wb免疫印跡法的主要顯色方法有哪些
Western免疫印跡(WesternBlot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 western顯色的方法主要有以下幾種: i.放射自顯影 ii.底物化學發光ECL iii.底物熒光ECF iv.底物DAB呈色 現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用第一種方法,目前發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理如下(二抗用HRP標記):反應底物為過氧化物+魯米諾,如遇到HRP,即發光,可使膠片曝光,就可洗出條帶。......閱讀全文
免疫印跡(Wb)的原理
(1)是一種蛋白質測定的技術,集合凝膠電泳的高分辨率,固定免疫測定的敏感及特異性和不需要對靶蛋白進行放射性核素標記,在固相膜上保持的時間很長等優點。(2)可以在樣本中檢測到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗體中檢測到單克隆抗體,還可以對已經轉移到固相膜上面的蛋白質進行連續的分析。
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)——Western印跡法
實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒裂解液PBSG 250考馬斯亮藍溶液NaClSDS上樣緩沖液電泳緩沖液轉移緩沖液麗春紅染液封閉液TBSTTBS洗脫抗體緩沖液顯影液定影液抗體化學發光試劑儀器、耗材高壓鍋玻璃勻漿器高速離心機分光光度儀-20℃低溫冰箱垂直板電泳轉移裝置恒溫水浴搖床多用脫色搖床實驗步驟一、操
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Western免疫印跡,是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 與Southern或Northern雜交方法類似,但We
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)
實驗方法原理 Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)
蛋白質免疫印跡(Western Blot )?? ?可以:(1)從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質;(2)定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況;(3)用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。實驗方法原理:? ? Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白
WB新時代開啟-GE醫療發布Amersham-WB蛋白免疫印跡系統
2014年9月24日,2014慕尼黑上海分析生化展在上海新國際博覽中心隆重拉開帷幕。GE醫療生命科學亮相2014慕尼黑上海分析生化展,舉辦新品發布會全球同步發布Western
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)——圖解
實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒裂解液PBSSDS上樣緩沖液電泳緩沖液轉移緩沖液麗春紅染液TBSTTBS洗脫抗體緩沖液抗體儀器、耗材電泳儀移液器脫色搖床顯影儀實驗步驟一、實驗步驟↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓展開
wb免疫印跡法的主要顯色方法有哪些
Western免疫印跡(WesternBlot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 western顯色的方法主要有以下幾種: i.放射自顯影 ii.底物化學發光ECL iii.底物熒光E
蛋白質免疫印跡(Western-Blot,WB-)——底物化學發光ECL法
蛋白質免疫印跡可應用于:(1)從蛋白質混合物中檢出目標蛋白質;(2)定量或定性確定細胞或組織中蛋白質的表達情況;(3)用于蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用后續分析。實驗方法原理Western免疫印跡,是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測的方法。對已知表達蛋白,可用相應抗體
Western免疫印跡
?Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理????與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝
Western-免疫印跡
實驗概要Western免疫印跡(Western ? Blotting)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似,但Western ? Blot采用的是聚丙烯
免疫印跡優點
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點: 1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作; 2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔; 3、 免疫印跡分析只需少量試劑; 4、 孵育、洗滌的時間明顯減短; 5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析
免疫印跡定義
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏
免疫印跡法
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
免疫印跡與免疫檢測
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 轉移緩沖液儀器、耗材 搖床海綿纖維素膜尼龍膜電轉儀實驗步驟 1. ?制備抗原樣品,并用小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠分離蛋白,在一個或多個泳道中分離預染色或生物素酰化的蛋白質分子量標準。2. ?電泳完成后,拆卸凝膠夾層,去除積層膠。以適量的轉移緩沖液室溫平衡凝膠30 m
什么是免疫印跡?
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏
免疫印跡法過程
免疫印跡法 是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。2、勻漿緩沖液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巰基乙醇 0
免疫印跡的優點
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點:1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作;2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔;3、 免疫印跡分析只需少量試劑;4、 孵育、洗滌的時間明顯減短;5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析和鑒定;6、結果以圖譜形
免疫酶染色試驗_免疫印跡法
免疫印跡法 (以檢測流行性出血熱病毒結構蛋白和 NP 核蛋白為例說明)實驗方法原理免疫印跡法 是將電泳與免疫酶染色結合起來的一種方法。它先經電泳 (SDS--PAGE)將病毒結構蛋白進行分離,通過轉印將被分離的各區帶原位轉移到硝酸纖維素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜
免疫印跡的基本步驟
免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。
免疫印跡法試劑準備
1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。 2、勻漿緩沖液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巰基乙醇 0.2ml;ddH2O 2.8ml。 3、轉膜緩沖液:甘氨酸2.9g;Tris 5.8g;SDS 0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容
免疫印跡的基本步驟
免疫印跡法( 以抗原分析為例)基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因采用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。
免疫印跡法的階段
免疫印跡法分三個階段進行.第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶陰電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快.此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區帶).第二階段為電轉移:將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素
什么是反向免疫印跡
中文名稱反向免疫印跡英文名稱reverse immunoblotting定 義一種用于分析抗體反應克隆性質的技術。即用等電聚焦法分離待測樣品中各組分,再以電泳法轉印至硝酸纖維素薄膜或其他材料上,加入同位素標記的抗原共溫育,反應后用酶標記抗體與之結合,從而判定與之起反應的克隆性質和數量。應用學科免疫
Western免疫印跡的原理
與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物
什么是免疫印跡法?
免疫印跡法 (Western Blot) 是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。免疫印跡法 (immun
免疫印跡技術(Immunoblotting-technique)
免疫印跡技術又稱蛋白質印跡(Western blotting)是一種借助抗原鑒定特異性抗體的有效方法,該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。本實驗以檢測可提取性核抗原(ENA)抗體為例。【實驗原理】先將ENA混合抗原經SDS-PAGE電泳,使各種抗原成分根據分子量不
什么是免疫印跡法
免疫印跡法 (Western blotting) 是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。 免疫印跡法(i
免疫印跡法檢測原理
免疫印跡法是在蛋白質電泳分離和抗原抗體檢測的基礎上發展起來的一項檢測蛋白質的技術,它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應的高特異性相結合。第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶負電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