小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。 實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布剪子鑷子燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6孔培養板吸管移液管手套微量加樣器實驗步驟1. 將小鼠斷頸致死,置75%酒精泡2-3秒鐘,取肝臟,置于盛有PBS的平皿中。2. 剔除脂肪、結締組織、血液等雜物,轉移到另一個盛有PBS液的平皿中。3. 用手術剪將臟器剪成小塊(大小約1mm2),玻片研磨,轉到離心管,離心(1 000 rpm,5 min)。4. 視組織或細胞量加入5-6倍(3-5 ml)胰酶,37℃中消化20分鐘,每隔5分鐘振蕩一次,或用吸管吹打一次,使細胞分離。5. 加入3-5 ml含血清的培養液以中止胰酶消......閱讀全文
小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS
細胞原代培養實驗——胰酶消化法
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法1
實驗方法原理將小鼠的胚胎成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料孕鼠試劑、試劑盒PBSEDTA胰酶MEF生長培養基FBS高糖DMEM儀器、耗材眼科直剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿3尼龍濾網離心管手術
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法2
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)分子生物學研究;(3)基因治療相關研究。實驗方法原理將小鼠的成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒PB
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗_胰酶消化法
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM酶消化液
小鼠肝細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?
小鼠肝細胞原代培養實驗
小鼠肝細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM 無血清DMEM
小鼠肝細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗——胰酶消化法
大鼠肺成纖維細胞培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料Wistar乳鼠試劑、試劑盒PBS牛血
腫瘤細胞原代培養實驗——酶消化法
實驗方法原理本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點,通過消化進行選擇。可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理,邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視,當發現成纖維細胞被除掉后,即終止消化;用Hanks洗滌處理一次后,更換新培養液,繼續培養,可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈,可再次重復。實驗材料組織試劑、
小鼠肝細胞原代培養
實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS儀器、耗材 飯盒紗布剪子鑷子燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6孔培養板吸管移液管手套微量加樣器實驗
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
大鼠星型膠質細胞培養實驗——胰酶消化法
實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培養液儀器、耗材離心管培養箱手術器材實驗步驟一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手術臺上,酒精棉球消毒皮膚,開腹取出子宮(約12-14個),放入解剖液中,剖開子宮,取出胚胎,放入解剖液中,
原代培養的細胞每次用胰酶消化去除雜細胞
可能是消化時間過長引起的。每種細胞消化時間都不一樣,得自己摸索條件。加入胰酶后,注意觀察細胞,在細胞開始收縮的適當時間里就得及時終止,否則對細胞損傷很大。
小鼠肝細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。
小鼠肝細胞培養實驗
細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基
小鼠肝細胞培養實驗
實驗方法原理 通過光鏡觀察細胞形態、電鏡觀察超微結構及檢測培養上清白蛋白水平證實培養細胞為肝細胞,持續培養結果顯示原代培養第6~12 d 左右為肝細胞功能最佳觀察和實驗階段。實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材 飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研磨玻片濾網離心管6 孔
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養實驗——酶消化法
大鼠腦微血管內皮細胞原代培養可用于:(1)血腦屏障的研究;(2)腦血管疾病的病理生理及分子生物學研究;(3)新藥篩選;(4)腦微血管內皮細胞生理生化及藥理學研究。實驗方法原理以大腦皮質為材料、酶消化及梯度離心分離腦微血管段并進行原代培養,成功地摸索出大鼠腦微血管內皮細胞分離和原代培養的方法,并獲得純
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養實驗——腹腔取材法
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)分子生物學研究;(3)基因治療研究。實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于:(1)分子生物學;(2)細胞生物學;(3)遺傳學;(4)免疫學;(5)腫瘤學;(6)病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物體內取出所需的組織(或器官),經胰酶消化,
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養實驗
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法腹腔取材法實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養實驗
腹腔取材法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞
小鼠腹腔巨噬細胞原代培養實驗
腹腔取材法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞
肝細胞原代培養操作步驟
材料:小鼠器具:飯盒、紗布、小剪子、小鑷子、大鑷子、大燒杯、平皿、研磨玻片、濾網、離心管(15/50ml)、6孔培養板、吸管、移液管、手套、微量加樣器 試劑: DMEM(含血清)、無血清DMEM培養基、胰酶、PBS 準備: 酒精擦拭臺面后把物品擺放好,開紫外線