBS+0.1% 疊氮化鈉和 1% BSA 或熱的滅活血清洗細胞。3. 計數細胞，每個樣品的最小濃度為 1X106/ml。4. 將樣品等分為 50 μl 小體積的含 0.1% 疊氮化鈉和 1% 熱的滅活血清的 PBS 溶液。5. 加合適滴度的初始抗體，用系列稀釋確定合適滴度范圍。6. 在冰上孵育細胞 30 分鐘。7. 每個樣品中加入 4 ml PBS+疊氮化鈉和 BSA，輕輕混合。8. 1000 g 離心細胞 5 分鐘。9. 用 4 ml PBS+疊氮化鈉和 BSA 洗樣品。10. 1000 g 離心細胞 5 分鐘。11. 在......閱讀全文
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗2
活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光）實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS 溶液疊氮化鈉實驗步驟1. 在培養皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收獲細胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化時間長。4℃ 1000 g 離心 5 分鐘。操作始終在冰上進行。2. 用 4
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光）實驗材料細胞初始抗體試劑、試劑盒PBS 溶液疊氮化鈉實驗步驟1. 在培養皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，輕搖，收獲細胞。4℃ 1000 g 離心 5 分鐘。2. 用 4 ml PBS+0.1% 疊氮化鈉和 1
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光） 活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光） 活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
TUNEL分析實驗——TUNEL－染色的流式細胞計量術分析
實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒PBS甲醛檸檬酸鈉溶液儀器、耗材流式細胞計量儀實驗步驟1. 凋亡誘導之后，200 g 離心 5 分鐘收集 1X106?懸浮細胞，用冷的 PBS 洗 2 次，重復離心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定細胞沉淀，室溫下在水平搖床上孵育 30 分鐘。3. 20
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 PBS冷乙醇PI 溶液儀器、耗材 錐形管實驗步驟 1. 分離細胞并移至 15 ml 的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000 g 離心 5 分鐘，棄上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 將細胞洗 2 次，計數細胞總數，記在管山。3. 用約 500 μl 的 PB
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
固定全細胞的PI染色 非固定細胞的無洗染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
固定全細胞的PI染色 非固定細胞的無洗染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑
流式細胞分析分選術2
第七章 流式細胞分析分選術?47?轉染24 小時后，一旦觀察到經RIP 轉染的細胞明顯死亡，即可收獲細胞。?每板分別收集培養液，在每個6cm 板中加入1ml 胰酶(細胞消化的方法同上)，?消化完畢，加入已收集的培養液(注意一一對應，防止弄錯)中和胰酶，離心(300g，?5min)收集細胞。?3.4
凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的流式細胞計量術分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 熒光染料PBS實驗步驟1. 按“△ψm?的顯微分析” 用 CMXRos 熒光染料培養約 5X105?細胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 將細胞洗 2 次，在水平搖床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室溫溫育細胞沉淀 15 分鐘，用以固定。固定細胞在進行流式細胞
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響2
在散射光圖上設一個“門”分析多種參數實驗步驟展開
流式細胞計量術（DNA含量）實驗_固定全細胞的PI染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS冷乙醇PI 溶液儀器、耗材錐形管實驗步驟1. 分離細胞并移至 15 ml 的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000 g 離心 5 分鐘，棄上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 將細胞洗 2 次，計數細胞總數，記在管山。3. 用約 500 μl 的 PBS 重懸
