DCCIK細胞制備方法(二)
1.外周血單個核細胞的采集 1.1 用血細胞分離機采集患者自身的外周血單個核細胞80 - 100ml; 1.2 淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化單個核細胞(PBMC); 1.3 無血清培養液洗滌2次,獲得純度在90%以上的PBMC,細胞數量需達到1-3 x 108。2.(可選步驟)腫瘤抗原的制備] 用于負載DC的腫瘤抗原可以是腫瘤特異性抗原肽(Tumor-Specific Antigens, TSA)或腫瘤相關抗原(Tumor-Associated Antigens, TAA),也可以是腫瘤全細胞抗原。 用TSA或TAA負載的DC具有很好可克服這些缺陷,因為此時無需知道那些抗原是腫瘤細胞的TSA或TAA,而且全抗原中的多種不同腫瘤抗原沖擊DC可誘導產生針對不同抗原決定簇的細胞毒T......閱讀全文
淋巴細胞染色體制備方法
1. 向含有細胞培養基的細胞培養管中無菌添加全血0.5ml,蓋緊培養瓶,充分混均;2. 水平培養72 h(37℃);3. 加入20ul 秋水溶液,培養2 h;4. 離心5 min(2000 rpm);5. 去除上清液,保留0.5ml的細胞;6. 重新充分混懸細胞1;7. 加入5ml 低滲溶液(KCl
感受態細胞的制備方法
CaCl2法1.將快速生長的大腸桿菌置于經低溫(0℃)預處理的低滲氯化鈣溶液中,便會造成細胞膨脹,同時Ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結構,促使細胞外膜與內膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區域,誘導細胞成為感受態細胞細胞壁通透性發生變化,極易與外源DNA相粘附并在細胞表面形成抗脫氧核糖核
DC(樹突狀細胞)的制備方法(三)
3.??? DC 細胞的培養及鑒定3.1? 步驟 1 中獲得的 PBMC? 用無血清培養液調整細胞濃度至 2 x 106/ml,置于培養瓶內;3.2? 37℃,5% CO2 培養箱中孵育 2h,以使單核細胞貼壁;3.3 洗去懸浮細胞,在貼壁細胞中加入含重組人 GM-CSF(500-1,000U/ml
DC(樹突狀細胞)的制備方法(一)
【背景】DC 是「Dendritic Cells」的縮寫,中文全稱為「樹突狀細胞」,因其成熟時伸出 許多樹突樣或偽足樣突起而得名。DC 是由 2011 年諾貝爾獎獲得者、加拿大 籍科學家 Ralph M. Steinman 于 1973 年發現的,是目前發現的功能最強的抗原遞呈細胞 (A
清華大學專家:魏則西之死背后的免疫療法
最近兩天,西安電子科技大學大學生魏則西之死引發滔滔輿論。這位21歲的滑膜肉瘤患者經歷了漫長痛苦的放療和化療后,于2016年4月12日安靜辭世。 滑膜肉瘤是一種惡性腫瘤,轉移性強,目前難以治療。魏則西生前在傳統的治療手段無望的時候,通過百度搜索找到武警北京總隊第二醫院,接受一種號稱為“最先進技術
關于雜交瘤細胞飼細胞的制備方法介紹
小鼠腹腔細胞制備方法: 1.引頸處死小鼠,用酒精消毒表體。 2.切開腹部皮膚剝向兩側,暴露出腹壁。 3.用無菌 7 號針頭注射器,吸取 3ml 無血清培養液。 4.用小鑷夾起腹壁,注入 3ml 無血清培養液,用手反復輕輕揉腹壁,再反復抽吸 3~5 次。 5.收集末次吸得的細胞,注入 5
二甲基氨基乙醇的制備方法介紹
1.環氧乙烷法由二甲胺與環氧乙烷進行氨化,經蒸餾、精餾、脫水而得。 2.氯乙醇法由氯乙醇與堿進行皂化生成環氧乙烷,再與二甲胺合成得到二甲氨基乙醇。工業品二甲氨基乙醇,純度≥95%。原料消耗定額:氯乙醇(32%)5500kg/t、二甲胺(40%)2200kg/t。生產時,也可以將氯乙醇直接滴加到
二水合磷酸氫鈣的制備方法
二水合磷酸氫鈣因為具有優異的生物相容性以及骨傳導性能而被廣泛用作生物醫學材料。其與人骨的成分和結構具有相似性,在體液或血漿中具有低的溶解度,植入人體內無毒、無害、無致癌作用,并且具有良好的生物活性、骨傳導性和生物相容性,被廣泛用于受損骨組織的修復,牙槽脊的牙根修復,髖關節和膝關節假體,骨組織假體的表
二甲基乙酰胺有幾種制備方法
