RNA點雜交實驗
實驗概要了解RNA點雜交實驗,包括純化的RNA的點雜交和狹線雜交,RNA斑點印跡。實驗步驟純化的RNA的點雜交和狹線雜交:1. 安裝印跡裝置 1) 切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕,在20×SSC中室溫泡1 h。 2) 在膜浸泡期間,先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置,再用無菌水洗干凈。 3) 把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕,再放到真空器頂部。 4) 把樣品槽插入裝置的上部,把濕尼龍膜放在樣品槽加樣孔的底部,用吸管在膜的表面滾動以去除膜與裝置夾層中的氣泡。 5) 加緊夾板,連接真空管。 6) 加入10×SSC直至液面沒過尼龍膜,關掉真空,再用10×SSC充滿。2. RNA樣品準備 1) 把每個RNA樣品(溶解......閱讀全文
RNA點雜交
1) 純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1.切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕,在20×SSC中室溫泡1 h。2.在膜浸泡期間,先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置,再用無菌水洗干凈。3.把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕,再放到真空器頂部。4
RNA點雜交
RNA點雜交1)??純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1.切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕,在20×SSC中室溫泡1 h。2.在膜浸泡期間,先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置,再用無菌水洗干凈。3.把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕,再放到
RNA點雜交實驗
實驗概要了解RNA點雜交實驗,包括純化的RNA的點雜交和狹線雜交,RNA斑點印跡。實驗步驟純化的RNA的點雜交和狹線雜交:1. 安裝印跡裝置?? 1) 切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕,在20×SSC中室溫泡1 h。?? 2) 在膜浸泡期間,先用0.1 mo
純化的RNA的點雜交和狹線雜交
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 點雜交和狹線雜交技術(Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物(通常為帶電荷的尼龍膜)上固定幾種核酸樣品,然后用合適的探針與已固定的樣品雜交,并由此判斷靶序列的濃度。通過估計樣品點發射出 的信號的強
純化的RNA的點雜交和狹線雜交
實驗方法原理?點雜交和狹線雜交技術(Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物(通常為帶電荷的尼龍膜)上固定幾種核酸樣品,然后用合適的探針與已固定的樣品雜交,并由此判斷靶序列的濃度。通過估計樣品點發射出 的信號的強度,與已知濃度的標準品信號強度 進行比較,確定待測樣品中靶
純化的RNA的點雜交和狹線雜交
點雜交和狹線雜交技術(Kafatos et al. 1979) 用于在同一固相支持物(通常為帶電荷的尼龍膜)上固定幾種核酸樣品,然后用合適的探針與已固定的樣品雜交,并由此判斷靶序列的濃度。通過估計樣品點發射出的信號的強度,與已知濃度的標準品信號強度 進行比較,確定待測樣品中靶序列的量。本實驗來源「分
今日技術解析-RNA點雜交實驗
實驗步驟純化的RNA的點雜交和狹線雜交:1. 安裝印跡裝置?? 1) 切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕,在20×SSC中室溫泡1 h。?? 2) 在膜浸泡期間,先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置,再用無菌水洗干凈。?? 3) 把兩片厚濾紙用20
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RNA點線雜交(Dot and Slot blotting)·?????????RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
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DNA點雜交l????????DNA斑點印跡的制備預備1.冰浴中以70W左右的超聲波處理基因組DNA 1min,用瓊脂糖凝膠電泳檢測片段大小,這些片段大小均應為7~10kb。2.用TE緩沖液將DNA稀釋至0.5μg/μl。?斑點印跡的制備1.加熱5μg DNA(在10μl TE緩沖液中)至95℃?1
RNA印跡雜交
RNA印跡雜交1)???????Northern印跡的制備預備:1.按下述步驟,每泳道加10~20μg總RNA或0.5~1μg poly(A)+RNA進行甲醛/瓊脂糖凝膠電泳,將凝膠放在紫外線透照儀上,旁邊置一標尺進行拍照。a.?總RNA(10~20μg)用下列溶液在65℃溫育5min:總RNA(1