凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的流式細胞計量術分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 熒光染料PBS實驗步驟1. 按“△ψm 的顯微分析” 用 CMXRos 熒光染料培養約 5X105 細胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 將細胞洗 2 次，在水平搖床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室溫溫育細胞沉淀 15 分鐘，用以固定。固定細胞在進行流式細胞計量術分析前，可在 4℃ 避光保存 1~10 天。......閱讀全文
凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的流式細胞計量術分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 熒光染料PBS實驗步驟1. 按“△ψm?的顯微分析” 用 CMXRos 熒光染料培養約 5X105?細胞。2. 用 pH 7.2 的 PBS 將細胞洗 2 次，在水平搖床上用 4% 甲醛-PBS 溶液室溫溫育細胞沉淀 15 分鐘，用以固定。固定細胞在進行流式細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗_△ψm的顯微分析
實驗材料細胞試劑、試劑盒CMXRos 儲存液PBS實驗步驟1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液，建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L，后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象，熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞，將細胞在蓋
凋亡中線粒體功能評價實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 CMXRos 儲存液PBS實驗步驟 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液，建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L，后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象，熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞，將細
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
TUNEL分析實驗——TUNEL－染色的流式細胞計量術分析
實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒PBS甲醛檸檬酸鈉溶液儀器、耗材流式細胞計量儀實驗步驟1. 凋亡誘導之后，200 g 離心 5 分鐘收集 1X106?懸浮細胞，用冷的 PBS 洗 2 次，重復離心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定細胞沉淀，室溫下在水平搖床上孵育 30 分鐘。3. 20
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
固定全細胞的PI染色 非固定細胞的無洗染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
固定全細胞的PI染色 非固定細胞的無洗染色 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑
流式細胞計量術（DNA含量）實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 PBS冷乙醇PI 溶液儀器、耗材 錐形管實驗步驟 1. 分離細胞并移至 15 ml 的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000 g 離心 5 分鐘，棄上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 將細胞洗 2 次，計數細胞總數，記在管山。3. 用約 500 μl 的 PB
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光） 活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光）實驗材料細胞初始抗體試劑、試劑盒PBS 溶液疊氮化鈉實驗步驟1. 在培養皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，輕搖，收獲細胞。4℃ 1000 g 離心 5 分鐘。2. 用 4 ml PBS+0.1% 疊氮化鈉和 1
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗
活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光） 活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2． 懸浮細胞在低溫環境中，用PBS洗滌細胞2次（800～1
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2．
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2．
流式細胞術細胞凋亡檢測樣品的制備實驗
實驗步驟 根據實驗方案誘導細胞凋亡，制備單細胞懸液，使用 Annexin V-FITC 細胞凋亡檢測試劑盒，通過Annexin V抗體與磷脂絲氨酸（PS）的特異性結合來檢測細胞凋亡的情況。1． 將10×的結合緩沖液用蒸餾水稀釋成為1×，冰育。2． 懸浮細胞在低溫環境中，用PBS洗滌細胞2次（800～
流式細胞計量術（基于熒光的蛋白質分析）實驗2
活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光）實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS 溶液疊氮化鈉實驗步驟1. 在培養皿中加入 1 mmol/L EDTA/1 mmol/L EGTA 的 PBS 溶液，收獲細胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化時間長。4℃ 1000 g 離心 5 分鐘。操作始終在冰上進行。2. 用 4
關于流式細胞術實驗的室間質量評價
開展內部的質量控制使實驗的受控項目達到一定的精密度。臨床上往往只對實驗結果是否可重復較敏感，若實驗結果存在較穩定的系統誤差，臨床和實驗室一般不易察覺，因此內部的質量控制還在于控制結果的不精密度。由專門機構定期向臨床實驗室分發質控品,要求各單位檢測后返回測定結果，經過整理和統計，以數據和報告形式反
流式細胞術檢測細胞凋亡
實驗概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.?實驗原理Apoptosis ?is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal ?part o
流式細胞計量術（DNA含量）實驗_固定全細胞的PI染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒PBS冷乙醇PI 溶液儀器、耗材錐形管實驗步驟1. 分離細胞并移至 15 ml 的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000 g 離心 5 分鐘，棄上清。2. 用不含 Ca 或 Mg 的 PBS 將細胞洗 2 次，計數細胞總數，記在管山。3. 用約 500 μl 的 PBS 重懸
流式細胞計量術（DNA含量）實驗_非固定細胞的無洗染色
實驗材料細胞試劑、試劑盒蛋白酶NST-DAPI 緩沖液MFM檸檬酸緩沖液DNA 染色 裂解溶液儀器、耗材尼龍篩實驗步驟一、組織培養細胞的染色1. 通過對懸浮培養中的細胞傾析或對單層培養的細胞蛋白酶消化來收獲細胞。計數細胞，800 g 慢速離心 3 分鐘沉淀細胞。2. 細胞染色。3. 在 NST-DA
流式細胞術實驗步驟
流式細胞術實驗：1、制備細胞懸液，計數2、分裝，按照每個EP（1.5ml）管1-2*10 6個細胞分裝，3500rpm，4度離心。3、用100ulPBS重懸，加入10ul大鼠血清封閉，4度避光30min。4、加入相應的熒光標記的抗體，混勻，避光，4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗兩遍。6、用
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
低滲處理 未固定細胞樣品染色后存放時間對細胞表面標志檢測結果的影響 在散射光圖上設一個“門”分析多種參數 用CellQuest軟件設多個“門”分析某一種參數 在DNA含量分析時去除二聯體細胞的方法 校準流式細胞儀線性度和檢測流式細
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
低滲處理 未固定細胞樣品染色后存放時間對細胞表面標志檢測結果的影響 在散射光圖上設一個“門”分析多種參數 用CellQuest軟件設多個“門”分析某一種參數 在DNA含量分析時去除二聯體細胞的方法 校準流式細胞儀線性度和檢測流式細
實驗條件對流式細胞術分析結果的影響
磁珠分離與骨髓組織各種細胞的百分率實驗步驟展
細胞凋亡檢測實驗——線粒體膜勢能的檢測
實驗方法原理線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用，多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡，而線粒體跨膜電位的下降，被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件，它發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA 斷裂）出現之前，一旦線粒體DYmt 崩潰，則細胞凋亡不可逆轉。?線粒體跨膜電位的存在，使
流式細胞分析術的特點
一、流式細胞術發展簡史流式細胞術(FlowCytometry,FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：①測量速度快，最快可在1秒種內計測數萬個細胞；②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量，并具有明顯的統計學意義；③是一門綜合性
流式細胞分析術的特點
一、流式細胞術發展簡史流式細胞術(FlowCytometry,FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：①測量速度快，最快可在1秒種內計測數萬個細胞；②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量，并具有明顯的統計學意義；③是一門綜合性
流式細胞測凋亡率.數據中哪個代表凋亡率
FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 單染,代表死亡的細胞,雙染陽性的是正在凋亡的細胞.所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的細胞
流式細胞術做凋亡的操作步驟和注意事項
流式樣品的準備：DNA含量的測定：用本法可以測定細胞周期、細胞倍體和凋亡，在樣品的制備中存在的問題主要是細胞的聚集和碎片，建議在固定細胞時加入3％小牛血清。1 培養或分離的細胞約110 6，離心沉淀后用0.3ml含10％小牛血清的PBS懸浮，移入1.5mlEP管中，加入0.7ml無水乙醇，置－20攝