活體電穿孔法介紹（一）
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種通道能維持幾毫秒到幾秒,然后自行恢復。在此期間生物大分子如DNA 可通過這種微小的通道進入細胞 。近年來活體電穿孔法用于轉基因研究的報道不斷增多,在基因治療方面的優勢也日趨顯著,是一種很好的活體基因導入方法。活體電穿孔法可用于檢測瞬時表達系統中載體的表達狀況。大量的研究表明活體電穿孔法在基因治療方面有非常好的應用前景。因此目前國內外對活體電穿孔法介導外源基因轉移的研究越來越多。2、活體電穿孔的法的特點活體電穿孔法基因導入和表達效率較高,它的特點主要在以下幾個方面:首先,靶器官的選擇面廣,理論上任何組織和器官都可......閱讀全文
BTX特殊電極的應用匯總
BTX特殊電極的應用 此次只將貼壁轉染、活體等進行總結，對于大規模的轉基因的應用，由于BTX公司有新的發展，故此次未將其列入，待下次完善后補充。 1、 Adherent Cell Transfections (ACT)貼壁細胞轉染 ? In-situ electroporat
電穿孔技術物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子，例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明，該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的，所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中，阻擋材料被電離，產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔的技術特點
電穿孔（Electroporation）也叫電轉染，是通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法，是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔技術的應用
當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法，電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型，包括細菌、酵母、植物和動物細胞；而且，它還能作為注射方法（稱為
什么是細胞電穿孔？
電穿孔（Electroporation）也叫電轉染，是通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法，是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔轉染－DNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液 試劑、試劑盒 Giemsa 染液 甲醇 磷酸鹽緩沖液
電穿孔轉染－DNA－實驗
實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒 Giemsa 染液甲醇磷酸鹽緩沖液丁酸鈉載體 DNA細胞生長培養基儀器、耗材 組織培養皿基因脈沖器 II電穿孔設備與電轉化池Sorvall H1000B 轉子或類似設備實驗步驟 材料緩沖液與溶液貯存液、緩沖液與試劑的成分見附錄 1。稀釋貯存液至所需
電穿孔轉染－DNA－實驗
電穿孔可以有效地轉染磷酸鈣-DNA 沉淀物等其他方法轉染效果不好的細胞系。但是，與其他轉染方法一樣，未使用過的細胞系進行電穿孔轉染的實驗條件要經過優化。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒Giem
電穿孔的技術簡介
電穿孔或電滲透是微生物學技術，其中將電場施加到細胞以增加細胞膜的滲透性，從而允許化學品，藥物或DNA被引入細胞。在微生物學中，電穿孔過程通常用于通過引入新的編碼DNA來轉化細菌，酵母或植物原生質體。如果細菌和質粒混合在一起后，質粒可以在電穿孔后轉移到細菌中，盡管取決于正在轉移的細胞穿透肽或CellS
電穿孔技術醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下，他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖，并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔，2007年
電穿孔轉染真核細胞實驗——電穿孔轉染哺乳動物細胞
電穿孔法應用高壓電擊短暫或穩定地將DNA導人細胞，是一種目前大受好評的方法。它適用于多數類型的細胞，既可產生高頻率的穩定轉染，又可產生短暫的基因表達，并且由于其所需步驟甚少，因而比其他技術更為容易。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材電穿孔儀器電擊池實驗步驟1. ?在完全
基因電轉染系統的技術革新
經過近30年的發展革新，電轉染已成為基因的功能研究領域中不可或缺的技術手段。下文不僅是一篇新上市的轉染儀器的介紹，更是電轉染儀技術革新的介紹，因為：??????????????????????????????????NEPA21高效基因轉染系統???? ------擁有全球領先的ZL電脈沖芯片技術和
電穿孔實驗的物理機制
電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子，例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明，該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的，所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中，阻擋材料被電離，產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下，在電穿孔
CRISPR重要成果:電穿孔技術
簡單的電穿孔似乎使T細胞更容易接受新的遺傳物質，這可以加速免疫療法的發展。 加州大學舊金山分校的研究人員發表了題為“Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting”的文章，指
