染色體制備
實驗方法原理固定阻滯于分裂中期的細胞，在低滲液中膨脹，將細胞滴在載玻片上，染色，觀察 [ Rothfels and Siminovitch，1958；Rooney and Czepulkowski，1986 ] 。實驗材料D-PBS 0.25%胰蛋白酶 ......閱讀全文
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備1
一、 人外周血染色體制備實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。在培養液中加入植
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混勻，固定10min。⑧ 離心：同上，吸去上清液。⑨ 制細胞懸液：根據細胞量多少，加入適量固定液，充分混勻，制成細胞懸液。⑩ 滴片：取出預先經冰水浸泡的載玻片，用吸管吸取混勻的細胞懸液在離冰片約30cm距離進行滴片，每片約滴2～3滴細胞懸液，使細胞較好分散。一般每一培養瓶
染色體提前凝集標本制備實驗
基本實驗實驗方法原理七十年代初，由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子，它無種屬特異性，所以在細胞融合和染色體技術的基礎上，建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期（I期）細胞融合，從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyC
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理????人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養，但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞，依據其外形和生長特征可區分為以下三類：上皮細胞（E）、成纖維細胞（F）和羊水細胞（AF）。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長，所以在培養過程中的生長期最短。AF細
染色體提前凝集標本制備實驗
實驗方法原理七十年代初，由于發現M期細胞內有某種促進染色體凝集因子，它無種屬特異性，所以在細胞融合和染色體技術的基礎上，建立了制備染色體提前凝集標本的方法。即讓M期細胞與間期（I期）細胞融合，從而誘導I期細胞染色質提前濃縮成染色體。形成的這種染色體稱提前凝集的染色體(PrematurelyConde
淋巴細胞染色體制備方法
1. 向含有細胞培養基的細胞培養管中無菌添加全血0.5ml，蓋緊培養瓶，充分混均；2. 水平培養72 h(37℃)；3. 加入20ul 秋水溶液，培養2 h；4. 離心5 min（2000 rpm）；5. 去除上清液，保留0.5ml的細胞；6. 重新充分混懸細胞1；7. 加入5ml 低滲溶液(KCl
胸腹水細胞染色體制備方法
在惡性腫瘤的胸腹水中有大量的分裂期細胞，其中多以非整倍體細胞存在，并含有各種標記染色體。 1、 實驗材料 2.5%碘精、75%酒精、無菌棉球、鑷子20-22號無菌腰穿包、50ml離心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、載玻片等。 2、 操作過程（1）采樣：選擇有胸或腹水患者，在無菌條件下，輕腹
羊水細胞染色體標本的制備
一、原理人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養，但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞，依據其外形和生長特征可區分為以下三類：上皮細胞（E）、成纖維細胞（F）和羊水細胞（AF）。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生長，所以在培養過程中的生長期最短。AF細胞在再培
CHO細胞染色體制備[Harvard－Medical－School]
Mitshison Lab, Department of Systems Biology, Harvard Medical Schoolhttp://mitchison.med.harvard.edu/protocols/chr1.htmlBuffers:Swelling Buffer (PME):
組織培養細胞染色體制備方法
組織細胞用于遺傳學分析最常見的是體外培養的細胞株，多為惡性腫瘤細胞株，且呈貼壁生長，僅小數細胞株為懸浮生長。培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和染色體標本制出清晰度高等優點。組織細胞染色體制備的關鍵是掌握好體外細胞的生長動態，只有處在對數生長期的細胞才能出現較高的分裂相，所以積水仙素處理的時機及量是染
人癌細胞染色體制備及觀察
一、實驗目的學習人類染色體制備的常規方法，了解人癌細胞染色體及其變異。二、實驗原理目前大多數癌癥都建立了相應的細胞株或細胞系，體外培養的癌細胞多屬于連續的周期細胞，可以用來制備染色體。國內外制備動物和人類染色體的常規方法是空氣干燥法，該方法的關鍵包括：1.秋水仙素的預處理：秋水仙素又叫秋水仙堿，它是
羊水細胞染色體制備方法（原位法）
細胞培養1. 將羊水（約20ml）轉移到無菌的離心管中，1000rpm離心10分鐘；2. 去除上清液，用于其它分析，保留細胞懸液約0.5~1ml，用培養基混勻到2~2.5ml左右；3. 將細胞懸液平分到3只Chromslide培養皿中；4. 培養24/48小時后，向每只Chromslide培養皿中加
骨髓細胞染色體標本的制備
一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者，特別是慢性或急性粒細胞性白血病，因為骨髓反映粒系統細胞增生情況，這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病，也不主張用外周血，因為加PHA刺激外周血培養，只能獲得正常淋巴細胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞，培養
動物染色體標本的制備與觀察
