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質粒、噬菌體等經酶切，電泳；PCR產物經電泳后，常常需要對一些DNA電泳片段進行回收和純化，用于亞克隆、探針標記等。DNA回收和純化常用方法有壓碎法、低融點瓊脂糖法、凍融法等，也有現成的試劑盒供應。一、凍融法1. 紫外燈下仔細切下含待回收DNA的膠條，將切下的膠條（小于0.6g）搗碎，置于1.5ml離心管中；2. 加入等體積的Tris-HCl飽和酚（pH 7.6），振蕩混勻；3. -20℃放置5-10min；4. 4℃離心10000g×5min，上層液轉移置另一離心管中；5. 加入1/4體積H2O于含膠的離心管中，振蕩混勻；6. -20℃，放置5-10min；7. 4℃離心10000g×5min，合并上清液；8. &nb......閱讀全文
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
試劑、試劑盒 乙酸銨 ATP 乙醇 甘油 蒸餾水 IPTG Mg
下面的方案描述了鳥槍法測序的起始步驟，從靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌體載體構建 DNA 片段文庫，也包括斷裂靶 DNA 的兩種方法--超聲法和噴霧法，以及用 DNA 聚合酶修復片段末端的技術要點。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。試劑、
基因測序越來越得到臨床的認可，尤其是精準醫療概念提出以后，更是備受青睞，為精準治療解答很多未知的問題。高通量測序技術的跨越式發展，使測序能力大幅上升，在整個NGS工作流程中，磁珠是必不可少的產品。磁珠通過磁顆粒活性基團在一定條件下可與核酸結合和解離的原理，將樣本中目的片段分離。可實現對核酸樣本的
基因測序越來越得到臨床的認可，尤其是精準醫療概念提出以后，更是備受青睞，為精準治療解答很多未知的問題。高通量測序技術的跨越式發展，使測序能力大幅上升，在整個NGS工作流程中，磁珠是必不可少的產品。磁珠通過磁顆粒活性基團在一定條件下可與核酸結合和解離的原理，將樣本中目的片段分離。可實現對核酸樣本的
產品索引 5872 中文名稱： PCR產物及凝膠回收試劑盒 英文名稱： MagExtractor?-PCR & Gel Clean up- 產品編號： NPK -600 產品類別： 分子生物學 生產廠家： TOYOBO 產
[實驗原理]DNA重組是將外源DNA與載體分子連接，這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。DNA重組的方法主要有粘端連接法和平端連接法。 重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統中，將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。常用的DNA連接酶是T4噬
酶切基礎知識DNA酶切一般分為質粒直接酶切和PCR產物酶切第一節 DNA酶切及凝膠電泳 一.DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在
利用核苷酸交換和剪切技術進行DNA碎裂和定向進化 實驗材料 T4 DNA 連接
質粒DNA的提取與純化質粒是一類雙鏈、閉環的DNA，大小范圍從1 kb至200 kb以上不等。通常情況下，質粒可持續穩定地處于染色體外的游離狀態，具有自主復制功能；但在一定條件下也會可逆地整合到宿主染色體上，隨著染色體的復制而復制，并通過細胞分裂傳遞到后代。 質粒已成為核酸克隆和測序最常用
實驗方法原理TA克隆 系統由Invitrogen公司（San Diego，CA）發展而來的商業性試劑盒，它用于PCR 產物的克隆 和測序。其原理是利用Taq酶能夠在PCR 產物的3'末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3'T突出端的載體，在連接酶作用下，可以快速地、一步到位
實驗概要通過瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物，并對獲得的產物進行割膠純化回收，為接下來的DNA重組和轉化實驗提供外源DNA片段。實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗） 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purifi
1.引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種, 主要都是由ABI/PE 公司生產，無論采用什么機器合成，合成的原理都相同，主要差別在于合成產率的高低，試劑消耗量的不同和單個循環用時的多少。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩定的
如今，引物純化方式多種多樣。各位科研君，每天忙碌奔波于核酸提取、載體構建、蛋白表達等環節，沒有深入了解過各種引物純化方式吧！今天，小編帶各位對各種引物純化方式作下對比。各位科研君在以后的研究中，記得對號入座哦！ 一般純化方式 目前，采用的主打的引物純化方式是脫鹽純化。其只能純化掉
（三）DNA酶切片段的回收【實驗方法與步驟】1.凍融法:（1）在UV燈下，用手術刀片將含DNA片段的瓊脂糖凝膠切下，-70℃冷凍至少 15min，然后在65℃水浴中使膠融化；（2）加入等倍體積TE-飽和酚，劇烈振蕩30秒鐘，然后-70℃冷凍 15min；（3）室溫融化后，12,000rpm離心5mi
