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  • 關于反轉錄酶醫學發展的介紹

    細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重復序列向染色體末端的添加由端粒酶所催化。端粒酶組成包括RNA組分、端粒酶相關蛋白和端粒酶反轉錄酶。其中端粒酶反轉錄酶對端粒酶活性起關鍵作用。在人體,端粒酶活性存在于干細胞、生殖細胞、部分有再生能力的體細胞及絕大多數惡性腫瘤組織中。它的高活性是腫瘤細胞惡性增殖的一項重要條件,但其適量表達又具有延長細胞壽命的作用。隨著干細胞分化的進行,端粒酶活性也隨之降低,至終末分化細胞已無法測到端粒酶。適度上調和維持干細胞的端粒酶活性,對提高干細胞體外復制和擴增能力及揭示干細胞衰老機制都將具有重要意義。近期研究發現,在富含表皮干細胞的表皮基底層和生長期......閱讀全文

    關于反轉錄酶醫學發展的介紹

      細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重

    關于反轉錄酶的醫學發展介紹

      細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重

    關于逆轉錄酶的醫學發展介紹

      細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重

    關于轉錄酶的特點介紹

      RNA聚合酶催化RNA的合成,其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點:  ①以DNA為模板;  ②催化核苷酸通過聚合反應合成核酸;  ③聚合反應是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯鍵的反應;  ④以3’→5’方向閱讀模板,5’→3’方向合成核酸;  ⑤按照堿基配對原則忠實轉錄模板序列。

    關于轉錄酶的參與過程介紹

      該酶需要四種核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作為RNA聚合酶的底物,DNA為模板,二價金屬離子Mg2+、Mn2+是該酶的必需輔因子。其催化的反應表示為:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA鏈的合成方向也是5’→3',第一個核苷酸帶有3個磷酸基。

    關于反轉錄酶的相關介紹

      反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'

    關于轉錄酶的基本信息介紹

      RNA聚合酶(RNA polymerase)是以一條DNA鏈或RNA為模板,三磷酸核糖核苷為底物、通過磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶,因為在細胞內與基因DNA的遺傳信息轉錄為RNA有關,所以也稱轉錄酶。

    關于酶蛋白的醫學用途介紹

      以免疫分析為基礎的儀器(dca2000)在最近幾年中得到推廣酶蛋白,大約在7分鐘內就能讀取數據,并且僅使用少量的毛細血管血液標本,因此,在糖尿病門診,用糖化血紅蛋白評價糖尿病患者血糖控制的平均水平已成為常規。hbalc正常參考值為

    關于反轉錄酶的質量控制介紹

      1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。  2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。  3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。  4.

    關于反轉錄酶的使用說明介紹

      M-MLV反轉錄酶比AMV反轉錄酶缺乏連續性,因此要獲得像AMV反轉錄酶反應中產生同樣量的cDNA就要求使用較多單位的M-MLV反轉錄酶。用1微克的mRNA起始合成第一條鏈的cDNA,要用8單位的M-MLV反轉錄酶才相當于1單位的AMV反轉錄酶的作用。該酶很容易被亞精胺(Spermidine)所

    關于反轉錄酶的質量控制的介紹

      1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。  2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。  3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。  4.

    關于反轉錄酶的社會效益的介紹

      由它催化轉錄合成的DNA稱為互補DNA(cDNA)。通常情況下,細胞內的轉錄應由DNA到RNA的,所得RNA為信使RNA(mRNA)供蛋白質合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要實現自身擴增,必須具有DNA,因此先由RNA逆轉錄合成cDNA再由cDNA轉錄出RNA。逆轉錄酶可用RT—PCR,將R

    關于酶法多肽的醫學價值介紹

      生物酶合成法,對于發展我國的生物醫藥,保健品,提高人類的健康水平,具有重要意義。人們用生物酶合成法獲得許多生物活性肽。如,全卵蛋白肽、大豆多肽、酪蛋白磷酸肽(CPP)、菜籽多肽、玉米多肽、蕎麥多肽、薏苡仁多肽、鷹豆多肽、絲蛋白肽等等。這些肽對人體免疫,抗菌,抗輻射,調脂,降血壓,降血糖,減肥,護

    關于發酵酶蛋白的醫學用途介紹

      以免疫分析為基礎的儀器(dca2000)在最近幾年中得到推廣酶蛋白,大約在7分鐘內就能讀取數據,并且僅使用少量的毛細血管血液標本,因此,在糖尿病門診,用糖化血紅蛋白評價糖尿病患者血糖控制的平均水平已成為常規。hbalc正常參考值為<6%,而在血糖控制良好的糖尿病患者應為<7%。當糖尿病患者的血糖

    關于逆轉錄酶的合成步驟介紹

      1、使用前每個組份輕輕混勻,然后2000rpm離心20s  2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管,依次加入2~5μgRNAnμL  3、65℃保溫5min,然后冰浴5min;  4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份  RNase抑制劑(40u/μL)0.5μL  10×M-MLV

    關于AMV逆轉錄酶的基本介紹

      amv逆轉錄酶分離自禽類成髓細胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改進而來。分離得到的酶是分子量為157kd的αβ全酶。amv逆轉錄酶經高度純化,完全無核酸酶污染。amv逆轉錄酶可用于cdna合成,也可用于rna和dna的雙脫氧測序。amv逆轉錄酶以總rnd或polya+rnd為模板,具有以r