實驗原理凡細胞處于活躍增殖狀態，或者經過各種處理后，細胞就可進入分裂的任何動物組織，均可用于染色體分析。在正常動物體內，骨髓是處于不斷分裂的組織之一。給動物注射一定劑量的秋水仙堿即可使許多處于分裂的細胞停滯于中期，然后采用常規空氣干燥法制備染色體，即可得到大量可分析的染色體標本。本方法簡便、可靠，不
動物染色體標本的制備與觀察
實驗概要本實驗介紹了動物染色體標本（cell chromosome）制備的原理及操作步驟。實驗原理凡細胞處于活躍增殖狀態，或者經過各種處理后，細胞就可進入分裂的任何動物組織，均可用于染色體分析。在正常動物體內，骨髓是處于不斷分裂的組織之一。給動物注射一定劑量的秋水仙堿即可使許多處于分裂的細胞停滯于中
正常細胞常規核型的標本制備_腫瘤細胞染色體標本制備
實驗方法原理利用腫瘤細胞無限繁殖的特點，掌握其體外生長動態，取處于對數生長期的細胞便可獲得豐富的分裂相。腫瘤細胞染色體異常包括兩個方面：1. ?結構異常 ?即在腫瘤細胞常出現的染色體畸變，包括雙著絲點染色體、環狀染色體、斷裂的染色體、染色體裂隙及微小體等。2. ?數目異常 ?由于腫瘤細胞分裂失去應有
染色體CBG標本制備實驗——基本方案
實驗方法原理異染色質在整個分裂間期及分裂期都是濃縮的，因而其大小較為恒定。它們通常位于著絲粒附近，或在染色體臂上呈現“團塊”，這些染色質主要由C顯帶技術呈現，故稱為C帶。CBG即C帶、Ba（OH）2、Giemsa的簡寫。C帶的根本特征是選擇性地從染色體臂抽取DNA，但在C帶區有很強抗性，仍保留大部分
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，離心
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，
正常細胞常規核型標本制備_人淋巴細胞染色體標本制備
實驗方法原理在淋巴母細胞分裂高峰時加入秋水仙素，破壞細胞紡錘體的形成，使細胞停止在分裂中期。然后收集細胞，低滲處理，使細胞脹大，染色體伸展。接著進行固定并除去中期分裂相中殘存的蛋白質，使染色體清晰且分散良好。再結合離心技術去掉紅細胞碎片，然后采用空氣干燥法制片獲得中期染色體標本。實驗材料HeLa細胞
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒 完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）培養基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤 脫氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化鉀固定劑儀器、耗材 無菌錐形聚丙烯
骨髓培養基簡化了染色體制備流程
骨髓培養基根據間充質干細胞的生長需要，包含必需和非必需氨基酸、維生素、無機化合物、生長因子、胎牛血清以及其他補給成分。本品非常適用于培養骨髓間充質干細胞，能使人骨髓間充質干細胞在理想營養平衡狀態下進行多代擴增而不發生分化，能大大縮短細胞培養時間。產品嚴格無菌，無病毒和支原體，性能穩定。 骨髓培
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ?ml) 的注射 器 獲取肝素化的全血 試
絨毛標本分裂中期染色體涂片制備實驗
實驗材料絨毛樣本試劑、試劑盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液膠原蛋白酶溶液完全培養基秋水仙胺枸櫞酸鈉甲醛 冰乙酸儀器、耗材無菌 Watchmaker 精細鑷冷試管搖床試管混合器Sorvall GLC-2B 離心設備HL-4轉子和6個 15ml 離心管塑料培養皿倒置顯微鏡或解剖顯微鏡熱氣增濕器空
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
盡管從其他細胞也可以制備染色體，但人類外周血白細胞是最容易同步化的，從而可以對其染色體進行高分辨分析。實驗材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）
絨毛標本分裂中期染色體涂片制備實驗
實驗材料 絨毛樣本試劑、試劑盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液膠原蛋白酶溶液完全培養基秋水仙胺 枸櫞酸鈉甲醛 冰乙酸儀器、耗材 無菌 Watchmaker 精細鑷冷試管搖床試管混合器Sorvall GLC-2B 離心設備HL-4轉子和6個 15ml 離心管塑料培養皿倒置顯微鏡或解剖顯微鏡熱氣
小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗1
?培養以及小鼠外周血分裂相細胞收獲實驗實驗材料雌性小鼠7?10周齡試劑、試劑盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素鈉溶液秋水仙堿溶液固定劑儀器、耗材聚苯乙烯組織培養管肝素化的微量毛細分血管有蓋的12mm X 75mm 無菌管錐形玻璃離心管清潔的顯微鏡玻片實驗步驟基本方案 培養以及小鼠外周血分裂
小鼠細胞染色體制備及核型分析實驗2
GIEMSA 顯帶（G顯帶）實驗材料分裂中期染色體玻片試劑、試劑盒2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸鹽緩沖液玻片染色缸儀器、耗材亮視野顯微鏡實驗步驟1.于室溫存放染色體玻片 7~10d。2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的廣口瓶中孵育玻片 1.5 h，每個廣口瓶中盛放玻片
人類外周血染色體制備原理和操作步驟
一、原理人外周血小淋巴細胞，通常都處在G1期（或G0期），一般情況下不進行分裂。如在培養液中加入植物血凝素（PHA），這種小淋巴細胞受到刺激可轉化為淋巴母細胞，進入有絲分裂。短期培養后，經秋水仙素處理，低滲和固定，即可得到大量的有絲分裂細胞。人體的1ml外周血內一般含有約1×106~3×106個小淋
染色體制備過程中的滴片方法
樣品：外周血，骨髓，羊水（消化法）及其它樣品等滴片方法：1.載玻片：干的干凈載玻片2.滴片的細胞懸液量：每張載玻片1～２滴，每滴20～30ul3.染色體分散時間：將滴有細胞固定懸液的載片放在Maxchrome抽屜中分散5分鐘（>５分鐘，不影響染色體分散度）４.滴片方式；可以將載玻片放在Maxchro