人類滑膜原代細胞培養步驟和體會
1、將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(可不要動它),在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室;2、在超凈臺中將標本放入培養皿中,加入α-MEM洗滌;3、獲得組織切開,仔細辨認于關節反折處及增生的白色光滑的滑膜組織,附于關節軟骨面的增生的血管翳也為滑膜組織(可作另一管消化),仔細剔除脂肪組織,用α-MEM洗二次(以去除紅細胞),放在小青瓶中用解剖剪銳性切碎4、用雙倍獲得組織的體積含有4mg/mlⅠ型膠原酶的α-MEM消化37℃孵育120分鐘(在此期間震動混勻數次);5、30分鐘后收集第一管細胞:細胞懸液經70μm細胞濾網過濾,用1500-2000轉離心6分鐘,上清為Ⅰ型膠原酶加入未過濾網的組織,繼續用于消化;6、離心管底細胞用α-MEM離心洗滌2次,每次用α-MEM重懸浮后用1500-2000轉,離心6分鐘,最后一次用記數板觀察到有細胞。細胞最終懸浮于含有10%胎牛血清的α-MEM中,接......閱讀全文
人類滑膜原代細胞培養步驟和體會
1、將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(可不要動它),在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室;2、在超凈臺中將標本放入培養皿中,加入α-MEM洗滌;3、獲得組織切開,仔細辨認于關節反折處及增生的白色光滑的滑膜組織,附于關節軟骨面的增生的血管翳也為滑膜組織(
正常滑膜細胞原代培養
正常滑膜細胞原代培養實驗材料:1.?實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:1.?將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2.
正常滑膜細胞原代培養
實驗材料:實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2. 用手術剪剖開其四肢皮膚與肌肉
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人原代類風濕關節炎滑膜成纖維細胞
細胞詳述:滑膜是關節囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節腔內的所有結構,除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層,即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層),是血管豐富的關節囊內膜,
人滑膜細胞培養實驗
實驗方法原理滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型細胞的功能是合成輸出蛋白且與透明質酸酶的形成密切相關,同時與
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型
關節炎中滑膜方向的細胞模型
為了跟前文“關節炎中軟骨破壞方向的細胞模型”相對應,這里標題還用了“關節炎”這個描述,但其實,關節炎中涉及滑膜炎癥的主要是類風濕關節炎(rheumatoid arthritis,RA)。也是關節炎中研究最廣泛的類型之一。在類風濕關節炎發病進展中,至少涉及三大類細胞,免疫細胞,骨細胞,滑膜細胞。免疫細
原代胎兒腎小球系膜細胞培養方法步驟
取引產胎兒腎,無菌操作,1小時內完成。2用生理鹽水沖洗干凈。取腎皮質,用小外科剪剪成碎麼。依次研磨過80目,100目,200目篩網,不斷用生理鹽水沖洗,最后在200目篩網上收集腎小球,先用0。4%的膠原酶四消化半小時,接種于50ML的培養瓶里,加含有20%小牛血清的DMEM培養基放二氧化碳培養箱培養
滑膜液肉眼檢查的簡介
滑膜液肉眼檢查是對滑膜液抽取并進行肉眼觀察的檢查。關節腔是由關節面與滑膜圍成,內含滑膜液。當關節發生炎癥等疾病時,常累及滑膜,其正常的化學成分和細胞成分發生改變,因此進行滑膜液的分析對診斷關節疾病具有實用的臨床價值。
足部滑膜軟骨瘤病例分析
病例介紹患者女,55歲。因“發現右足底腫物并增大2年,足麻木1個月”,于2020年5月8日入院。患者2年前發現右足底腫物,約花生米大小,無疼痛等不適,不影響行走,故未行診治;后腫物逐漸增大,影響行走,就診前1個月出現右足底腫物遠端及右足第1、2足趾跖側皮膚感覺麻木。入院檢查:右足底中部內側局部明顯隆
幾種常見關節滑膜液的特征
正常關節和幾種常見關節炎時滑膜液的特征,如圖: ? 顏色透明度 粘稠度 粘蛋白凝塊 細胞計數及分類 蛋白質 糖 結晶 細胞涂片或培養 正常關節
滑膜性骨化生的疾病概述
滑膜性骨化生,也稱骨軟骨瘤病和滑膜性軟骨瘤病。是滑膜細胞化生而形成的軟骨或骨船骨性結構的游離體。見于40歲以上的病人,可發生于任何大關節,其中以膝關節最常見,主要癥狀為活動時突然出現膝關節交鎖,有時可使病人跌倒。病因尚不清楚,關節滑膜增生和增殖的絨毛逐漸肥大,成為關節內帶蒂的化生軟骨細胞塊,蒂與
滑膜液的顯微鏡檢查
1.細胞計數:細胞少時應用FuchsRosenthal計數板進行計數,如用改良自動控制牛鮑計數板應增加計數面積。當細胞多時可用生理鹽水稀釋后計數,若粘稠度高時,計數前可用透明質酸酶處理降低粘稠度后再取標本。如契約大量紅細胞而干擾折細胞計數時,應用0.1mol/L鹽酸液或含10g/L白皂素的氯化鈉液
原發性鎖骨滑膜肉瘤病例分析
臨床資料?患者,男,46歲,因發現右鎖骨腫物伴疼痛1年余,加重3個月入院。患者2015年4月無明顯誘因下發現右鎖骨內側腫物,約拇指大小,伴持續性鈍痛。自2016年2月,腫物迅速增大至約雞蛋大小,疼痛明顯加劇,并出現右側肩胛骨岡上區放射痛,遂于2016年5月25日至我院就診。入院后查體:右鎖骨胸骨端腫
關于滑膜液常規檢查的簡介
滑膜液常規檢查是對骨膜液進行的一項檢查。滑膜液位于關節腔內,也稱關節液或滑液,是由滑膜下毛細血管內的血漿濾過,經過滑膜進入關節腔,同時滑膜細胞也分泌許多透明質酸,共同形成滑膜液,以潤滑關節,營養軟骨,在正常情況下,關節腔的滑液量很少,不宜抽取,即使大關節如膝關節最多也不超過4ml,各種原因所致的
原發性肺滑膜肉瘤病例分析
病例男,45歲,主因“咳嗽咳痰,痰中帶血70余天”入院。體檢:胸廓對稱、無畸形,兩肺叩清,雙肺呼吸音粗,右肺可聞及哮鳴音,左肺(-)。多層螺旋CT掃描示:右肺下葉團塊狀軟組織密度腫塊,大小約8.3 cm×6.4 cm×6.9 cm,與胸膜關系密切,呈淺分葉,腫瘤前外緣可見結節,邊緣未見毛刺,
細胞免疫治療對晚期滑膜肉瘤到底有沒有效?