二甲基乙酰胺四種制備方法:二甲基乙酰胺,即N,N-二甲基乙酰胺,又名乙酰二甲胺、醋酸二甲基胺。無色透明液體。能與水、醇、醚、酯、苯、三氯甲烷和芳香化合物等有機溶劑任意混合。二甲基乙酰胺能溶解多種化合物,與水、醚、酮、酯等完全互溶,具有熱穩定性高、不易水解、腐蝕性低、毒性小等特點,對多種樹脂,尤其是聚
概述二甲基乙酰胺的制備方法
1、乙酐法二甲胺與醋酐在0-20℃時進行酰化反應,然后用液堿低溫中和除去醋酸,分離出醋酸鈉,中和液再進行堿洗,精餾,取沸程164-166.5℃餾分為成品。 原料消耗定額:乙酐(95%)1150kg/t;二甲胺(40%)1898kg/t。 2、乙酰氯法由二甲胺與乙酰氯反應,也可制備得到二甲基乙
常用細胞凋亡檢測方法(二)
二、磷脂酰絲氨酸外翻分析(Annexin V法)? 磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于細胞膜的內側,但在細胞凋亡的早期,PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,
流式細胞術常用樣品的制備方法
實驗概要流式細胞術的實驗檢測對象是單細胞懸液,因此,在組織化學和免疫組織化學實驗中欲對待測樣品細胞進行分類計數,也需把樣品制備成細胞懸液,并要求被檢細胞大小為0.2~80pm,每個樣品中至少有20 000個細胞,細胞濃度為105~107個/ml。制備成的單細胞懸液經熒光或免疫熒光標記即可上機檢測。本
組織培養細胞染色體制備方法
組織細胞用于遺傳學分析最常見的是體外培養的細胞株,多為惡性腫瘤細胞株,且呈貼壁生長,僅小數細胞株為懸浮生長。培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和染色體標本制出清晰度高等優點。組織細胞染色體制備的關鍵是掌握好體外細胞的生長動態,只有處在對數生長期的細胞才能出現較高的分裂相,所以積水仙素處理的時機及量是染
流式細胞術檢測樣品推薦制備方法
A. 直接標記抗體(FITC標記抗體):(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸
紅細胞凝集試驗的樣本的制備方法
1.?阿氏液(Alsever):即紅細胞保養液枸櫞酸鈉(5H2O) 0.80g枸櫞酸(H2O) 0.055g葡萄糖 2.05g氯化鈉 0.42g雙蒸水 加至 100 ml將以上試劑加熱溶解于雙蒸水中,調整pH至6.8,115℃滅菌10min,4℃保存備用。2. 0.5% 雞紅細胞制備方法先用滅菌注射
感受態細胞制備原理及方法
理:?目前,感受態細胞的制備常用冰預冷的CaCl2處理細菌的方法制備,即用低滲CaCl2溶液在低溫(0℃)時處理快速生長的細菌,從而獲得感受態細菌。此時細菌膨脹成球形,外源DNA分子在此條件下易形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附在細菌表面,通過熱激作用促進細胞對DNA的吸收。轉化效率可達106-
感受態細胞制備原理及方法
摘要: 目前,感受態細胞的制備常用冰預冷的CaCl2處理細菌的方法制備,即用低滲CaCl2溶液在低溫(0℃)時處理快速生長的細菌,從而獲得感受態細菌.本方法的關鍵是選用的細菌必須處于對數生長期,實驗操作必須在低溫下進行. 原理:
羊水細胞染色體制備方法(原位法)
細胞培養1. 將羊水(約20ml)轉移到無菌的離心管中,1000rpm離心10分鐘;2. 去除上清液,用于其它分析,保留細胞懸液約0.5~1ml,用培養基混勻到2~2.5ml左右;3. 將細胞懸液平分到3只Chromslide培養皿中;4. 培養24/48小時后,向每只Chromslide培養皿中加
脾臟組織單細胞懸液的制備方法
1.?剪碎法:將組織塊放入平皿后,加入少量F液及20%胎牛血清;用眼科剪將組織剪至勻漿狀,加入5mlF液及20%胎牛血清;用吸管吸取組織勻漿,用100目不銹鋼濾網(另購)過濾到試管內;離心沉淀1500轉/分×3 min,再用細胞洗滌液清洗3次,每次以500rpm短時低速離心除去細胞碎片,以200目不
肺癌放療的概述
