噬菌體的檢查及效價測定(二)
六、結果:1. 噬菌體檢查① 離心分離加熱法OD650光密度值正常發酵液(對照) 異常發酵液(試驗)離心上清液(A1)離心上清液加熱煮沸后(A2)A2/A1② 繪出平板上的噬菌斑檢測結果,指出噬菌斑和宿主細菌。2. 噬菌體效價測定① 平板上噬菌斑數目噬菌體稀釋度10-4、10-5、10-6 對照噬菌斑數(個)/皿平均每皿噬菌斑數目② 計算噬菌體效價(即噬菌斑形成單位pfu, plague-forming unit)。......閱讀全文
噬菌體效價的測定
實驗方法原理 噬菌體的效價就是 1 ml 培養液中所含活噬菌體的數量。效價測定的方法,一般應用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,噬菌體產生肉眼可見的噬菌斑,因此,能進行噬菌體的計數,但因噬菌斑計數方法其實際效率難以接近 100%(—般偏低,因為有少數活噬菌體可能未引起感
噬菌體效價的測定實驗
實驗方法原理噬菌體的效價就是 1 ml 培養液中所含活噬菌體的數量。效價測定的方法,一般應用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細菌的瓊脂平板上,噬菌體產生肉眼可見的噬菌斑,因此,能進行噬菌體的計數,但因噬菌斑計數方法其實際效率難以接近 100%(—般偏低,因為有少數活噬菌體可能未引起感染),所以為了
噬菌體的檢查及效價測定
1、目的:1.1 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。1.2 學會檢查噬菌體的方法。1.3 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。2、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌 裂解,釋
噬菌體的檢查及效價測定
實驗方法原理噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們再擴散和侵染周圍細胞,最終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細菌的平板上出現肉眼可見的空斑──噬
噬菌體的檢查及效價測定(二)
六、結果:1. 噬菌體檢查① 離心分離加熱法OD650光密度值正常發酵液(對照) 異常發酵液(試驗)離心上清液(A1)離心上清液加熱煮沸后(A2)A2/A1② 繪出平板上的噬菌斑檢測結果,指出噬菌斑和宿主細菌。2. 噬菌體效價測定① 平板上噬菌斑數目噬菌體稀釋度10-4、10-5、10-6?對照噬菌
噬菌體的分離、純化及效價測定
一、目的要求 1、學習分離、純化噬菌體的基本原理和方法。 2、學習噬菌體效價測定的基本方法。 二、基本原理 因為噬菌體是專性寄生物,所以自然界中凡有細菌分布的地方,均可發現奇特異的噬菌體的存在,亦即噬菌體是伴隨著宿主細菌的分布而分布的,例如糞便與陰溝污水中含有大量大腸桿菌,故也能很容
噬菌體的檢查及效價測定(一)
一、目的:1. 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。2. 學會檢查噬菌體的方法。3. 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。二、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量
噬菌體效價的計算和技術優點
又稱噬菌斑形成單位(pfu)數,指每毫升試樣中含有侵染性噬菌體的粒子數。測定方法有雙層平板法,其優點有:1)彌補平板不平2)噬菌斑位于同個平面,較清晰3)上層為半固體培養基,有利噬菌體擴散
微生物學技術:噬菌體的檢查及效價測定
一、目的:1. 了解噬菌體效價的含義及其測定原理。2. 學會檢查噬菌體的方法。3. 掌握用雙層瓊脂平板法測定噬菌體效價的操作技能。二、原理:噬菌體是一類專性寄生于細菌和放線菌等微生物的病毒,其個體形態極其微小,用常規微生物計數法無法測得其數量。當烈性噬菌體侵染細菌后會迅速引起敏感細菌裂解,釋放出大量
尿激酶的效價測定
1 酶活力(1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥甲基氨基甲烷緩沖
尿激酶的效價測定
1 酶活力(1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥甲基氨基甲烷緩沖
ELISA測定抗體效價方法
我用的是間接ELISA,以下copy自我的畢業論文:將抗原用包被液稀釋至約10 ?g/mL;分別將陽性血清和陰性血清用TBS倍比稀釋,稀釋梯度從1:200,1:400至1:204800,二抗用的是HRP標記的羊抗兔IgG(1:5000稀釋) 。酶標儀測定450nm處各個孔的吸光度(A450),計算陽
雙層平板法測噬菌體效價的優缺點
雙層平板法的優點:①加了底層培養基后,可使原來底面不平的玻璃皿的缺陷得到了彌補;②所形成全部噬菌體斑都接近處于同一平面上,因此不僅每一-噬菌斑的大小接近、邊緣清晰,而且不致發生上下噬菌斑的重疊現象;③因上層培養基中瓊脂較稀,故形成的噬菌斑較大,更有利于計數。
肝素鈣的效價測定方法
照肝素鈉項下的方法測定抗Ⅱa因子效價應為標示值的90%~110%,抗Xa因子效價與抗Ⅱa因子的效價比應符合規定。
硫酸魚精蛋白的效價測定
效價測定照硫酸魚精蛋白生物測定法(通則1213)測定,應符合規定,測得的結果應為標示值的90%~110%。
凝血酶的效價測定
效價測定纖維蛋白原溶液的制備取纖維蛋白原,加0.9%氯化鈉溶液適量溶解,用0.05 mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節pH值至7.0~7.4,再用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含0.1%凝固物的溶液,備用。標準品溶液的制備取凝血酶標準品,加0.9%氯化鈉溶液溶解并分別定量稀釋制
抗生素效價生物測定
實驗方法原理?管碟法是擴散法中的一種,是將已知濃度的標準抗生素溶液與未知濃度的樣品溶液分別加到一種標準的不銹鋼小管(即牛津小杯)中,在含有敏感試驗菌的瓊脂表面進行擴散滲透。比較兩者對被試菌的抑制作用,測量出抑菌圈的大小,以計算抗生素的濃度。在一定的濃度范圍內,抗生素的濃度與抑菌圈直徑在雙周半對數表上
凝血酶的效價測定
纖維蛋白原溶液的制備 取纖維蛋白原約30mg,精密稱定,用0.9% 氯化鈉溶液1.5ml溶解,加凝血酶0.1ml(約3單位),快速搖勻,室溫放置約1小時至完全凝固,取出凝固物,用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產生渾濁,在105℃干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(%)。然后用0.