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗） 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DN
實驗原理 瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗） 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DN
如今，引物純化方式多種多樣。各位科研君，每天忙碌奔波于核酸提取、載體構建、蛋白表達等環節，沒有深入了解過各種引物純化方式吧！今天，小編帶各位對各種引物純化方式作下對比。各位科研君在以后的研究中，記得對號入座哦！一般純化方式目前，采用的主打的引物純化方式是脫鹽純化。其只能純化掉引物中的鹽分，并不能去除
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗）本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DNA制
DNA電泳可用于：（1）分離不同大小的DNA片段；（2）鑒定目的DNA片段；（3）純化和回收DNA片段。實驗方法原理利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場中向正極移動，且相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，能以
3.5 片段純化經酶解和化學裂解得到的基因片段（見 10.3.3 ) 即可通過硅膠樹脂直接從切割反應液中純化（見 10.3. 5.1)，也可通過制備型尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳純化（見 10.3.5.2) 。最初我們認為如想得到特定大小的片段必須通過凝膠電泳來純化，以確保在重組裝反應中沒有較長片段甚
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗）本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DNA制
實驗概要運用原子力顯微鏡(AFM)表征3種DNA純化試劑盒對DNA的純化效果。方法：PCR擴增K562/A02細胞mdr1基因DNA，分別以3種不同的DNA純化試劑盒對PCR產物進行純化后，按終濃度為10 ng?μl-1固定在用1 ng?μl-1 L型多聚賴氨酸預先處理過的新剝離的云母片上，用AFM
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。（原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗）本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統，結合DN
從瓊脂糖凝膠中回收的 DNA 片段，如 PCR 產物或酶切 DNA 片段，對進一步酶切具有一定的抗性。這種抗性產生的原因是多方面的，通常將其歸為抑制劑的存在。經帶正電荷的離子交換樹脂純化的雙鏈 DNA 可有效去除樣品中的抑制劑。在低離子強度的緩沖液中，帶負電的 DNA 結合到帶正電的基質上。本實驗來
分子雜交技術 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick 堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA 分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的,可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細胞總DN
3.6 純化片段的定量為了分析和比較純化得到的 DNA 的產量，我們首先使用 SYBR Greenn 試劑來定量。因為 NExT DNA 混編方法的重復率很髙，我們只定量一次即可（見注 16 )。通常我們都能獲得濃度為 40~60 ng/μl 的 DNA 片段。( 1 ) 取 2 μl 純化的 DN
DNA電泳可用于：（1）分離不同大小的DNA片段；（2）鑒定目的DNA片段；（3）純化和回收DNA片段。實驗方法原理DNA瓊脂糖凝膠電泳的基本原理是利用DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時具有的電荷效應和分子篩效應。電荷效應是指DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電，在電場中向正極移動，且相同數量的雙鏈
實驗概要本實驗介紹了DNA回收和連接的基本原理，PCR產物的T-vector克隆。實驗原理1. DNA片段回收方法：DNA片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中，通上一定電壓進行電泳，不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠，用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片
隨著人類基因組測序工作的基本完成，功能基因組學逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域，要想提供蛋白因子直接調控的證據，需要直接檢測蛋白質-DNA的相互作用，而染色質免疫沉淀技術（Chromatin Immunoprecipitation，ChIP）就是一種研