談到晚期滑膜肉瘤的細胞免疫治療,到底有沒有新的進展?答案是有的,這就是TCR-T技術(T細胞受體轉導T細胞療法)。 美國癌癥研究所的StevenRosenberg教授團隊最早開展了TCR-T治療晚期滑膜肉瘤和晚期黑色素瘤的臨床研究。他們于2011年3月在臨床腫瘤學雜志(Journal of C
原發咽旁滑膜肉瘤病例分析
滑膜肉瘤(synovial sarcoma,SS)是來源于關節、滑膜及腱鞘滑膜的軟組織的惡性腫瘤,以四肢的大關節為好發部位,位于頭頸部原發的滑膜肉瘤較為少見。昆明醫科大學附屬口腔醫院口腔頜面外科近期收治1例原發咽旁滑膜肉瘤,現報道如下。?1.病例報告?患者,男,15歲,2016年4月因嘔吐發現左側咽
關于滑膜性軟骨瘤病的簡介
1900年Reichel首次報道,原因不明。以滑膜上形成軟骨結節為特征,這些軟骨小體多呈砂粒狀,多時可達數十個,可帶蒂生長,向關節腔內突出,亦可脫落進入關節腔內,成為游離體(關節鼠),受關節滑液滋養而逐漸長大,后期軟骨結節可發生鈣化或骨化,所以也稱滑膜骨軟骨瘤病。此病好發于關節,尤以膝、髖、肘、
關于滑膜骨軟骨瘤的基本介紹
滑膜骨軟骨瘤也稱原發性滑膜軟骨瘤病、滑膜骨軟骨瘤病、滑膜軟骨性化生。有統計報道認為占滑膜腫瘤或瘤樣病變的6.7%-22.6%,發病年齡可從兒童期到80歲,男女發病比例為2:1。常累及一個關節。發生在膝關節者約占2/3,其次是髖關節、肘關節和肩關節,其他關節少見。多數人認為滑膜骨軟骨瘤是一種病因不
關于滑膜液肉眼檢查的基本介紹
滑膜液肉眼檢查是對滑膜液抽取并進行肉眼觀察的檢查。關節腔是由關節面與滑膜圍成,內含滑膜液。當關節發生炎癥等疾病時,常累及滑膜,其正常的化學成分和細胞成分發生改變,因此進行滑膜液的分析對診斷關節疾病具有實用的臨床價值。 量(膝關節):
滑膜液肉眼檢查的臨床意義
異常結果: (1)、量增多:非炎癥性、炎癥性或化膿性關節炎。量減少并不表示無重要關節病變。 (2)、顏色: 草綠色:類風濕關節炎、慢性積液。 血色(橙黃色):色素性絨毛結節性滑膜炎。 白色:痛風性關節炎存在大量結晶時。 血性:維生素C缺乏癥(壞血病)、血友病。 (3)、黏稠度:
滑膜液肉眼檢查的注意事項
異常結果: (1)、量增多:非炎癥性、炎癥性或化膿性關節炎。量減少并不表示無重要關節病變。 (2)、顏色: 草綠色:類風濕關節炎、慢性積液。 血色(橙黃色):色素性絨毛結節性滑膜炎。 白色:痛風性關節炎存在大量結晶時。 血性:維生素C缺乏癥(壞血病)、血友病。 (3)、黏稠度:
滑膜液肉眼檢查的注意事項
檢查前: 關節腔穿刺應由有經驗的臨床醫師在嚴格的無菌操作下進行 檢查時:正常關節腔液量甚少,約為2ml以下,病人應配合好醫生抽取工作。 不適宜人群:沒有
滑膜液肉眼檢查的檢查過程
首先在無菌條件下,行關節腔穿刺,抽出關節液,分別作常規檢查和特殊檢查。常規檢查包括用肉眼觀察和顯微鏡檢查。 肉眼觀察內容主要包括關節液的顏色、清亮度、粘性、自發凝集測定和粘蛋白凝集試驗。正常關節液是一種呈草黃色、清亮、透明的粘性液體,可含少量細胞成分,白細胞計數為200-750個/mm3。若滑