抑肽酶的效價測定方法
底物溶液取N-苯甲酰-L精氨酸乙酯鹽酸鹽171.3mg,加水溶解并稀釋至25ml。臨用新制。胰蛋白酶溶液取胰蛋白酶對照品適量,精密稱定,加鹽酸滴定液(0.01mol/L)溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.8單位(每1ml中約含1mg)的溶液,臨用新制并置冰浴中。胰蛋白酶稀釋液精密量取胰蛋白酶溶液1
尿激酶的效價測定介紹
1、酶活力 (1)試劑 牛纖維蛋白原溶液取牛纖維蛋白原,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝結蛋白的溶液。 牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化鈉緩沖液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0單位的溶液。 牛纖維蛋白溶酶原溶液 取牛纖維蛋白溶酶原,加三羥
垂體后葉粉的效價測定方法
升壓素照升壓素生物測定法(通則1205)測定,即得。縮宮素照縮宮素生物測定法(通則1210)測定,并將測得結果與升壓素效價進行比較,即得。
什么是IgG抗A效價測定
IgG抗A-效價測定是檢查孕婦血清中有無IgG性質的抗A抗體并滴定其效價,評估ABO-HDN發生的可能性。
糜蛋白酶的效價測定
照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。底物溶液冰凍保存,但不得反復凍融。取N-乙酰-L酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫鈉溶液61.1ml,混合,pH值為7.0)50ml,溫熱使溶解,冷卻后再稀
肝素鈉的效價測定方法
抗Xa因子照肝素生物測定法(通則208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效價測定法),即得抗Ⅱa因子照肝素生物測定法(通則1208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效價測定法),即得。抗Ⅱa因子效價應為標示值的90%~110%,抗Xa因子效價與抗Ⅱa因子的效價比應符合規定。
糜蛋白酶的效價測定
效價測定照紫外可見分光光度法(通則0401)測定。底物溶液冰凍保存,但不得反復凍融。取N-乙酰-L酪氨酸乙酯23.7mg,置100ml量瓶中,加磷酸鹽緩沖液(取0.067mol/L磷酸二氫鉀溶液38.9ml與0.067mol/L磷酸氫鈉溶液61.1ml,混合,pH值為7.0)50ml,溫熱使溶解,冷
肝素鈉的效價測定方法
抗Xa因子照肝素生物測定法(通則208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效價測定法),即得抗Ⅱa因子照肝素生物測定法(通則1208抗Ⅱa因子/抗Xa因子效價測定法),即得。抗Ⅱa因子效價應為標示值的90%~110%,抗Xa因子效價與抗Ⅱa因子的效價比應符合規定。
替考拉寧的效價測定方法
效價測定取本品適量,精密稱定,用滅菌水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1000單位的溶液,照抗生素微生物檢定法(通則1201第一法)測定。1000替考拉寧單位相當于lng的替考拉寧。
采用瓊脂擴散法進行效價測定
采用瓊脂擴散法。⑴ 將血清倍比稀釋,加入外周孔。⑵ 中間孔加動物 Ig。⑶ 37℃濕盒瓊擴 24 小時,觀察結果。
胰激肽原酶的效價測定方法
酶活力照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品適量,精密稱定,加純度項下的磷酸鹽緩沖液(pH7.0)適量使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10單位的溶液。標準品溶液取胰激肽原酶標準品,按標示單位,加上述磷酸鹽緩沖液(pH7.0)適量使溶解并定量稀釋制成每1m中含10單位的溶液。底物
含糖胃蛋白酶的效價測定
照紫外可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品,精密稱定,加鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.2~0.4單位的溶液鹽酸溶液、對照品溶液與測定法見胃蛋白酶效價測定項下。