    關于基因轉錄的轉錄因子介紹

      轉錄因子(transcription factor)是起調控作用的反式作用因子。轉錄因子是轉錄起始過程中RNA聚合酶所需的輔助因子。真核生物基因在無轉錄因子時處于不表達狀態,RNA聚合酶自身無法啟動基因轉錄,只有當轉錄因子(蛋白質)結合在其識別的DNA序列上后,基因才開始表達。轉錄因子的結合位點

    關于復制酶的發展歷史介紹

      1990年,美國科學家Golemboski在研究TMV基因組的編碼54KD蛋白的基因時,意外地發現將該基因轉入煙草后獲得的轉其因煙草能完全抵抗TMV的侵染。國內有些實驗室很快克隆了TMV和CMV的復制酶基因,并獲得了高抗性煙草轉基因工程植株。利用病毒復制酶基因介導的抗性與上述其他基因介導的抗性相

    關于逆轉錄酶的使用說明介紹

      M-MLV反轉錄酶比AMV反轉錄酶缺乏連續性,因此要獲得像AMV反轉錄酶反應中產生同樣量的cDNA就要求使用較多單位的M-MLV反轉錄酶。用1微克的mRNA起始合成第一條鏈的cDNA,要用8單位的M-MLV反轉錄酶才相當于1單位的AMV反轉錄酶的作用。該酶很容易被亞精胺(Spermidine)所

    關于逆轉錄酶的注意事項介紹

      在進行RT反應之前,應考慮以下幾個方面:  1、RNA  成功的cDNA合成來自高質量的RNA,高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑,如EDTA或SDS。在提取RNA的過程中,要特別防止RNase的污染,同時在逆轉錄反應中經常加入RNase抑制劑以增加cDNA合成的長度和產量。R

    關于逆轉錄酶的質量控制介紹

      1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。  2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。  3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。  4.

    關于逆轉錄酶的社會效益介紹

      由它催化轉錄合成的DNA稱為互補DNA(cDNA)。通常情況下,細胞內的轉錄應由DNA到RNA的,所得RNA為信使RNA(mRNA)供蛋白質合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要實現自身擴增,必須具有DNA,因此先由RNA逆轉錄合成cDNA再由cDNA轉錄出RNA。逆轉錄酶可用RT—PCR,將R

    關于逆轉錄酶的基本信息介紹

      反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'-OH

    關于體外轉錄的轉錄條件介紹

      轉錄模板必須滿足:  1. 在基因組全長克隆過程中,在正向引物5‘末端添加T7啟動子序列;  2. 以T7啟動子作為體外轉錄啟動子,在啟動子后面靶位序列連續帶有3個G,轉錄效率最 高;  3. 在正向引物5/端添加一個帽子G,有利于提高體外轉錄RNA分子的侵染活性。

    反轉錄酶的合成步驟介紹

      1、使用前每個組份輕輕混勻,然后2000rpm離心20s  2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管,依次加入2~5μgRNAnμL  3、65℃保溫5min,然后冰浴5min;  4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份  RNase抑制劑(40u/μL)0.5μL  10×M-MLV

    反轉錄酶的合成步驟介紹

      1、使用前每個組份輕輕混勻,然后2000rpm離心20s  2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管,依次加入2~5μgRNAnμL  3、65℃保溫5min,然后冰浴5min;  4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份  RNase抑制劑(40u/μL)0.5μL  10×M-MLV

    轉錄酶的基本分類介紹

      通常可根據生物的類別,將RNA聚合酶分為原核生物RNA聚合酶、真核生物RNA聚合酶。  原核生物和真核生物的RNA聚合酶有共同特點,但在結構、組成和性質等方面又不盡相同。  (1)原核生物RNA聚合酶 研究得最清楚的是大腸桿菌RNA聚合酶。該酶是由五種亞基組成的六聚體(α2ββ'ωσ)分

    多反轉錄酶的多種酶活性的介紹

      ①RNA指導的DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反轉錄酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高 。  ②RNase

    關于纖維蛋白溶酶的醫學檢查介紹

      一、纖維蛋白溶酶的分類:血液生化檢查 > 酶類測定?  二、纖維蛋白溶酶的原理:纖維蛋白可與染料剛果紅結合成不溶于水的復合物,被檢血漿中的纖維蛋白溶酶可水解纖維蛋白釋放出剛果紅,在酸性條件下剛果紅顯藍色,其顏色的深淺與血漿纖維蛋白溶酶活性成正相關。?  三、纖維蛋白溶酶的試劑  (1)硼酸緩沖液

    關于轉錄因子的轉錄抑制區的介紹

      也是轉錄因子調控表達的重要位點,但是對其作用機理研究尚不深入。可能的作用方式有三種:1)與啟動子的調控位點結合,阻止其它轉錄因子的結合;2)作用于其它轉錄因子,抑制其它因子的作用;3)通過改變DNA的高級結構阻止轉錄的發生。  轉錄因子必須在核內作用,才能起到調控表達的目的。因此,轉錄因子上的核

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