實驗過程中抗體選擇指導
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體，需要考慮如下幾種因素： （1） 分析或應用的類型 （2）樣本蛋白的結構性質 （3）樣本的種屬 （4）抗體宿主的種類 （5）抗體的標記和檢測 1 分析試驗的應用類型一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型，如： 可以應用于WB IHC ICC ELASA 分析等，如果抗體說明書沒有提及的應用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型，而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證，如果抗體不適用某些分析試驗，則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。 2 樣本蛋白的結構性質了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇最合適的抗體，至少需要考慮兩方面因素 (1)..待測樣本蛋白的結構域：抗體是由各種......閱讀全文
抗體的純化實驗
抗體的純化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G，它們分別從
IgG抗體純化實驗
雖然親和層析法是進行特異性抗體純化的首選，然而有時這種純化方式卻非必需，或者無法實施進行。在大多數錆況下，運鐵蛋白可發生共沉淀或共純化，能用凝膠濾過層析去除之。實驗材料抗體試劑、試劑盒SAS儀器、耗材透析膜離心機實驗步驟1. ?于4℃不斷攪拌下，往2體積的含有IgG的混合物中，逐滴加入1體枳pH7.
IgG抗體純化實驗
實驗材料 抗體試劑、試劑盒 SAS儀器、耗材 透析膜離心機實驗步驟 1. ?于4℃不斷攪拌下，往2體積的含有IgG的混合物中，逐滴加入1體枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不間斷地攪拌此混合物2~4 h以形成沉淀。2 000 g 離心20 min。?2. ?用預冷的33% SAS溶液在漩渦混合
梅毒抗體實驗分類
梅毒抗體的實驗檢測有將梅毒的病原體菌體和將菌體成分作為抗原的實驗方法，尤其梅毒螺旋體抗原是在大腸桿菌中發現的,被認為是梅毒主要抗原,檢測梅毒抗體的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,還有用于快速檢查的金標法.。根據所用的抗原不同分為兩類： 非梅毒 (類脂質血清反應)用正常牛心
抗體的純化實驗
實驗方法原理利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G，它們分別從金黃色化膿性葡萄球菌和 G 組鏈球菌分離純化。它們能特異結合到免疫球蛋白的 Fe 部分。由于它們對不同的免疫球蛋白有不同的親和力，所以應根據免疫球蛋白的種類和類
抗體的純化實驗
實驗方法原理 利用細菌胞壁蛋白的特性可以提供了一個快速、簡捷、特異、高效的抗體純化方法。這里細菌胞壁蛋白主要指蛋白 A 和蛋白 G，它們分別從金黃色化膿性葡萄球菌和 G 組鏈球菌分離純化。它們能特異結合到免疫球蛋白的 Fe 部分。由于它們對不同的免疫球蛋白有不同的親和力，所以應根據免疫球蛋白
ELISA實驗檢測抗體的實驗步驟
操作步驟： （1）將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。 （2）加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。 （3）加酶標抗抗體,主要根據你的一抗來
ELISA實驗檢測抗體的實驗步驟
（1）將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。 （2）加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。 （3）加酶標抗抗體,主要根據你的一抗來確定二抗用
多克隆抗體提取實驗
實驗材料 血清試劑、試劑盒 DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 燒杯布氏濾斗濾紙實驗步驟 1. ?稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g，置于1 000 ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細顆粒，再經酸堿處理后，用0.01～0.05 mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡
IgG抗體純化實驗2
實驗材料抗體試劑、試劑盒SAS儀器、耗材透析膜離心機實驗步驟1. ?準備好一根DEAE-Affi-Gel Blue柱子。用5倍柱床體積的加樣緩沖液平衡（7 ml 柱床體積/ml 抗血清或腹水）。此步驟及以下各步均在4℃下操作實施。2. ?于4℃下透析樣品40 h，中間換2次加樣緩沖液（每次換大約4
多克隆抗體純化實驗
實驗材料 動物血清樣品試劑、試劑盒 正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材 透析袋高速低溫離心機實驗步驟 一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L，pH4.0醋酸緩沖液，PBS?3. ?透析袋?4. ?高速低溫離心機?二、操作步驟?1. ?將待提取樣品用60 mmol/L，pH4.0醋
單克隆抗體的純化實驗——單克隆抗體的純化實驗
1~5 ml/min?的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱，用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫，采用A280監測。?3. ?依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白，洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中，中和緩沖液的體積應為所
抗肽抗體的制備實驗