肺癌放療和生物治療、據統計在非小細胞肺癌的臨床診斷中、僅20%的病例能進行根治性手術切除、且在實行手術切除的病例中其5年生存率僅為30%—40%。因此為提高肺癌患者的局部局部控制率和生存率、術后的放療被得到了廣泛的應用。但是隨著醫學的發展、人們對術后放療的作用有了新的認識。 肺癌放療和生物治療
肺癌放療的并發癥
肺癌放療和生物治療、據統計在非小細胞肺癌的臨床診斷中、僅20%的病例能進行根治性手術切除、且在實行手術切除的病例中其5年生存率僅為30%—40%。因此為提高肺癌患者的局部局部控制率和生存率、術后的放療被得到了廣泛的應用。但是隨著醫學的發展、人們對術后放療的作用有了新的認識。 肺癌放療和生物治療
關于三氧化二鐵的濕法制備方法介紹
將一定量的5%硫酸亞鐵溶液迅速與過量氫氧化鈉溶液反應(要求堿過量 0.04~0.08g/mL),在常溫下通入空氣,使之全部變為紅棕色的氫氧化鐵膠體溶液,作為沉積氧化鐵的晶核。以晶核為載體,以硫酸亞鐵為介質,通入空氣,在75~85℃,在金屬鐵存在下,硫酸亞鐵與空氣中氧氣作用生成氧化鐵(即鐵紅)沉積
非晶態二氧化硅的制備方法
非晶態二氧化硅的制備包含五步,分別是制備二氧化硅質的凝膠、造粒工序、燒結工序、清洗工序、干燥工序。 1、制備二氧化硅質的凝膠 使四氯化硅水解而生成二氧化硅質的凝膠、或使四甲氧基硅烷等有機硅化合物水解而生成二氧化硅質的凝膠、或者使用氣相二氧化硅生成二氧化硅質的凝膠。 2、造粒工序 通過干燥
關于二氧化鈦的制備方法介紹
1、氣相氧化法 用干燥的氧氣在923K-1023K進行氣相氧化: TiCl4+O2=TiO2+2Cl2 2、硫酸法 首先用磨細的鈦鐵礦和硫酸(濃度≥80%,溫度343K-353K)在不斷通入空氣并且攪拌的條件下反應,制得可溶性硫酸鹽: FeTiO3+H2SO4=TiOSO4+FeSO4
晶態二氧化硅的制備方法簡介
將含有二氧化硅的原料(硅源)、水、結構導向劑、堿或酸按一定的比例混合均勻,投入耐壓反應釜內密封,然后升溫至100-220℃,恒溫5小時至10天,反應結束后,將反應釜迅速冷卻,反應產物用水或稀酸洗滌至pH為8-11,烘干得到原粉,原粉或加入粘結劑成型后的產物在馬弗爐或管式爐中焙燒活化。
概述二氧化錳的制備方法
主要取自天然礦物軟錳礦。普遍采用高溫硫酸錳溶液電解法制取,碳酸錳礦和軟錳礦均可作為原料。硫酸錳溶液的制備包括浸取、除鐵、中和、除重金屬、過濾、靜置除鈣鎂等工序,經高溫電解后制得粗產品,再經處理包括剝離、粉碎、洗滌、中和與干燥等過程制得合格晶。當采用氯化錳溶液電解可制得纖維狀二氧化錳。還有碳酸錳、
丙二醇-制備流程
分子式:C3H8O2 結構式: 無色粘稠穩定的吸水性液體,幾乎無味無臭,易燃, 低毒。粘度(20 ℃)60.5mpa.s,比熱容(20 ℃)2.49kJ/(kg.℃),汽化熱(101.3kpa)711kJ/kg。 與水、乙醇及多種有機溶劑混溶。 丙二醇可用作不飽和聚酯樹脂的原料. 名稱: 丙二
丙二醇-制備流程
分子式:C3H8O2 結構式: 無色粘稠穩定的吸水性液體,幾乎無味無臭,易燃, 低毒。粘度(20 ℃)60.5mpa.s,比熱容(20 ℃)2.49kJ/(kg.℃),汽化熱(101.3kpa)711kJ/kg。 與水、乙醇及多種有機溶劑混溶。 丙二醇可用作不飽和聚酯樹脂的原料. 名稱: 丙二
抗血清的制備(二)
3、免疫途徑,劑量和免疫周期 ?抗原注射途徑可根據不同抗原及試驗要求,選用皮內、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結內等不同途徑注入抗原進行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴結周圍、耳后等處皮內或皮下多點注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周。常規免疫方案為抗原加CFA皮下多點注射進行基礎免疫;再以
固體樣品的制備(二)
水泥樣品處理 方法一:準確稱量0.1克樣品到125毫升三角瓶燒杯中,加適量的亞沸水再加10毫升鹽酸(1+1)溶解,低溫加熱待樣品完全溶解后微沸5分鐘,冷卻轉移到100毫升容量瓶,水稀釋定容。 方法二:準確稱量0.1克樣品到50毫升塑料王(PTFE燒杯)中,加入10毫升氫氟酸,1毫升高氯酸分解