流式細胞術熒光那些事兒
自上世紀70年代問世以來，流式細胞術（FCM）在基礎科研和臨床診斷和治療上得到了越來越廣泛的應用。但是，做FCM往往會遇到熒光信號太弱的情況。好不容易搞了一管細胞去做流式，卻做不出熒光信號。真的是急死個人。其實，毛博也是到米國做博士猴以后才開始做流式的。時間不算長。但是做得非常非常多。每天都要做好幾
流式細胞計量術（DNA含量）實驗_非固定細胞的無洗染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒蛋白酶NST-DAPI 緩沖液MFM檸檬酸緩沖液DNA 染色 裂解溶液儀器、耗材尼龍篩實驗步驟一、組織培養細胞的染色1. 通過對懸浮培養中的細胞傾析或對單層培養的細胞蛋白酶消化來收獲細胞。計數細胞，800 g 慢速離心 3 分鐘沉淀細胞。2. 細胞染色。3. 在 NST-DA
流式細胞術實驗步驟
流式細胞術實驗：1、制備細胞懸液，計數2、分裝，按照每個EP（1.5ml）管1-2*10 6個細胞分裝，3500rpm，4度離心。3、用100ulPBS重懸，加入10ul大鼠血清封閉，4度避光30min。4、加入相應的熒光標記的抗體，混勻，避光，4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗兩遍。6、用
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
低滲處理 未固定細胞樣品染色后存放時間對細胞表面標志檢測結果的影響 在散射光圖上設一個“門”分析多種參數 用CellQuest軟件設多個“門”分析某一種參數 在DNA含量分析時去除二聯體細胞的方法 校準流式細胞儀線性度和檢測流式細
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
低滲處理 未固定細胞樣品染色后存放時間對細胞表面標志檢測結果的影響 在散射光圖上設一個“門”分析多種參數 用CellQuest軟件設多個“門”分析某一種參數 在DNA含量分析時去除二聯體細胞的方法 校準流式細胞儀線性度和檢測流式細
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
磁珠分離與骨髓組織各種細胞的百分率實驗步驟展
流式細胞分析術的特點
一、流式細胞術發展簡史流式細胞術(FlowCytometry,FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：①測量速度快，最快可在1秒種內計測數萬個細胞；②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量，并具有明顯的統計學意義；③是一門綜合性
流式細胞分析術的特點
一、流式細胞術發展簡史流式細胞術(FlowCytometry,FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：①測量速度快，最快可在1秒種內計測數萬個細胞；②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量，并具有明顯的統計學意義；③是一門綜合性
流式細胞儀和流式細胞術指南篇2
核酸插入染料溴化乙錠(EtBr) 和碘化丙啶（PI）能夠結合到DNA雙螺旋的大溝。4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）和Hoechst染料（有幾種常用的）則結合小溝。請注意， 一些染料 (例如碘化丙啶)也會結合到RNA發卡結構形成的溝中，因此如果要做DNA定量，需要用染料和RNA
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
實驗方法原理取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。實驗材料實驗樣品試劑、試劑盒抗體、PBS溶液儀器、耗材移液器移液吸頭離心機實驗步驟一、不同來源樣品的處理1 . 培養細
流式細胞術間接免疫熒光標記的樣品制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取一定量的細胞懸液，先加入特異的第一抗體，待反應完全后洗去未結合抗體，在加入熒光標記的第二抗體，生成抗原-抗體復合物，以流式細胞儀檢測其上標記的熒光素被激發后發出的熒光。 實
基于RoHS認證的X熒光分析技術實驗研究
RoHS指令(《電氣、電子設備中限制使用某些有害物質指令》)規定輸往歐洲的電子產品及其組件均需對六種有毒成份:鉛(Pb)、汞(Hg)、鎘(Cd)、六價鉻(Cr6+)、多溴聯苯(PBBs)、多溴二苯醚(PBDEs)等有害物質加以限制。近幾年該指令已在電子電器、質量檢測、環保等相關行業廣泛實施應用。在多
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響3
實驗步驟
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響4
用CellQuest軟件設多個“門”分析某一種參數 實驗步驟 展開
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響9
實驗步驟 展開
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響5
在DNA含量分析時去除二聯體細胞的方法實驗步驟展開
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響7
在細胞DNA直方圖上鑒別細胞凋亡與DNA異倍體G1期細胞峰實驗步驟展開