提高免疫原性肽的抗血清，是最簡單的方法，獲得非隔離的蛋白質的抗體，例如，對來自DNA序列信息的推定蛋白質序列。 這種方法也是有用的，當隔離的抗原是困難或費時，或當抗原是一個大的蛋白家族的成員。實驗步驟： ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉
非標記抗體免疫電鏡實驗
實驗方法原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
梅毒抗體有哪些實驗分類
梅毒抗體的實驗檢測有將梅毒的病原體菌體和將菌體成分作為抗原的實驗方法，尤其梅毒螺旋體抗原是在大腸桿菌中發現的,被認為是梅毒主要抗原,檢測梅毒抗體的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,還有用于快速檢查的金標法.。根據所用的抗原不同分為兩類： 非梅毒 (類脂質血清反應)用正常牛心
酶與抗體的偶聯實驗
實驗材料 抗體試劑、試劑盒 磷酸鈉HRPO碳酸鹽緩沖液過碘酸鈉SASTrisEDTABSA甘油儀器、耗材 透析膜離心機實驗步驟 1. ?濃度≥1 mg/ml 抗體溶液對2 l 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液透析，于4℃緩慢搖動下過夜。2. ?10 mg HRPO溶解于1 ml 0.1
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要 本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。 實驗原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法
抗肽抗體的制備實驗2
實驗材料 抗體 試劑、試劑盒 磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS 儀器、耗材 分光光度計離心機 實驗步驟 1. ?將10 mg 的血藍蛋白溶于2 ml pH10的硼酸緩沖液中，置于15 ml 的玻璃試管中，溫和振搖。 2. ?加10 μmol
單克隆抗體的純化實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒Tris腹水液寧酸鹽緩沖液甘氨酸乙酸鹽緩沖液儀器、耗材超濾器濾膜實驗步驟1. ?將10 ml 經CNBr活化Sepharose 4B溶脹于1 mmol/l HCl中，然后轉移至玻璃沙漏斗中，并用：①200~500 的1 mmol/l HCl和②200~500 ml 偶聯緩沖
讓實驗中的抗體乖乖聽話
加州大學圣地亞哥分校的細胞生物學家Stephan Lange的論文手稿基本上都準備好了，這時他打算再檢查核對一下他的抗體：Lange對缺失G蛋白偶聯受體的小鼠樣品進行染色，按道理說抗體不會出現信號。然而結果卻是它顯色了，Lange只好把他論文中基于抗體的這部分刪去，而剩下的一部分卻不足以吸引人了
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
單克隆抗體上清制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 目的雜交瘤試劑、試劑盒 完全 DMEM-10 培養液（含 5～10 mmol／L HEPES pH 7.2～7.4）儀器、耗材 50 ml 無菌錐形離心管175 cm2 組織培養瓶實驗步驟 1. 將雜交瘤置于一個盛有完全 DMEM-10 培養基的 175 cm2 組織培養瓶中
單克隆抗體的提純實驗
1．材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 20mMol/LNaCl (2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 40mMol/LNaCl (3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 80mMol/LNaCl (4)
卵黃抗體制備的實驗材料
1.健康產蛋雞（最好是SPF雞）、免疫抗原（如雞新城疫滅活疫苗）、弗氏佐劑。?2.滅菌生理鹽水或0.01mol/L pH7.2 PBS、海藻酸鈉、飽和硫酸銨等。?3.毛細滴管、注射器、碘酊棉、酒精棉、燒杯、玻璃棒、離心管、pH試紙等。?4.微量振蕩器、離心機、分光光度計等。
抗肽抗體的制備實驗1
實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉緩沖液MBS二甲基酰胺EDTAPBS儀器、耗材分光光度計離心機實驗步驟1. ?將10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液中，置于一個2 ml 的玻璃試管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室溫下溫和攪拌30 min。?2. ?加
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
(一) 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
酶與抗體的偶聯實驗1
實驗材料抗體試劑、試劑盒磷酸鈉HRPO碳酸鹽緩沖液過碘酸鈉SASTrisEDTABSA甘油儀器、耗材透析膜離心機實驗步驟1. ?濃度≥1 mg/ml 抗體溶液對2 l 0.1 mol/l pH6.8的磷酸鈉緩沖液透析，于4℃緩慢搖動下過夜。2. ?10 mg HRPO溶解于1 ml 0.1 mol/
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
單克隆抗體的純化實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 Tris腹水液寧酸鹽緩沖液甘氨酸乙酸鹽緩沖液儀器、耗材 超濾器濾膜實驗步驟 1. ?將蛋白A-Sepharose置于Tris緩沖液中（超過50倍的量，v/v）充分溶脹。在室溫下將其灌入直徑為2.5 cm 玻璃層析柱中，用Tris緩沖液使其平衡。2. ?腹水濃稀釋于3倍體
單克隆抗體上清制備實驗
與多克隆抗血清相比，采用單克隆抗體（MAb）的最主要的優勢就是有可能得到大量的特異性單克隆抗體可供應用。MAb 制劑通常包括雜交瘤上清、由接種了雜交瘤的小鼠制備的腹水，以及純化的 MAb。雜交瘤上清容易制備，特別是用于制備大量不同的 MAb , 但其中 MAb 的濃度則相對較低。為得到純化的制劑，可