電穿孔和電融合技術
實驗概要了解細胞電穿孔(electroporation)和電融合(Electrofusion Method)的基本原理。學習電穿孔和電融合基本技術。實驗原理當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、 ? RN
電穿孔轉染真核細胞實驗
實驗材料 哺乳動物細胞試劑、試劑盒 完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材 電穿孔儀器電擊池實驗步驟 1. ?在完全培養液中培養特轉染細胞至對數生長晚期，4℃ 640 g 離心5 min，收集細胞。?2. ?將細胞沉淀用其半量體積的預冷電穿孔緩沖液重懸洗滌，4℃ 640 g 離心5 min。3. ?對于穩
電穿孔轉染真核細胞實驗
電穿孔轉染哺乳動物細胞 植物原生質體細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 哺乳動物細胞
酵母轉化實驗_電穿孔轉化
實驗材料酵母試劑、試劑盒二硫蘇糖醇山梨醇儀器、耗材電穿孔儀器電擊池水浴鍋實驗步驟1. ?實驗前兩天，將轉化用酵母菌株的單菌落接種于5 ml YPD培養基中，30℃過夜培養至飽和。?2. ?轉化前一天晚上，在裝有500 ml YPD培養基的2 L 無菌燒瓶中接種適量的過夜培養液，于30℃劇烈搖動培養過
電穿孔技術的物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子，例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明，該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的，所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中，阻擋材料被電離，產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔技術的方法步驟
除了能使細胞膜具有通透性，讓外界的分子擴散入胞液中以外，高強度的電場脈沖也能引起細胞融合，這一現象叫做電融合。然而，在用電脈沖融合前必須使細胞相互緊密接觸，這一電融合方法在原生質融合制取雜交植物，胚胎細胞相互融合制備動物克隆方面非常有用，尤其在制取雜交瘤細胞制備單克隆抗體方面用處很大。幾個實驗室已證
電穿孔實驗的步驟過程
電穿孔是具有幾個不同階段的多步驟過程。首先，將短的電脈沖，必須應用。典型的參數是300-400 mV，跨越膜的時間小于1 ms（注意：電池實驗中使用的電壓通常要大得多，因為它們被用于跨越大體積溶液的較大距離，所以橫跨實際膜的結果場只是所施加的偏差的一小部分）。在施加這個電位時，膜像電容器一樣充電通過
活體染料
中文名稱活體染料英文名稱vital stain;vital dye定 義可使活細胞呈染色反應的物質。如中性紅、尼羅蘭。某些染色劑對細胞器染色的具有選擇性，如詹納斯綠可專一性地使線粒體著色。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？（一）
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ ? ? 細胞系和細胞類型 ? ? 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 ? ? 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, ?Rice, Tomato
如何選擇BTX轉基因儀（電轉儀）？
1、確定目標對象：也就是你所有轉的目的物是什么東西？ 細胞系和細胞類型 細胞類型包括人類、哺乳動物、細菌、植物、藻類、霉菌、寄生蟲等 細胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato，Tr
電穿孔技術的技術優勢
與其他常用的導入外源物質的方法相比，電穿孔具有很多優點。首先，不必象顯微注射那樣使用玻璃針，不需要技術培訓和昂貴的設備，可以一次對成百萬的細胞進行注射。第二，與用化學物質相比，電穿孔幾乎沒有生物或化學副作用。第三，因為電穿孔是一種物理方法，較少依賴細胞類型，因而應用廣泛。實際上，對大多數細胞類型，用
電穿孔技術實驗室實踐
電穿孔是用電穿孔器，在細胞溶液中產生靜電場的專用器具進行的。將細胞懸浮液被吸取到一具有兩個鋁玻璃或塑料比色皿電極在其兩側。對于細菌電穿孔，通常使用約50微升的懸浮液。在電穿孔之前，將這種細菌懸液與質粒混合被改變。將混合物移液到比色杯中，設定電壓和電容，并將比色杯插入電穿孔儀中。該過程需要電極和懸架之
電穿孔技術的醫學應用特點
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下，他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖，并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔，2007年
不可逆的電穿孔技術簡介
在Gustave Roussy研究所，由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下，他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖，并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔，2007年，一組科學家在
活體染色定義
因此活染技術通常可用來研究生活狀態下的細胞形態結構和生理、病理狀態。根據所用染色劑的性質和染色方法的不同，通常把活體染色分為體內活染與體外活染兩類。體內活染是以膠體狀的染料溶液注入動、植物體內，染料的膠粒固定、堆積在細胞內某些特殊結構里，達到易于識別的目的。它是由活的動、植物分離出部分細胞或組織小塊
活體成像概述
一、引子 ?自從Roentgen發現了X光的用途，動物活體成像就走進了科學家的視野。活體成像有很多種模式，除了X光的離子輻射成像，還有聲音、磁鐵甚至光光成像。每種都有缺點和優點，舉例來說，要確定解剖結構的位置和形狀，CT掃描、MRI、超聲波可能是較好的選擇，但涉及到腫瘤細胞的注射位置、表達層面，他們