WIKI資訊

頑拗性植物組織的蛋白質組學研究（苯酚法提取蛋白質）

實驗材料植物組織試劑、試劑盒苯酚提取緩沖液沉淀液等電聚焦緩沖液儀器、耗材低溫粉碎機實驗步驟3.1 蛋白質提取( 1 ) 新鮮植物組織在液氮中冷凍，然后在自動低溫粉碎機中預先冷卻的鋼杯中將材料研磨成細碎的粉末（見注釋 4) 。( 2 ) 在一個 15 ml 的離心管（falcon tube) 中加入 3 ml 提取緩沖液，并加入 1 g 研碎的植物組織，渦旋后在冰浴中振蕩 10 min ( 見注釋5) 。( 3 ) 加入等體積的 Tris 飽和苯酚，室溫下振蕩 10 min ( 見注釋 6)。( 4 ) 樣品在 5500 g 和 4°C 的條件下離心 10 min，從上到下分成有機相，水相和沉淀的不溶物質（見注釋 7) ，小心地將最上層的苯酚轉移到新的離心管中，注意避免觸碰到中間層。( 5 ) 含蛋白質的苯酚液中加入 3 ml 的提取緩沖液進行反萃取（ back- extract) 。振蕩 3 min 后渦......閱讀全文